Диссертация (1151502), страница 7
Текст из файла (страница 7)
С помощью гистологического исследования учеными был установлен паракератоз, некроз, образование абсцессов, акантоз и гиперкератозэпидермиса [130].Дерматофилоз у человека регистрировали редко, как правило, у людей,которые содержали зараженных домашних животных. Болезнь у человекапротекает с образованием поражений кожи в виде пустулы, экссудативногошелушащегося дерматита, опрелостей и подкожных узелков [89,148,161].1.5. Патологоанатомические изменения в органах и тканях животныхпри дерматофилезеПо международной классификации мясом для пищевых целей считаетсяпродуктубояздоровыхживотных,традиционновыращиваемыхприопределенных зоогигиенических и зоотехнических условиях [6, 60, 69, 70, 71].Поэтому во многих нормативных документах регламентированы требования кмясу и методам контроля его доброкачественности.
Система HACCPобеспечивает наиболее современные требования к контролю безопасностипроизводства мяса в хозяйствах и на боенских предприятиях [28, 38, 39, 52].Мясо овец является ценным биологическим сырьем, которое используется нетолько для питания населения, оно используется также для приготовлениядиетических и специальных продуктов [28, 29, 33, 36, 51, 54, 73, 76].Мясо больных животных используется в пищевых или кормовых целях сопределенными ограничениями в зависимости от патологических процессов,развивающихся в организме [55, 56, 65].Патизменения в органах и тканях животных при дематофилезе изученыеще недостаточно хорошо. Но известно, что при дерматофилезе поражениялокализуются, в основном, на коже и характеризуются изъязвлением и35воспалением эпидермиса, сосочкового слоя дермы, а также поверхностнымфолликулитом.При осмотре павших животных отмечаются истощение, а на различныхучастках тела (голове, конечностях, стенке живота, мошонке, внутреннейповерхности бедер, вымени, хвосте и т.д.) – язвы, экссудативный дерматит иналичие некротических корочек и чешуек.
При вскрытии трупов выявляютсильно выраженную анемию, а также атрофию внутренних органов и мышц.При попадании возбудителя в печень, почки и лимфоузлы наблюдаетсяпатологоанатомическаякартина, характерная для гепатита,нефрита игиперплазии лимфоузлов. При вторичных инфекциях выявляются поражения влегких, возникшие в результате воспалительных процессов [7].По данным Балабанова В.А. (1980) при гистологическом исследованиипервичный очаг представляет собой воспалительный отек, локализующийся всосочковомслоекожиисопровождаемыймоно-иполинуклеарнойинфильтрацией, а также некрозом эпителиальных клеток.Гистопатологические изменения напоминают контактную и эндогеннуюэкзему. Отмечается кожное воспаление с вторичной эпидермической реакцией,которое выражается кровоизлияниями в области кожных сосочков в видемикрогеморрагийипроникновениемчерезэпидермисэритроцитов,макрофагов, гистиоцитов, лимфоцитов и большого количества нейтрофилов.Также выявляется воспалительный отек кожных сосочков, и быстроевыделение серозной жидкости через эпителий.В слое эпидермиса исчезает меланин, обнаруживаемый в роговыхчешуйках.Внекоторыхклеткахмальпигиеваслоянаблюдаютцитоплазматические вакуоли, свидетельствующие о застойных явлениях.Между клетками находятся полинуклеары в состоянии диапедеза.
Онисосредотачиваются в поверхностных слоях, в которых скопилась серознаяжидкость, и разделяются слоями кератинизированных клеток. В некоторыхфолликулах наблюдается диапедез полинуклеаров.36На месте гиперпластического эпидермиса располагается толстый слойхрупкого кератина – корка, которая имеет отчетливую пластинчатуюструктуру, что объясняется происходящими в слоях кожи явлениямигиперкератоза и паракератоза. В последнем случае отчетливо видна волнистаяморщинистая линия, совпадающая с неровной поверхностью неповрежденногоэпидермиса. Толстая корка состоит из изменившихся слоев паракератическойроговой оболочки, высохшей сыворотки и дегенерированных нейтрофилов.Начальные поражения имеют несколько таких слоев, более поздние – до 20-30слоев. Длительное течение болезни обусловливает признаки истощения идистрофические процессы в паренхиматозных органах, которые могут статьпричиной гибели животного [7].1.6.
Диагностика дерматофилеза у животныхДиагноз на дерматофилез в основном базируется на особенностяхвнешнего вида поражений на коже и выявлении возбудителя болезни.Микроскопическое исследование кожных корочек зараженных животныхширокоиспользуютсядляидентификацииD.congolensisотдругихмикромицелий. Микроорганизмы видны в микроскопе в виде 2-6 параллельныхрядов грамположительных кокков. Изоляция возбудителя дерматофилезаускоряется,есликорочкипоражениязамачиватьвстерильнойдистиллированной воде в течение 3 часов и пересевать жидкость на кровянойагар и термостатировать в течение 48 часов при наличии 20% CO2 [3, 4, 9, 153].Люминесцентный тест на антитела также доступен для подтверждающейдиагностики дерматофилеза. Реакция агглютинации и реакция непрямойгемагглютинации также могут быть использованы для подтверждения диагноза[31, 32, 37, 140].Исключение других заболеваний, которые вызывают похожие поражениякожи, является очень важным для подтверждения диагноза на дермофилез, так37как многие заболевания от других причин сопровождаются подобнымипоражениями кожи.Дерматофилез следует отличать от ряда грибковых инфекций, вчастности от трихофитии, от вирусных заболеваний (оспа, ящур и др.), отактиномикоза, а также от инвазий, сопровождающихся высыпаниями на коже(демодекоз, псороптоз и др.), которые имитируют дерматофилезные инфекции[35, 37, 68, 74].Окончательный диагноз на дерматофилез ставят, основываясь на результатахэпизоотологическогообследования,клиническогоосмотраживотных, микроскопического исследования препаратов с пораженныхучастков кожи, а также бактериологического изучения патологическогоматериала и постановки биопробы на кроликах.
