Диссертация (1152193), страница 17
Текст из файла (страница 17)
Результаты расчётов экономической эффективности показывают, что приувеличении затрат на ФП ПЕП-П при кормлении во 2-ой опытной группе на 72руб. было дополнительно получено 4 кг прироста живой массы, выручка отреализации дополнительно полученной живой массы составила 488 руб. на головупо сравнению с контрольной группой. При увеличенной дозировке ФП ПЕП-П в3-ей опытной группе дополнительный доход составил 576 руб. на голову; прииспользовании ФП МЭК-П в 4-ой опытной группе получен дополнительныйдоход в сумме 628 руб.
на голову.Таблица 35 – Экономическая эффективность использования ферментныхпрепаратов ПЕП-П и МЭК-П на 1 голову за 90-дневный период откорма свинейПоказателиЖивая масса в начале периода, кгЖивая масса в конце периода, кгПрирост живой массы, кгДополнительный прирост на 1гол., кгСтоимость 1 кг живой массы, руб.Стоимость приростадополнительной живой массы,руб.Количество израсходованногокомбикорма, кгКоличество израсходованногопрепарата, г на 1 гол.Стоимость 1 кг препарата, руб.Стоимость израсходованногопрепарата, руб.Получен дополнительный доходна 1 гол., руб.Группа1–2–3–контрольная опытная опытная54,754,655,1109,5113,4115,354,858,860,24–опытная55,0114,859,8-4,05,45,0140140140140-560756700360360360360-7218072-100010001000-7218072-488576628Таким образом, исследования показали, что внесение ФП ПЕП-П и МЭК-Пв комбикорма повышало доступность и переваримость питательных веществкорма; способствовало нормализации микрофлоры кишечника за счёт сниженияколичества непереваренного белка; повышало продуктивность животных;улучшало экономические показатели, что открывает перспективу для широкого115использования новых ФП в качестве новой кормовой добавки в животноводстве(Приложение Г).
Получен Патент РФ (Приложение Б).116ВЫВОДЫ1. Методами генной инженерии с использованием системы экспрессиигенов на основе штамма-реципиента P. canescens RN3-11-7 niaD- полученыстабильные высокоактивные рекомбинантные продуценты грибных протеаз сразличной специфичностью действия (без существенного снижения базовогоуровня собственного комплекса гемицеллюлаз): P. canescens Pep-4 – продуценткислой аспартатной протеазы – пенициллопепсина; P.
canescens RN3-11-7-7 –продуцент пенициллопепсина и лейцинаминопептидазы; P. canescens Oryzin-25 –продуцент грибной сериновой протеазы – оризина.2.Успешнопроведеныпроизводственныеиспытанияпроцессакультивирования новых рекомбинантных штаммов P. canescens Pep-4 и P.canescens RN3-11-7-7 в промышленных условиях (ООО «Агрофермент»),позволившиеаспартатноймасштабироватьпротеазы,технологиюполучениялейцинаминопептидазыипрепаратовксиланазыикислойполучитьпромышленные партии ферментных препаратов.3.Исследованкомпонентныйсоставпромышленныхферментныхпрепаратов ПЕП (пенициллопепсина) и ПЕП-ЛАП (пенициллопепсина илейцинаминопептидазы) и лабораторного ферментного препарата Оризина.Установлено, что содержание рекомбинантных протеаз составляет 20–25% отобщегопулабелка,ксиланазы–15–20%,α-L-арабинофуранозидазыиарабиноксилан-арабинофураногидролазы – 25–30%, β-1,3-глюканазы – 2–5%, чтосвидетельствует о наличии в составе рекомбинантных ферментных препаратовкомплекса протеолитических и гемицеллюлолитических ферментов.4.
Определены рН- и температурные оптимумы действия различныхферментов, входящих в состав рекомбинантных ферментных препаратов – дляпенициллопепсина они составили рН 4,0–5,0 и 50–55°С; для сериновой протеазы –рН 9,5–11,0 и 30–40°С; для лейцинаминопептидазы – рН 8,0–9,0 и 70°С; дляксиланазы – рН 3,5–4,5 и 55–65°С. Ферменты обладали высокой стабильностьюпри температуре 30-50ºС.1175.ПроведеныиспытанияферментногопрепаратаПЕП-ЛАП(пенициллопепсин и лейцинаминопептидаза) по интенсификации спиртовогоброжения.
Показано, что обработка им пшеничного сусла на стадии сбраживанияпозволиласущественноинтенсифицироватьпроцессдрожжегенерациииброжения, увеличить выход спирта на 1,29%.6. Проведены испытания in vivo влияния мультиферментных препаратов(ПЕП и ПЕП+Оризин) на продуктивность и физиологическое состояние свинейпри откорме. Включение этих препаратов в качестве кормовой добавки вкомбикормаизсмешанногосырьяоказалоположительноевлияниенапродуктивность, физиологические процессы, клиническое состояние животных,пищеварение, развитие внутренних органов и качественные показатели мясаоткормочного молодняка свиней.7.Расчётэкономическойэффективностипроизводствасвининысиспользованием новых ферментных препаратов показал (в ценах 2016 г.), что приувеличении на 1 голову живой массы свиней от 55 до 110–115 кг получендополнительный доход в размере 488 рублей (дозировка ПЕП 200 г/т); 576 рублей(дозировка ПЕП 500 г/т) и 628 рублей (дозировка МЭК 200 г/т).118СПИСОК СОКРАЩЕНИЙа.к.
