Диссертация (1151316), страница 13
Текст из файла (страница 13)
2.3.Для комплексного анализа отбирали взрослые половозрелые (3-4 года)экземплярыплотвыобыкновенной(Rutilusrutilus),бычка-песочника(Neogobius fluviatilis), солнечного окуня (Lepomis gibbosus) и карася(Сarasius), а также неполовозрелые (6-7 месяцев), молодые половозрелые (23 года) и взрослые (старше 5 лет) особи 2 видов – солнечного окуня и карася.Общее количество рыб, которые были привлечены к экспериментальнымисследованиям, составило 715 особей. Кроме рыб, в изучении особенностейтоксических эффектов кадмия, свинца и промышленных органическихрастворителей использовали крыс линии Wistar возрастом от 1 до 70 суток,74общее число которых составило 180 особей. Воздействие продуктовпереработки нефти на животных других таксонов изучали с использованиемвзрослых половозрелых особей (3-4 года) двустворчатых моллюсков 2 видов:речной дрейссены (Dreyssena polymorpha) и черноморской мидии (Mytilusgalloprovincialis).
Общее число моллюсков, отобранных для проведенияисследований, – 120 экземпляров. Для исследования иммуномодулирующихэффектов препарата «Иммунолак» на показатели факторов неспецифическойиммунной защиты использовали свиней помеси пород крупной белой иландрас и полученных от них поросятах породы 1/2 пьетрен, 1/4 большаябелая и 1/4 ландрас. Общее количество свиноматок и полученных от нихпоросят – 140 голов.алюминийКрысыМодельные экспериментысвинецхлорбензолмазутдрессенаПлотваобыкновеннаяСолнечный окуньПАГпромышленные органические растворителиПриродные условияЗагрязнение среды обитания ксенобиотикамикадмийсуммарноедействиеметалловпродуктынефтепереработкиБычок-песочникКарасьСвиньидрессенаРечная дрейссенаЧерноморскаямидияРис 2.3 Биологические тест-объекты, используемые в исследовании состоянияживотных разных таксонов в онтогенезе при загрязнении среды обитанияпромышленными поллютантами (металлами и органическими ксенобиотиками)75Количество и возрастные группы исследованных животных в табл.
2.1.Таблица 2.1 – Количество и возрастные группы исследованных животныхТаксон, вид/порода/линияСолнечный окуньКарась серебристыйБычок песочникПлотва обыкновеннаяМидия черноморскаяДрейссена речнаяЛабораторные крысылинии WistarПомесь породкрупная белая и ландрасВозрастКоличество особей/головРыбы, n = 7156-7 месяцев202-3 года203-4 года120старше 5 лет206-7 месяцев202-3 года203-4 года125старше 5 лет203-4 года2453-4 года105Двустворчатые моллюски, n = 1203-4 года603-4 года60Крысы, n=1801 сутки2010 суток2021 сутки2014 суток1228 суток3042 суток3056 суток3070 суток18Свиньи, n=1400-23 суток1201 год20В экспериментах использовались ткани различных отделов головногомозга крыс (гиппокамп, мозжечек, кора больших полушарий), головногомозга и печени рыб, жабер и гепатопанкреаса моллюсков, кровь и молозивосвиноматок, кровь поросят.Содержаниерекомендованнымлабораторныхнормампоживотныхбиоэтике.Отборсоответствовалопробпроводиливсоответствии с общепринятыми методиками [488–490].
Возраст рыбопределяли по чешуе путем подсчета годовых колец по методикеИ. И. Чугуновой [491]. Биологические ткани извлекались согласно методике,применяемой для работы с мелкими животными [492] и рыбами [493].76Исследования проведены с использованием материалов и химическичистых реактивов фирм Oxis Int. Inc., Santa Cruz Вiotechnology, Serva, SigmaChemical Co., Shleich & Shuell Inc. (США), Merck, ANAWA (Германия), Fluka(Швейцария), Litex (Дания), Реагент (Украина), Дарница (Украина).Иммунохимическиеисследованияпроводилисьспривлечениеммоноспецифических поликлональных антисывороток и моноклональныхантител (Santa Cruz Вiotechnology). В обработке результатов иммуноблотингаприменяли программное обеспечение LabWorks 4,0 (UVP Inc., UK).В современных исследованиях гидробионты признаны удобным ирепрезентативнымобъектомдлябиомониторингасиспользованиеммолекулярных биомаркеров [67, 494].
К экспериментальным моделям вданной работе привлечены животные разных таксонов, обитающие вприродных экосистемах с повышенной техногенной нагрузкой, и группыживотных, которые содержались в модельных условиях, в среде обитанияискусственно загрязненной ксенобиотиками.Исследование состояния бычка-песочника (Neogobius fluviatilis) ичерноморской мидии (Mytilus galloprovincialis)в условиях загрязненияприродной среды нефтепродуктамиРезультатыисследованийфракционногосоставанефтепродуктовдонных отложений Керченской бухты в период 2008-2011 гг.
дают основанияутверждать о постоянном обновлении загрязнения данной акватории горючесмазочными материалами [70]. В условиях загрязнения поверхностных ипридонных вод Керченской бухты нефтепродуктами исследовали 4 группыбычка-песочника(Neogobiusfluviatilis),каждаягруппагидробионтовсостояла из 35 экземпляров.