При эпизоотологическомобследовании животных следует обращать внимание на наличие болезнейневыясненной этиологии, протекающих с преимущественным поражениемкожного покрова, слизистых оболочек и с явлениями хромоты. Особое внимание необходимо уделять эпизоотической ситуации по стригущему лишаю иотсутствию иммунизации против этой болезни. Кроме того, должнынастораживать вспышки дерматита у животных, возникающие в условияхповышенной влажности и высокой температуры в помещениях (особенно уовец), в моменты интенсивность нападения на животных клещей, жалящих икровососущих насекомых. Надо учитывать также стационарность кожныхболезней с преимущественным поражением молодняка [30, 44, 68].Для диагностики обычно отбирают животных с наиболее характернымисимптомами дерматофилеза, включающие в себя некротический дерматит вобласти головы, шеи, спины, в промежности, на внутренней стороне бедер инижних участках конечностей.В случае увеличения очагов поражения на коже или генерализацииболезни,дляпостановкидиагнозавозбудителядостаточнопровестимикроскопию препаратов из корочек.
Однако, следует учитывать, что в одном38приготовленном препарате из папулы, покрытой еще тонкой корочкой,возбудитель дерматофилеза может остаться незамеченным. В связи с этим,необходимо сделать 3-4 мазка-отпечатка с нижней поверхности более зрелойнекротической корки [67, 72].При этом, после высушивания на воздухе, мазки фиксируют в течение 5минут в метиловом спирте, окрашивают по-Граму или карболовым растворомметиленовой синьки или тионина и исследуют под микроскопом с помощьюиммерсионной системы. В положительных случаях в препаратах средиклеточныхэлементовобнаруживаютспецифическиеморфологическиеобразования D. congolensis, которые представляют собой грамположительноокрашенные нити длиной 200-300 мкм и 2-5 мкм в поперечнике, состоящие из2-3 рядов мелких кокков.
Иногда могут быть видны обрывки нитей, а в редкихслучаях – их скопление в виде клубка. Нити нередко разветвляются, при этом вместах ветвления они утолщаются. Обнаружение в мазках-отпечатках даженескольких фрагментов нитей D. congolensis указывает на то, что животноепоражено дерматофилезом [68].Культуру D. congolensis можно выделить на мясопептонном агаре с 5%бычьей крови, или с 5-10% сыворотки крови крупного рогатого скота, овец илилошадей. Возбудителя заболевания очень трудно изолировать из соскобовстарых поражений и, особенно из материала, взятого от животных схроническим дерматофилезом или находящихся в стадии выздоровления. Этообъясняется тем, что характерные формы мицелия D.
сongolensis вхронических случаях плохо выделяются не только в культурах, их труднееобнаружить и в препаратах из корок. На средах, содержащих белки сывороткикрови, выделить чистую культуру возбудителя дерматофилеза из материаластарых очагов трудно, так как сам возбудитель находится уже не в стольактивной фазе, а материал содержит значительное количество сапрофитныхмикробов, которые очень быстро растут на агаре в чашке Петри, не давая темсамым возможности развиваться колониям D.
congolensis. Для задержки роста39посторонней микрофлоры предлагается добавлять в среду антибиотикиполимиксин и колимицин в концентрации 500 мг/л [105].Для выделения возбудителя дерматофилеза из старых пораженийпредложена методика, основанная на хемотаксисе зооспор по отношению кдвуокиси углерода. В соответствии с ней в наполненные дистиллированной водой флаконы с завинчивающейся пробкой помещают небольшие кусочки корокна 3-3,5 ч при открытой пробке.
В свою очередь флаконы помещают в колбы сшироким горлом и запаивают. При этом повышенное содержание СО2 в колбедостигается химическим путем (при разложении Na2CО3 или другой солиугольной кислоты) или в результате горения свечи в колбе. Через 15 минфлаконы осторожно вынимают и с помощью бактериологической петлизасевают на сывороточной или кровяной агар капельки жидкости, содержащейвышедшиеизкорокспоры.Чтобыполучитькультурувозбудителядерматофилеза, посевы должны быть многочисленными и обильными. Ихпомещают в термостат при 20%-ном содержании углекислоты.
Через 24-48 чпоявляются многочисленные небольшого размера колонии, типичные для D.сongolensis [68,105].Позднее была предложена модификация посевов с использованием неплотной, а жидкой питательной среды. Однако все эти методы весьмагромоздки и в практической работе трудно применимы. Поэтому во многихслучаях прибегают к экспериментальному накожному заражению кроликовсуспензией из корок от больных дерматофилезом животных для последующеговыделения культуры возбудителя. При этом материалом для заражения служит10%-наясуспензиядистиллированнойизводе.корокнаСуспензиюфизиологическомвтираютватнымрастворетампономиливпредварительно выбритый, скарифицированный участок кожи кролика вобласти боков.