Диссертация (1151313), страница 41
Текст из файла (страница 41)
Именно на это и указывает необычно низкое (по модулю) на общем фонезначение коэффициента b для частоты модуляции 800 Гц.Структура, которая имеет плотность, отличную от окружающей её среды, подвергаетсявоздействию периодических перемещающих сил, равных для сферических объектовпроизведению их объёма на разность плотностей и на ускорение [208]. Объекты, способныесвободно перемещаться в жидкости — например, эритроциты, тромбоциты, пузырьки, —находящиеся в поле и имеющие акустический импеданс, отличный от импеданса окружающихеё тканей, могут двигаться за счёт радиального давления и, что наиболее вероятно, притягиватьсяк границе. Точно так же возникающая в окрестности пузырька сила будет притягивать объектк пузырьку. Подводя итог анализа соотношения грануло– и агранулоцитов в крови послевоздействия непрерывным и амплитудно-модулированным УЗ, можно уверенно утверждать, что199все интенсивности от 0.05 до 1.0 Вт/см2 вызывают сдвиг в лейкограммах крови домашнихживотных в сторону агранулоцитов.
При этом ряд активных частотных диапазонов модуляцииувереннее выявляется визуальным контролем состояния клеток в мазке, в то время как изменениячисловых значений в лейкограмме остаются ориентировочным, приближённым подтверждениемна уровне тенденции. Объективным критерием, подтверждающим справедливость даннойгипотезы, является однонаправленное изменение соотношения гранулоцитов к агранулоцитам навсех частотных диапазонах модуляции.§ 15.4.
Изменение жизнеспособности лейкоцитовЭксперименты на крови МДЖ разных возрастов (рисунок 85) продемонстрировализависимость «доза — эффект»: с ростом экспозиции количество жизнеспособных клетокэкспоненциально уменьшалось. Если сравнить вид всех полученных нами графиков, то можноконстатироватьналичиебезусловногосходстваугловнаклонаграфиковизмененияжизнеспособности всех лейкоцитов и кривых разрушения гранулоцитов в поле бегущей УЗволны (рисунки 72, 74, 75 б, 76 б, 83–85). На рисунке 84 приведена динамика УЗ разрушениягранулоцитов при увеличении интенсивности от 0.05 Вт/см2 до 0.4 Вт/см2. Вид кривой №4практически идентичен графикам, показывающим изменения процентного содержаниягранулоцитов в крови МДЖ после УЗ воздействия in vitro. Следовательно, основной «вклад»в выявленную зависимость вносит скорость, направление и характер изменений именнов гранулоцитах.
Вычисление абсолютного значения индекса грануло– /агранулоциты показало,что его изменение у всех видов животных лежит в пределах от 1.08 до 2.0 в контроле, а после УЗобработки резко изменяется и становится равным 0.001–0.85.б8060402000. К-ль306090120Время инсонации, сГранулоциты 1гр,%Агранулоциты 1гр,%Количество клеток, %Количество клеток, %а1001008060402000, К-ль3060Время инсонации, сГранулоциты 1гр,%Агранулоциты 1гр,%Гранулоциты 2гр,%Агранулоциты 2гр,%Гранулоциты 2гр,%Агранулоциты 2гр,%Рисунок 83.
Динамика изменения процентного соотношения гранулоциты/агранулоциты у собак под действием УЗтерапевтической интенсивности: а — 0.05 Вт/см2; б — 0.4 Вт/см2.200Число жизнеспособныхклеток, %100Контроль0.050.20.480604020015304560Время инсонации, сРисунок 84. Зависимость жизнеспособности лейкоцитов здоровых животных разного возраста от времениинсонации для разной интенсивности УЗ, Вт/см2.80706050Кошки 1 гр40Кошки 4 гр30Собаки 1 гр20Собаки 2 гр1000.050.20.4Рисунок 85.
Влияние УЗ на гранулоциты МДЖ. Время воздействия 45 с.Результатами корреляционного анализа между изменениями физиологического состоянияклеток — экспозицией УЗ и жизнеспособностью клеток крови — было показано наличие тесных(|r| > 0.69) и средних (0.3 < |r| < 0.69) отрицательных корреляционных связей у собак, у кошек иу лошадей (p < 0.001). Следовательно, морфологические изменения лейкоцитов связаны с дозойнепрерывного УЗ воздействия, происходящих на фоне уменьшения жизнеспособности.Таким образом, можно резюмировать, что при воздействии на клетки крови здоровыхживотных терапевтическим УЗ 0.05 Вт/см2 — 1.0 Вт/см2 с ростом интенсивности наблюдаетсяуменьшение числа жизнеспособных клеток, в первую очередь — гранулоцитов.
