Диссертация (1151313), страница 44
Текст из файла (страница 44)
Во-вторых, высвобождением после инсонации из эритроцитов веществ,усиливающих тромбопластическую способность субстратной плазмы [41]. Это, в свою очередь,приводит к изменению структуры липопротеиновой матрицы и уменьшает её упругие свойства,в связи с чем механическое напряжение под действием УЗ способно модифицироватьмембранныелипидыи вызыватьи липопротеиновых комплексах.конформационныенарушенияв фосфолипидах214Рисунок 91. Эритроциты собак после действия УЗ интенсивности 0.4 Вт/см2. 1, 2 — Частота модуляции 10 Гц,время обработки 40 с. 3–6 — Частота модуляции 14 Гц, время обработки 50 с. 1 — Анизоцитоз. Образованиегеометрических фигур (а) и «гантелей» (б). 2–4 — (а) «Гантели», булавовидные утолщения/начало агрегации (б),«рассыпавшаяся» зернистость эозинофила или базофила (в).
5 — (а) «Гантели» и (б) изменённый гранулоцит: илибазофил, или сегментоядерный нейтрофил, или эозинофил. Обведено прямоугольниками: агрегация клеток. 6 — (а)«Гантели», (б) значительное увеличение размера тромбоцитов после УЗ воздействия.После помещения проб в СЭП все структуры и агрегаты («соты», «гантели»),регистрируемые после воздействия УЗ поля, сохранялись, восстановления структуры ненаблюдали.
Но в то же время СЭП как самостоятельный физический фактор точно так жевызывал изменение диаметра (вытягивание формы), образование на клетках булавовидныхотростков и каплевидных утолщений, клеточных комплексов и агрегатов — но в ме́ньшейстепени, чем УЗ. Эритроциты и лейкоциты выстраивались в цепочки, расположенныепараллельно электрическим силовым линиям. Для каждого типа клеток был найден оптимальныйдиапазон частот, в пределах которого эффект возникал спустя 10–15 мин при минимальнойнапряжённости поля Е = 0.67 кВ/м (таблица 46 на странице 212; таблица 47).
Деформация в СЭПклеток крови без наложения акустического поля начиналась через 25–30 минут воздействиянапряжённостью 3.03 кВ/м. Регистрировали появление теней клеток, гемолиз, булавовидныеутолщения на отростках ЦПМ.Теоретические исследования [173] показали, что формирование цепочек происходитв результате притяжения между частицами, в которых под действием ЭМП индуцируются215дипольные заряды и при низких частотах, и в СЭП. Постоянная времени формирования цепочекпропорциональна кубу радиуса частиц (она равна 1 с при радиусе в 1 μ). Она мало зависит отнапряжённости поля (Е) в слабых полях и обратно пропорциональна Е2 в сильных полях.В импульсных ЭМП эффект определяется средним значением Е.
Несимметричные частицыориентируются либо параллельно, либо перпендикулярно к направлению силовых линий, чтополностью соотносится с нашими результатами. Это зависит от соотношения между удельнойпроводимостью частиц и окружающей их среды и от частоты ЭМП (для электрическихпараметров, близких к биологическим).Таблица 47. Примеры направленного УЗ воздействия на лейкоциты животных семейства собачьих (p < 0.05)IУЗ, Вт/см20.050.20.40.7νмод, Гцtвозд, с300156006080015–451030–4510–2015–60255014; 30и 30015–6045–50и 98–100800–90020015–5015–4015–20Клеточная структура (мишень)У 10% лейкоцитов лизис ЦПМ, вакуолизация ЦП. Размер клеток-мишеней 6.6–19.8 мкм.В мазке лимфоциты, преобладают мелкие.
Фрагменты ядер других лейкоцитов.«Тени» клеток крови (только здесь!), общий розовый фон мазков вместобесцветного. Гемолиз. Изменена проницаемость ЦПМ всех клеток. Фрагментыядер. Ядра «вытекают» из всех клеток. Клетка-мишень — гранулоцитыи клетки, имеющие включения.Разрушение лейкоцитов, лизис, вакуолизация ядер и ЦП, взрыв ядер.Деформация и вакуолизация ядер, разрыв ЦПМ. Размер клеток-мишеней 6.6–19.8 мкм.Избирательное действие на ядра гранулоцитов: вакуолизация, деформация.Размер клеток-мишеней 7.7–17.6 мкм.Вспенивание и/или вакуолизация ЦП. Размер клеток-мишеней 6.6–19.8 мкм.Лизис сегментоядерных нейтрофилов.
Изменение лимфоцитов и моноцитов.Вспенивание (вакуолизация) ЦП, изменение проницаемости ЦПМ. Размерклеток-мишеней 7.7–19.8 мкм.Вакуолизация ЦП гранулоцитов. Разрыхление и взрыв ядер лейкоцитов. ЛизисЦПМ клеток-мишеней размера 6.6–19.8 мкм.Лизис и разрыв ядер, вспенивание ЦП клеток-мишеней размера 6.6–19.8 мкм.Вакуолизация ЦП клеток-мишеней размера 6.6–19.8 мкм.2. Ядросодержащие клетки размера 6.6–19.8 мкм. После обработки образцов кровиинтенсивностью 0.05–0.7 Вт/см2, частотой модуляции 10–30 Гц, а также 50–100 Гц, 200–300 Гц,600 Гц или 800–900 Гц в течение 15–60 с (таблица 47; рисунки 92–96) клетки деформировались,менялся объём, а затем происходило «вспенивание» или вакуолизация цитоплазмы, меняласьпроницаемость или начинала разрушаться ЦПМ лейкоцитов. С увеличением временивоздействия до 35–50 с менялась глубина и степень изменений.
