Диссертация (1151313), страница 37
Текст из файла (страница 37)
Особенности клеточного ответа на УЗ интенсивности 0.05 Вт/см2 после 30 с воздействия.Итак, УЗ может разнонаправлено действовать на клетки крови in vitro (рисунок 66).Видно, что при 30-секундном непрерывном УЗ воздействии в основном происходитзначительное уменьшение количества эозинофилов. Столь же явных изменений после 15 созвучивания может и не происходить: количество клеток незначительно изменялось какв сторону увеличения, так и уменьшения. В трёх группах из четырёх от 10 до 22% образцов нина одно УЗ воздействие не среагировали: изменений процентного состава эозинофилов неконтроль181716151413образцы 2 группы30 сЭозинофилы3230 с343332313029образцы 4 группыконт…15 с28027126количество клеток15 с12Эозинофилы54321011коичество клетоквыявлено ни при 15 с, ни при 30 с воздействии.Рисунок 66.
Направленное влияние разной экспозиции УЗ минимальной терапевтической интенсивности награнулоциты здоровых собак в зависимости от возраста особей (на примере эозинофилов).Следовательно, проведённый первичный статистический анализ результатов обработкиэозинофилов in vitro УЗ минимальной терапевтической интенсивности 0.05 Вт/см2 показал, чтопорог биологического действия на данный вид клеток начинается с 30 с экспозиции. Меньшая178экспозиция не приводила к достоверному изменению количества эозинофилов. Необходимотакже отметить, что направление выявленного эффекта могло быть различно.Влияние ультразвука на моноциты и базофилыАнализ процентного содержания количества клеток моноцитарного ряда после 15 с УЗобработки проб показал: в двух группах число клеток уменьшилось, а в двух других —увеличилось.
В среднем в 38.2 ± 0.4 % образцов (рисунок 67) изменений не произошло. Такимобразом, нельзя говорить, как о достоверном изменении их количества, так и о направлениивоздействия. На 30-секундное воздействие большее количество моноцитов (в среднем 53 %,m = 2 %) не реагировало. Исследование содержания базофилов после 15 с облучения выявилоотсутствие достоверных реакций со стороны этих клеток в сторону уменьшения или увеличенияих процентного содержания в лейкограмме. Процент базофилов в крови молодых здоровыхсобак мог оставаться без изменения.
На диаграммах на рисунке 68 представлены некоторыеособенности клеточного ответа на 15-секундное воздействие УЗ минимальной терапевтическойинтенсивности. На 30-секундное действие более половины образцов первой возрастной группы(70%) «не реагировали», а в 30% регистрировали увеличение относительного количества клеток(m = ± 2 %).Во второй группе в 63% образцов происходит уменьшение количества клеток после 15 соблучения. После 30-секундного воздействия в половине образцов количество базофиловсохраняется, а в других 50% — уменьшается. По данным третьей группы видно, что при 15 си 30 с УЗ воздействии в 57% образцов не происходило никакой реакции, а в 43% регистрировалинезначительное увеличение числа базофилов.
Анализ данных четвёртой группы показал, чтов половине образцов не происходит никакой реакции как на 15 с, так и на 30 с инсонацию(M = 67% и 56%, соответственно, m = 2%). В 33% и 22% образцов отмечали незначительноеуменьшение количества базофилов. Однако, трудно с уверенностью говорить об отсутствии илиналичии эффекта на клетки данного вида, так как в норме базофилов в крови собак должно быть0–1 % от общего числа лейкоцитов. В контрольных образцах крови животных из каждойвозрастной группы этих клеток могло не быть вовсе, поэтому учёт влияния УЗ проводили тольков случае присутствия базофилов в интактных пробах.
Более того, изменение формы и видаклетокприподсчётелейкограммнеучитывается.А именнодеформироваться в УЗ поле раньше всех других гранулоцитов.базофилыначинали179Моноциты образцов крови 1 группыБазофилы образцов крови 1 группыМоноциты образцов крови 2 группыБазофилы образцов крови 2 группыМоноциты образцов крови 3 группыБазофилы образцов крови 3 группыМоноциты образцов крови 4 группыБазофилы образцов крови 4 группыРисунок 67. Диаграммы направления воздействия УЗ минимальной терапевтической интенсивности (0.05 Вт/см2,15 с) на моноциты и базофилы здоровых собакБазофилы 1 группы животныхБазофилы 2 группы животныхБазофилы 3 группы животныхБазофилы 4 группы животныхРисунок 68. Диаграммы направления воздействия УЗ (0.05 Вт/см2, 30 с) на базофилы здоровых собак разноговозраста.180Таблица 42.