Степеньвыраженности изменений зависит от экспозиции УЗ воздействия и возраста животного; независит от пола и вида. В лейкограмме под действием бегущей непрерывной УЗ волныинтенсивностью0.05 Вт/см2–1.0 Вт/см2,частоты0.88 МГцувеличиваетсяабсолютноеи относительное количество агранулоцитов, число гранулоцитов уменьшается вплоть до полногоисчезновения.
Соотношение грануло–/агранулоциты у здоровых животных всех возрастов лежитв пределах от 1.08 до 2.0. После действия УЗ индекс резко изменяется и становится равным0.001–0.85.201Тесные корреляционные взаимосвязи наблюдались между величинами: экспозицией УЗи количеством гранулоцитов (для клеток крови лошадей и собак |r| > 0.91), соотношениемгрануло/агранулоцитов (|r| > 0.69), жизнеспособностью эритроцитов, тромбоцитов и лейкоцитов(0.79 < |r| < 0.99) и изменением проницаемости ЦПМ. Установлена достоверная (p < 0.05и p < 0.001) корреляционная связь по форменным элементам крови у собак, кошек и лошадей.Полученные результаты можно использовать на практике в ветеринарной диагностикепри ультразвуковых, гематологических исследованиях и при разработке новых методовфизиотерапии.Возможность изменения лейкограмм животных при действиинепрерывного ультразвука терапевтического диапазона интенсивностей наклетки крови больных и здоровых животных1.
УЗ интенсивности 0.05 Вт/см2 при времени воздействия менее 30 с является«безопасным» для клеток крови здоровых животных и не влияет на жизнеспособностьформенных элементов и лейкограмму.2. УЗ интенсивности 0.05 Вт/см2 вызывает изменения в клетках крови больных животных,изменяя лейкограмму.3.Диапазонинтенсивностей0.05–0.1 Вт/см2приводитк уменьшениючислажизнеспособных клеток крови больных животных. Степень выраженности изменений зависит,главным образом, от интенсивности УЗ волны, времени экспозиции и состояния здоровья.Этиология заболевания на особенности клеточного ответа не влияет. При значительном ростеэкспозиции отмечается прогрессивно возрастающий цитоцидный эффект.4.
При наличии заболеваний инвазивной и неинвазивной этиологии у животных разноговида, пола и возраста после кратковременной, до 30 с, обработки крови УЗ минимальнойтерапевтическойизменяетсяинтенсивностилейкограмма0.05 Вт/см2(процентноедостоверносоотношениеразнонаправленнолейкоцитов):необратимоуменьшаетсячислолимфоцитов, количество нейтрофилов может как увеличиваться, так и уменьшаться. Можетнаблюдаться лейкопения, лизис цитоплазматической мембраны или клеток полностью, а такжедеструкция клеток. Изменение лейкограммы является диагностическим критерием привыявлении различных патологических состояний животных.
На способ диагностики наличиязаболевания у животных по изменению лейкограммы после ультразвукового воздействия намиполучен Патент на изобретение № 2574881 [149; рисунок 117 в Приложении Б1 на странице 321]в Государственном реестре изобретений РФ 15.01.2016 г.202Результатами корреляционного анализа между экспозицией УЗ и изменениями клетоккрови домашних животных было показано наличие тесных (|r| > 0.69) и средних (0.3 < |r| < 0.69)(положительных и отрицательных) корреляционных связей по 5–8 форменным элементам(P < 0.05). Следовательно, изменения экспозиции УЗ (времени, интенсивности, частотымодуляции) и цитоморфологические изменения форменных элементов крови взаимосвязаныдруг с другом.Тесные корреляционные взаимосвязи наблюдались между величинами: интенсивности УЗи количеством гранулоцитов (r = 0.91), соотношением грануло/агранулоцитов (r = 0.90),и жизнеспособностью эритроцитов (r = 0.94) и как тромбоцитов, так и лейкоцитов (r = 0.92–0.98)и изменением проницаемости ЦПМ.Методы применённого фрактального анализа подтвердили объективность выявленныхс использованием микроскопии физиологических изменений в гемограммах.
Дисперсионныйанализ показал доли влияния интенсивности УЗ и времени обработки (каждого из этих факторов)на изменение процента жизнеспособности клеток крови.20316. Разнонаправленное действие на клетки крови различныхвидов животных непрерывного и модулированногоультразвука in vitroВ этой главе сопоставляются результаты прямого и разнонаправленного воздействияамплитудно-модулированного УЗ на клетки крови разного размера. Данные, полученные излитературы о влиянии непрерывных и модулированных акустических волн на клеточныесуспензии, не всегда можно признать достаточно информативными вследствие малойизученности вопроса.