Облучение ткани в зависимостиот вида животного и его возраста интенсивностью УЗ диапазона 0.05–0.4 Вт/см2, частотоймодуляции из интервала частот 10–50 Гц, а также 300–900 Гц от 10 до 60 с позволялонаправленно воздействовать на ядра лейкоцитов: изменять их форму или полностью разрушать.Во всех клетках ткани собачьих происходили одинаковые эффекты: изменение формы, площади,цитолиз, деструкция и агрегация клеток, вспенивание цитоплазмы сначала грануло-, а затеми агранулоцитов, разрыв ЦПМ, деформация и взрыв ядер. Первые изменения мембран и ядер216лейкоцитов в зависимости от вида и размера клетки регистрировалось спустя 10–13 с от началаозвучивания активными частотами, как клеток крови больных, так и здоровых животных.
Вомногихслучаяхцитологическиеизменениябылистользначительны,чтоклеткиидентифицировать было сложно.Рисунок 92. Контроль. Клетки крови собак. Большой лимфоцит, базофил, моноцит, палочкоядерный нейтрофил,сегментоядерный нейтрофил и эозинофил.Рисунок 93. Фотографии лейкоцитов собак после воздействия УЗ интенсивностью 0.4 Вт/см21–5. Частота модуляции 50 Гц; время обработки 40 с (1–3) и 20 с (4, 5). 6. Частота модуляции 98 Гц; времяобработки 15 с:1. Вспенивание ядер и ЦП.
а, в — палочко– и сегментоядерные нейтрофилы; б — агранулоцит (лимфоцит илимоноцит, непонятно из-за отсутствия границ ЦП).2. Вероятно, палочкоядерные нейтрофилы, более выражено нарушение структуры и вспенивание ЦП(«вакуолизация»).3. Разрыхление ядер палочкоядерных и /или юных (молодых) нейтрофилов.4. а — палочкоядерный нейтрофил, вспенивание ядра; б, в — клетки идентифицировать сложно из-за разрушенияядер и смешения границ с ЦП, точно не лимфоциты.5. Палочко– и 2 сегментоядерных нейтрофила, у нижнего левого — выраженное вспенивание ЦП.6. Клетка в квадрате (врезка с другого мазка) может быть, с одинаковой степенью вероятности, базофилом,эозинофилом и сегментоядерным нейтрофилом; другие клетки — палочко– и сегментоядерные нейтрофилыс вакуолизацией ЦП.217Рисунок 94.
Изменения клеток после действия модулированного УЗ интенсивности 0.4 Вт/см2 (1, 2, 4–6)и интенсивности 0.2 Вт/см2 (3). 1. Частота модуляции 30 Гц, время обработки 15 с: (а) — сегментоядерныйнейтрофил; (б) — вспенивание и /или вакуолизация ЦП моноцита. 2. Частота модуляции 50 Гц, время обработки20 с: (а) — клетка идентификации не подлежит; (б) — вспенивание и /или вакуолизация ЦП моноцита; (в) —сегментоядерный нейтрофил. 3. Частота модуляции 10 Гц, время обработки 15 с. Деформация ядра и изменениеклеточной формы моноцита, начало вспенивания ЦП. 4–6 — Частота модуляции 300 Гц, время обработки 13 с.Сильная деформация ядер и вакуолизация ЦП моноцитов. Клеточная форма и размер изменены.Рисунок 95.
Изменения грануло– и агранулоцитов собак после действия модулированного УЗ.1. Интенсивность 0.05 Вт/см2, частота модуляции 800 Гц, время обработки 20 с: по цвету зернистости можносудить о том, что это базофил, ядро деформировано.2. (а) — клетка идентификации не подлежит; (б) — моноцит с изменённым ядром, (в) — вероятно, базофил — цветзернистости подтверждает, но размер клетки слишком большой относительно соседнего моноцита, что может бытьсвязано с нарушением целостности ЦПМ.218Рисунок 96.
Изменения агранулоцитов после действия модулированного УЗ. 1. Интенсивность 0.4 Вт/см2, частотамодуляции 300 Гц, время обработки 13 с. В центре большой лимфоцит с «растёкшимся» ядром. 2. Интенсивность0.4 Вт/см2, частота модуляции 50 Гц, время обработки 20 с — клетки тяжело идентифицировать из-зазначительных изменений в ЦП и ядре. 3.
Интенсивность 0.4 Вт/см2, частота модуляции 300 Гц, время обработки13 с. (а) — клетка идентификации не подлежит, (б) сегментоядерный нейтрофил (гранулоцит).Такимобразом,показанавозможностьпримененияультразвуковыхволндлянаправленного неинвазивного воздействия на физиологическое состояние клеток тканейживотной этиологии. Отработаны режимы выборочного изменения состояния клеточныхорганелл и клеток крови животных семейства собачьих с целью управления процессамижизнедеятельности и избирательного подавления или активации их функций.Влияние ультразвука на клетки крови инвазированных собакИзменение у больных дирофиляриозом собак ферментного профиля и содержаниягемоглобина, гематокрита, эритроцитов, увеличение СОЭ отмечали и другие авторы. В чём-тонаши данные схожи, но есть и значительные отличия [20, 127, 227].
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