Пробы отбирали в мае-июле 2008, 2009, 2010 и2011 годов. В качестве контроля была выбрана условно чистая акваторияреки Ворскла в районе существующего ихтиологического заповедника,контрольные группы состояли из 10 особей рыб каждая.77В качестве объекта биоиндикации использовали также и биотопычерноморскоймидии(Mytilusgalloprovincialis), обитающиев бухтеКерченской. В качестве контроля использовали особей того же вида мидийиз условно чистой акватории озера Донузлав.
Пробы отбирали в сентябре2011 г. Экспериментальная и контрольная группы мидий включали по 30экземпляров взрослых (4 года) представителей вида Mytilus galloprovincialis.Исследование состояния бычка-песочника (Neogobius fluviatilis),плотвы обыкновенной (Rutilus rutilus), карася (Сarasius) в условияхзагрязнения природной среды ионами металловВ эксперименте использовали по 2 группы рыб каждого биологическоговида возрастом 3-4 года. Экспериментальные группы состояли из 35 особей.Пробы плотвы обыкновенной (Rutilus rutilus) отбирали в мае-июне 2008,бычка-песочника (Neogobius fluviatilis) – в мае 2009 г., карася (Сarasiusсarasius) – в июле 2010 гг.
в районе правого притока реки Днепр (р. СамараДнепровская), на участке, примыкающем к промышленному району(прибрежье металлургического комбината «Интертайп НМТЗ»). В качествеконтроля был выбран условно чистый участок р. Ворскла на территориисуществующегоихтиологическогозаповедника,вкоторомвсоответствующие периоды времени отбирали взрослых особей (n=10) тех жебиологических видов.Исследование состояния солнечного окуня (Lepomis gibbosus),карася (Carasius), плотвы обыкновенной (Rutilus rutilus), бычкапесочника (Neogobius fluviatilis) в модельных условиях загрязнениясреды ионами алюминияВ эксперименте использовали по 20 взрослых половозрелых особейсолнечного окуня, карася, плотвы обыкновенной, а также 60 особейсолнечного окуня различного возраста – неполовозрелые (6-7 месяцев, n=20),молодые половозрелые (2-3 года, n=20) и взрослые (старше 5 лет, n=20),78которые случайным образом были разделены на равные группы (контрольнаяи экспериментальная).
Экспериментальные группы рыб содержали водинаковых аквариумах емкостью по 180 литров на протяжение 45 суток.Концентрация ионов Al3+ поддерживалась на уровне 10 мг/л, что достигалосьс помощью замены ¼ части воды раствором хлорида алюминия (AlСl3).Замену воды проводили 2 раза в неделю. Контрольные группы солнечногоокуня, карася, плотвы обыкновенной и бычка-песочника содержались ваквариумах с очищенной фильтрацией водопроводной водой.Исследование состояния солнечного окуня (Lepomis gibbosus),карася (Carasius), плотвы обыкновенной (Rutilus rutilus), бычкапесочника (Neogobius fluviatilis) в модельных условиях загрязнениясреды ионами свинцаЭффекты повышенной концентрации ионов свинца исследовались наэкспериментальныхиспользовалимоделях,группывособейкоторыхвсолнечногокачествеокуня,тест-объектакарася,плотвыобыкновенной и бычка-песочника, состоящие 10 экземпляров рыб каждая.Экспериментальные группы рыб возрастом 3-4 года содержали в аквариумеобъемом180литров.КонцентрациюионовPb2+поддерживалинапротяжении 42 суток на уровне 10 мг/л.
Замену воды в аквариуме проводили2 раза в неделю, в ходе которой ¼ части воды заменяли раствором(СН3СОО)2Рb.Контрольныегруппырыбпо10особейкаждогобиологического вида содержали в аквариумах с очищенной водопроводнойводой.Исследование состояния крыс линии Wistar в модельных условияхинтоксикации ионами свинцаВоздействие ионов свинца на состояние головного мозга животных вранней постнатальной фазе онтогенеза исследовалось с использованиемкрысят в возрасте 1, 10, 21 сутки. Животные являлись потомством самок(n=7), получавших ацетат свинца с питьевой водой (концентрация 25 мг/л) в79период от оплодотворения и до окончания лактации.
Самкам крысконтрольной группы (n=7) давали очищенную питьевую воду. Рожденныхкрыс обеих групп (n=60) декапитировали на 1, 10 и 21 сутки постнатальногоразвития (СПР) под слабым наркозом.Исследование состояния крыс линии Wistar в модельных условияхинтоксикации ионами кадмияПри изучении возрастных особенностей эффектов ионов кадмия наразличные отделы головного мозга в качестве тест-объекта использовалиськрысы в возрасте 20 суток, которые были разделены на контрольную иэкспериментальную группы методом рандомизации.
Контрольная группаживотных (n=36) содержалась в условиях, с применением стандартнойдиеты. При содержании экспериментальной группы животных (n=36) кстандартной диете в питьевую воду добавляли хлорид кадмия, концентрациякоторого составляла 10 мкМ. Крысы находились в стандартных условиях сестественной сменой освещения и соблюдением общего рациона. У всехживотных был свободный доступ к пище и воде. Крыс обеих группдекапитировали на 28, 42, 56 и 70 сутки постнатального развития (СПР-28,СПР-42, СПР-56 и СПР-70 соответственно) под слабым наркозом (изофуран).Исследование состояния крыс линии Wistar в модельных условияхинтоксикации промышленными органическими растворителямиПри исследовании особенностей влияния промышленных органическихрастворителей на животных в различные периоды онтогенеза использовалиськрысы разного возраста (14, 28, 42 и 56 суток), которые были разделены наконтрольные и экспериментальные группы методом рандомизации (по 6особей в каждой группе).
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