– аминокислоты (аминокислотная)а.о. – аминокислотные остаткиАБФА – арабинофуранозидаза А, арабиноксилан-фураногидралаза А (70 кДа)АФ – α-L-арабинофуранозидаза (60 кДа)АПК – агропромышленный комплексАС – амилолитическая активностьБГАЛ – β-галактозидазаБГЛ – β-1,3-глюканазаБСА – бычий сывороточный альбуминВКМ – всероссийская коллекция микроорганизмовВПМ – вегетативный посевной материалВС – восстанавливающие сахараГлС – глюкоамилазная активностьДДС-ЭФ – электрофореза в денатурирующих условияхКЖ – культуральная жидкостьКсА – ксиланазная активностьКсилА – эндо-1,4-β-ксиланаза (ксиланаза А)ЛАП – лейцинаминопептидазаЛАПА – лейцинаминопептидазная активностьМЭК – мультиэнзимная композицияНГ – нитрозогуанидинНКП – некрахмальные полисахаридыПААГ – полиакриламидный гельПЕП – пенициллопепсинПС – протеолитическая активностьПЦР – полимеразная цепная реакцияРМ – минимальная агаризованная среда для отбора трансформантовСМ – соевая мука119СШ – соевый шротТХУ – трихлоруксусная кислотаУК – ультраконцентратУФ – ультрафиолетФМСФ – фенилметансульфонилфторидФП – ферментный(ые) препарат(ы)ЦГ – целевой генabfa – ген арабиноксилан-фураногидролазы Аalp – ген оризинаamp – ген устойчивости к ампициллинуbgas – ген β-галактозидазыlap1 – ген лейцинаминопептидазыniaD – ген нитратредуктазыpepA – ген пенициллопепсинаxlnR – ген транскрипционного активатора ксиланазыxylA – ген эндо-1,4-β-ксиланазы120СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ1.Стратегия развития пищевой и перерабатывающей промышленностиРоссийской Федерации на период до 2020 года [Электронный ресурс]:распоряжение правительству РФ от 17.04.2012 № 559-р, ред.
от 30.06.2016№1378-р.–Режимдоступа:URL:http://static.government.ru/media/files/65bZISIOP6bA0VSJ67GnnpKIhhoHhxgP.pdf (14.01.2019)2.Ward O.P. Proteases, production // Encyclopedia of Microbiology / O.P. Ward,M.B. Rao, A. Kulkarni; edited by M. Schaechter. – Third edition. – 2009. – P.495–511.3.Rao M.B. Molecular and biotechnological aspects of microbial proteases /M.B. Rao, A.M. Tanksale, M.S. Ghatge, V.V. Deshpande // Microbiol. andMol. Biol. Rev. – 1998. – V.
62(3). – P. 597–635.4.Mamo J. The role of microbial aspartic protease enzyme in food and beverageindustries / J. Mamo, F. Assefa // Journal of Food Quality. – 2018. – V. 2018. –15 p.5.СербаЕ.М.Биотехнологическиеосновыресурсосберегающейпереработки зернового сырья и вторичных биоресурсов: автореф. дис. …д-ра биол. наук: 03.01.06 / Серба Елена Михайловна.
– Щёлково, 2015. –51 с.6.Римарева Л.В. Роль протеаз в спиртовом брожении / Л.В. Римарева, М.Б.Оверченко // III Международный научно-практический симпозиум«Микробные биокатализаторы для перерабатывающих отраслей АПК», 27апреля 2006, Москва. – С. 127–137.7.Толкачева А.А. Ферменты промышленного назначения – обзор рынкаферментных препаратов и перспективы его развития / А.А. Толкачева,Д.А. Черенков, О.С. Корнеева, П.Г.
Пономарев // Вестник ВГУИТ. – 2017.– Т.79, №4. – С. 197–203.1218.Гришин Д.В. Биоактивные белки и пептиды: современное состояние иновые тенденции практического применения в пищевой промышленностии кормопроизводстве / Д.В. Гришин, О.В. Подобед, Ю.А. Гладилина, М.В.Покровская, С.С. Александрова, В.С. Покровский, Н.Н. Соколов // Вопр.Питания. – 2017. – Т.86. – № 3. – С. 19–31.9.Souza P.M. A biotechnology perspective of fungal proteases / P.M. Souza,M.L. Assis Bittencourt, C.C.
Caprara, M. Freitas, et al. // Brazilian Journal ofMicrobiology. – 2015. – V. 46(2). – P. 337–346.10. Nirmal N.P. Fungal Proteases: An Overview / N.P. Nirmal, S. Shankar, R.S.Laxman // International Journal of Biotechnology and Biosciences. – 2011. –V. 1(1). – P. 1–40.11. Sinitsyn A.P. Penicillium canescens host as the platform for development of anew recombinant strain producers of carbohydrases // Microorganisms inBiorefineries / A.P.
Sinitsyn, A.M. Rozhkova / Edited by B. Kamm. – Berlin:Springer-Verlag, 2015. – P. 1–19.12. Лысенко Л.А. Протеолитическая регуляция биологических процессов /Л.А. Лысенко, Н.Н. Немова, Н.П. Канцерова. – Петрозаводск: Карельскийнаучный центр РАН, 2011.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