Диапазон выявленных изменений в лейкограммах здоровых собак разных возрастных групп последействия непрерывного УЗ интенсивности 0.05 Вт/см2 (M, m ≤ 1.1%; p < 0.05)№ группыНет изменений,УменьшениеУвеличениеВид клетокзабора образца% клетокчисла клеток, %числа клеток, %, M1 группа4032282 группа622513Эозинофилы(15 с)3 группа148604 группа6722111 группа406002 группа37630Моноциты(15 с)3 группа430574 группа3311561 группа100002 группа37630Базофилы(15 с)3 группа570434 группа673301 группа109002 группа12880Эозинофилы(30 с)3 группа148604 группа4544111 группа5030202 группа62038Моноциты(30 с)3 группа430574 группа560441 группа700302 группа50500Базофилы(30 с)3 группа570434 группа562222Данныетаблицы 42показываютвыявленныеособенностиреакцииагрануло–и гранулоцитов на УЗ интенсивности 0.05 Вт/см2: Достоверные изменения процентногосодержания в лейкограмме лейкоцитов разного вида начинаются с экспозиции более 30 с,которая наибольшее воздействие оказывает на эозинофилы.
Во всех группах животных ихколичество уменьшалось. При тех же параметрах обработки число моноцитов можетсущественно увеличиваться (4 группа). Таким образом, можно сделать вывод: in vitro в полебегущей УЗ волны изменения в лейкограммах здоровых животных начинают регистрироватьсяпосле 30 с озвучивания. Наиболее устойчивы к кратковременной обработке интенсивностью0.05 Вт/см2 моноциты, наименее — эозинофилы.Влияние ультразвука на лимфоциты и нейтрофилыПроведённые нами с 1985 по 2014 год исследования по изучению клеточного ответаразличных видов тканей животных на действие УЗ волн in vitro доказали, что в результате такоговоздействия может происходить изменение цитологических и морфологических особенностейклеток, их жизнеспособности, взаимодействия между собой и гемограммы (процентногосоотношения клеток) в целом.
Целью окончательного этапа анализа лейкоцитарного отклика надействие УЗ минимальной терапевтической интенсивности было сравнение особенностей181клеточного ответа лимфоцитов и нейтрофилов с результатами, полученными ранее на другихвидах лейкоцитов.Действие УЗ изучали на образцах in vitro. Группы животных: взрослые здоровые собакиобоего пола от 18 до 24 особей в группе. Количество групп 4.
Группа №1: возраст от 1 года до 3лет, №2–4–6 лет, №3–7 и 8 лет, в группу №4 входили животные от 9 до 11 лет. Кровь животныхозвучивали со средней по пространству и времени интенсивностью (ISATA) 0.05 Вт/см2 в течение15–30 с, непрерывный режим, проточное охлаждение камеры с образцами.Результаты исследования клеточной резистентности к 15-секундному воздействию УЗминимальной терапевтической интенсивности (p < 0.05) продемонстрировали практическиотсутствие влияния на сегментоядерные нейтрофилы и лимфоциты во всех возрастных группах(рисунок 69). Процентное содержание сегментоядерных нейтрофилов для каждого животногоменялось в пределах референтного ряда, практически оставаясь на уровне контроля.Направление воздействия изменялось независимо от породы, возраста и пола животных:абсолютное и относительное количество клеток у разных животных могло увеличиваться,уменьшаться или оставаться без изменения.
Относительно УЗ резистентности агранулоцитовможно сказать, что после 15 с обработки проб (рисунок 69) в двух группах содержаниелимфоцитов либо увеличивалось (от 70% до 75%), либо оставалось неизменным. В третьейгруппе лейкограмма изменялась на одинаковый процент (увеличение и уменьшение по 43%)в ответ на воздействие, а в четвёртой группе УЗ оказывал разнонаправленное действие (p > 0.05).182Рисунок 69. Диаграммы результатов воздействия УЗ интенсивностью 0.05 Вт/см2 в течение 15 с насегментоядерные нейтрофилы и лимфоциты здоровых собак разного возраста.Анализ лейкограмм показал, что после 30 с УЗ обработки крови собак во всех группахрегистрировалидостоверноеуменьшениепроцентногосодержаниясегментоядерныхнейтрофилов в 1.2–1.4 раза в зависимости от группы. Сравнение реакции лимфоцитов на 30-183секундную УЗ обработку животных из 4 групп, участвовавших в эксперименте, показало, что вовсех пробах отмечали значительное достоверное изменение лейкограмм (p < 0.05).
Увеличениев 1.3–1.7 раза относительного количества лимфоцитов могли регистрировать после 25–30 синсонации.Незначительное (до 1.2 раз) уменьшение процента палочкоядерных нейтрофиловв лейкограммах собак всех возрастов происходило уже после 15 с облучения (p < 0.05). После30-секундной обработки число клеток данного вида также несколько сокращалось (до 1.3 раз).Одновременно, во всех опытных группах были выявлены образцы, «не реагировавшие»на инсонацию. Тест с метиленовым синим [1; 157] показал, что это напрямую связано с местомв объёме образца, откуда шёл забор материала для анализа и подсчёта лейкограммы.Выраженность влияния УЗ происходила в зависимости от пространственного распределенияинтенсивности в сечении УЗ пучка (рисунок 5 на странице 53).Таким образом, в результате проведения исследований можно заключить, что in vitroв поле бегущей УЗ волны рост или уменьшение процентного содержания лимфоцитови нейтрофилов в крови здоровых собак после воздействия минимальной терапевтическойинтенсивностью 0.05 Вт/см2 от 1 до 15 с не зависят от пола и возраста животного и практическиотсутствуют.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
