Диссертация (1151502), страница 4
Текст из файла (страница 4)
Вочагах поражения и в культурах выявляют нитевидную и кокковидную формывозбудителя дерматофилеза [157].Dermatophilosis является зооантропонозной болезнью, встречается усамых разных видов животных, в том числе у крупного рогатого скота,лошадей, овец, коз, оленей, кошек, газелей, жирафов, лис, колумбийскихсусликов, белок, хвостатых кроликов, сов, обезьян, полярных медведей,тюленей, свиней, ящериц, крокодилов, собак и людей [106,110,129].19Для выращивания D. congolensis в аэробных условиях пригодны обычныебактериологические питательные среды со слабощелочной рН (7,2-7,4).Вследствие того, что возбудитель является гемофильным микроорганизмом, всреду необходимо добавлять сыворотку крови или 5% цельной кровиживотных, особенно при термостатировании свежевыделенных культур.Следует также отметить, что на среде Сабуро возбудитель дерматофилеза некультивируется.Оптимальная температура выращивания D.
congolensis составляет 37 ºС.Для образования коккообразных клеток культивирование проводят при 25-30ºС,однаковремяинкубацииприэтомудлиняется.Выращиваниемикроорганизма при более низких температурах (22 ºС) замедляет процессроста культуры до 3-5 дней вместо 24-48 ч. В процессе роста в сывороточномМПБ D. congolensis, через 36-48 ч после посева в среду, содержащую 5-10%сыворотки крови крупного рогатого скота или лошади, образует на днепробирки осадок из беловатых хлопьев, не разбивающихся при встряхиванииили плотно приставших к стенкам пробирки. Иногда мелкие хлопья могутподниматься на поверхность, образуя тем самым кружевную вуаль, котораяпогружается при малейшем встряхивании пробирки.
При этом жидкая средаостается прозрачной или приобретает опалесцирующий вид. На дне пробиркимогут быть также видны медленно развивающиеся сферические, плотные белоперламутровые, слегка покрытые пушком элементы, напоминающие грибдождевик. От них отходят короткие толстые искривленные нити. При этом,остальная питательная среда остается по виду неизмененной. В культуреразнообразные формы возбудителя становятся видимыми под бинокулярнойлупой при косом освещении пробирки и имеют вид маленьких непрозрачных,несимметричных неровных шариков с многочисленными нитями, которыемогут быть направленны во все стороны [7].В препаратах из культур обычно присутствуют нитевидные формывозбудителя, образующие хлопья.
Сначала образуются соединенные вместе 2-320крупных клетки, дающие начало нескольким гифам. Затем число и ширинанитей, отходящих от центра, увеличивается, после чего образуется клубочек сотходящими во все стороны концами нитей, многие из которых разделяются намелкие кокки с сохранением мицелиальной структуры.Следует отметить, что некоторые штаммы на поверхности среды могутобразовывать желтую пленку, легко разбивающуюся при встряхивании, а надне пробирки – рыхлый незначительный мелкозернистый осадок. В препаратахиз таких культур видны мелкие коккообразные клетки, иногда – фрагментынитей, состоящих из крупных кокков.При росте возбудителя в кровяном МПБ нижняя часть столбика средыприобретает бордовый, а верхний – желтоватый оттенок. На стенках пробиркиприсутствуют светло-желтые крупинки, на дне – обильный темно-коричневыйрыхлый осадок.
В препаратах из культур обнаруживаются нити псевдомицелия,на концах которых могут быть вздутия, разделившиеся на крупныекоккообразные клетки. В некоторых случаях на поверхности среды образуетсяпленка, в препаратах которой выявляют короткие сегменты нитей, состоящихиз кокков. Через 24-48 ч (в некоторых случаях через 48-72 ч) после посева D.congolensis в сывороточный МПА на поверхности среды образуются мелкиебеловато-серые с желтоватым оттенком колонии, слегка углубленные в агар.Затем они увеличиваются, становятся бугристыми, морщинистыми, плотноприставшими к поверхности среды. В препаратах, приготовленных из культур,видны короткие узкие цепочки из кокков, а также небольшое количествофрагментов мицелия.
В старых (более 7 сут) культурах заметны широкие нити,состоящие из многих рядов кокков. Однако, некоторые штаммы растут собразованием желтоватых песчаных колоний, а в препаратах из них выявляюттолько кокковидные формы возбудителя [7, 8].В кровяном МПА культура D. congolensis развивается аналогично ростуна сывороточном МПА, но немного медленнее. Образующиеся колонии имеюттемно-вишневый цвет, вокруг них видна слабая зона гемолиза типа β. В21приготовленныхпрепаратахвыявляютширокиенитиизкокковипсевдомицелий. При культивировании на молочном агаре (по Эйкману) через36-48 ч после посева отмечается рост на поверхности среды беловато-желтыхколоний.
Сливаясь, они образуют сморщенную пленку, которая легкоснимается, обнажая изрытую поверхность среды. В препаратах обнаруживаюткокковидные формы микроба и зооспоры в виде коротких палочек, а враздавленной капле – подвижные зооспоры. Некоторые штаммы могутформировать сухие желтые порошковидные колонии, способные оставаться внеизменном виде от 4 до 21 дня. В окрашенных препаратах, приготовленных изтаких культур, находят лишь кокковидные элементы микроорганизма [7].На среде Левёнштейна возбудитель дерматофилеза растет в видесеровато-белых, сморщенных, выступающих над поверхностью среды колоний.Следует отметить, что цвет среды вокруг колоний меняется: синеет илиприобретает белый оттенок.
На 6-7 день колонии сливаются, становятсяослизлой консистенции и имеют вид одной общей клейкой тягучей пленки. Впрепаратах выявляются нити, содержащие 1-2 ряду кокков, а такжепсевдомицелий со вздутиями.D. congolensis при высушивании способен сохранять жизнеспособностьдостаточно длительное время. Так, по данным некоторых исследователей,высушенные в вакууме штаммы сохраняют свою жизнеспособность при 4 ºС втечение 61 мес. По данным В.Д. Кузнецова (1962), лиофильно высушенныекультуры могут оставаться жизнеспособными в течение 6-8 лет [44].В кокковой форме и в высушенном состоянии возбудитель способенсохранять жизнеспособность после 15-минутного прогревания при 100 ºС, атакже выдерживает 9-дневное нагревание около 42-45 ºС.
Однако в нитевиднойформе он погибает через 15 мин при воздействии 50 ºС или через 24 часа принагревании до 45 ºС.При замораживании D. congolensis погибает обычно за 5 дней. Но вглубине агара возбудитель болезни может оставаться жизнеспособным многие22месяцы. Из литературных источников также известно, что лиофилизированныепри–70ºСмолодыекультурыданногомикроорганизмаостаютсяжизнеспособными в течение длительного времени.Устойчивость возбудителя дерматофилеза во внешней среде высокая.Roberts D.S. (1965) в своих работах показал, что в сухих почвах,инфицированных D.
congolensis, микроорганизм остается жизнеспособным втечение 4 мес. По данным других исследователей, в патологическом материале(корках) возбудитель может сохранять жизнедеятельность до 7 мес., а подругим данным – до 9 мес.В опытах Roberts D.S. с патологическим материалом подтвердил, что D.congolensis остается жизнеспособным в течение 2-2,5 лет хранения прикомнатной температуре. В чистой культуре на агаровой среде возбудительпогибал через 1 мес., в сывороточном МПБ – через 4 мес.
[147].По данным отдельных авторов на поверхности сывороточного МПА D.congolensis остается жизнеспособным при 4 ºС в течение 6-8 мес., под слоемвазелинового масла в этих же условиях хранения – 8 мес. Установлено, чтохранение патологического материала при –20 ºС обеспечивает выживаемостьвозбудителя дерматофилеза в течение 31-37 мес., при 24 ºС и относительнойвлажности 70% – 24-30 мес.
При этом патогенные свойства микроорганизмасохраняются, так как приготовленные после сроков хранения суспензии изкорок обусловливали развитие классической картины дерматофилеза приэкспериментальном заражении кроликов.Возбудитель дерматофилеза малоустойчив к воздействию различныххимических препаратов. Было установлено, что различные морфологическиеформы D. congolensis отличаются по чувствительности к химиопрепаратам.
Встадии мицелия микроорганизм погибает от действия сульфата меди вразведении 1:128000-1:256000, а в кокковидной стадии – 1:16000-1:128000.Кокковидные элементы остаются жизнеспособными после действия сульфата23цинка в разведении 1:32000, в то время как мицелий погибает приконцентрации 1:128000-1:256000.В исследованиях, проведенных Балабановым В.А. с сотр.
(1980), былопоказано бактерицидное действие 0,1%-ного раствора формалина, 0,2%-ногораствора риванола, и бактериостатическое действие 1%-ного растворакреолина, 3%-ного раствора хлорамина. Наибольший эффект был получен отприменения хлорамина: возбудитель погибал в его 2%-ном растворе, даженаходясь в корках [7].Автором было установлено, что все фунгистатические антибиотики недействуют ингибирующе на рост возбудителя дерматофилеза, в то время какмногие антибактериальные антибиотики задерживают его развитие.
Данные,полученные с культурами штаммов D. congolensis при постановке опытов наагаровой среде с пропитанной растворами антибиотиков из дисков, показали,чтовозбудительдерматофилезаустойчивкколистину,нистатину,налидиксовой и оксолиновой кислотам. Такие антибиотики, как пенициллин,террамицин,тетрациклин,ауреомицин,хлорамфеникол,эритромицин,олеандомицин только задерживали рост и развитие дерматофилезных клеток.Эти свойства антибиотиков можно использовать для обработки больныхдерматофилезом [6,7,8].1.4.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
