Диссертация (1151313), страница 45
Текст из файла (страница 45)
Так, колебания активностипечёночных и почечных показателей ферментов, повышение содержания общего билирубинаотмечал А. Ю. Медведев [127]. Понижение содержания лимфоцитов и эозинофилов и ростсегментоядерных нейтрофилов диагностировала и Ю. Г. Бескровная [20]. Однако, возможностьроста числа моноцитов отмечена впервые.В литературе не удалось найти данных по влиянию импульсного или непрерывного УЗ наD. repens и кровь больных дирофиляриозом животных.
Изменение лейкограммы после УЗобработки проб крови больных кошек, собак и лошадей может служить признаком наличиязаболевания любой этиологии. После УЗ воздействия небольшое повышение активностифермента ЛДГ, по нашему мнению, можно объяснить гемолизом эритроцитов.МоноинвазииУ животных, заражённых дирофиляриозом и имеющих микрофиляремию, наблюдаютсязначительные колебания уровня АлАТ, ЩФ. Было выявлено изменение биохимических219показателей после УЗ воздействия: увеличение содержания ЛДГ в 1.3–1.5 раз, АсАТ в 2.5 раза,небольшое достоверное увеличение количества ЩФ (p < 0.05).
Содержание лейкоцитови общего билирубина может повышаться, а число тромбоцитов и гематокрита уменьшаться.Существенно понижено содержание лимфоцитов (в 6 и более раз) и эозинофилов, количествосегментоядерных нейтрофилов значительно увеличено. Количество моноцитов в 1.5 и более развыше нормы.Ультразвук терапевтической интенсивности не оказывает влияния на D. repens даже примаксимальной экспозиции.УЗ интенсивности 0.4 Вт/см2 с частотой модуляции 10–20 Гц и 800–1000 Гц изменяетформу эритроцитов, процентный состав и структуру лейкоцитов.
Увеличение экспозицииприводит к появлению в мазках теней клеток и полному лизису всех видов лимфоцитов.У нейтрофилов выявлены деформация и «вспенивание» ядра и «вакуолизация» цитоплазмы. 10–20 Гц модуляция также приводит к существенному сдвигу лейкограммы влево.Возбудители бабезиоза в основном расположены в эритроцитах, и также встречаютсяв нейтрофилах. После УЗ разрушались первыми нейтрофилы, сегментоядерные, затемпалочкоядерные. Дольше всего сохранялись юные нейтрофилы, которых в норме у здоровыхживотныхв кровинерегистрируетсявообще.Визуальнопримикроскопииклеткис возбудителем отличаются возможным наличием включений или «дырок» в цитоплазмезаражённых клеток.
Именно эти клетки в УЗ поле лизируются первыми. Можно предположить,что это вызывается более ранним наступлением УЗ кавитации на резонансных частотах, а такжеобразованием сдвиговых напряжений, что особенно хорошо видно на низких частотахмодуляции: 10–20 Гц. В случае сильных градиентов смещения эффект может быть болеезначительным на частотах 800–900 Гц, что мы также наблюдали в своих экспериментах.УЗ исследование больным дирофиляриозом животным следует делать с известной долейосторожности, при контроле цитологических и гематологических показателей.Смешанные инвазииПри смешанной инвазии в крови обнаружено большое число юных форм нейтрофилов;лизис лейкоцитов начинается на 10-й секунде УЗ воздействия. У инвазированных животныхизменена лейкограмма, соотношение грануло– и агранулоцитов.
Наблюдаются значительныеколебанияферментногопрофиляи содержаниягемоглобина,эритроцитов,значениегематокрита, увеличение СОЭ. УЗ волна с интенсивностью 0.4 Вт/см2 и частотой импульсноймодуляции 10 Гц и 900 Гц вызывает клеточную агрегацию, изменяет форму эритроцитов,лейкограмму и структуру лейкоцитов животных с паразитемией. Цитологические изменения220в клетках крови собак со смешанной инвазией наступают значительно раньше, чем у животныхс моноинвазиями — микрофиляремией или бабезиозом.Динамика разрушения грануло– и агранулоцитов полностью совпадала по направлению ипроисходившим в клетках крови здоровых животных.
Однако начало УЗ гемолиза эритроцитовпри обработке крови больных дирофиляриозом животных наступает через 25 с; бабезиозом —через 30 с, со смешанной инвазией — через 18–20 с.Таким образом, впервые опробована возможность направленного воздействия нанейтрофилы и эритроциты инвазированных собак УЗ с частотами модуляции 10 Гц и 900 Гци получены положительные результаты. Клетки крови, в которых локализован возбудительB. canis, под действием модулированного УЗ разрушались раньше, чем клетки тех же особей безвозбудителя. Впервые обнаружена особая чувствительность бабезий к УЗ частотой модуляции800–900 Гц, что может служить основой методов идентификации возбудителей паразитарныхзаболеваний, а также использоваться в разработке методов терапии.
Проведённые исследованиямогут послужить базой для создания экспресс-теста на выявление в крови возбудителейпаразитарных заболеваний.§ 16.4. Действие ультразвука на клетки-мишени крови лошадейНаправленно воздействовать на лейкоциты животных представляет большой интерес налошадях. Так как у кошек и собак абсцессы крайне редки, очень редко переходят во флегмоныи сепсис: у этих видов животных для образования флегмоны и сепсиса необходимо наличиесопутствующего иммунодефицитного состояния (сахарный диабет, иммунодефицит кошек,лейкемия кошек). У лошадей, наоборот, абсцессы и флегмоны развиваются стремительно,поэтому направленное воздействие на клетки белой крови в клинических условиях с цельютерапии представляется перспективным.
Только при облучении крови лошадей тканьразделялась на плазму и форменные элементы практически мгновенно. Безусловно, это вызвано,прежде всего, высокой скоростью оседания эритроцитов у животных данного вида по сравнениюсо всеми остальными, участвующими в испытаниях. Но расслоение происходило раньше началаоседания эритроцитов в контрольных образцах.Чем больше размер клеток, тем больше протяжённость ЦПМ.
Поэтому сдвиговыенапряжения в УЗ поле при прочих равных больше заметны на крупных клетках. Измененияэозинофилову остальныхживотныхпроисходитинтенсивнее,и ихиндивидуальныеособенности не позволяют нам отследить динамику. Эозинофилы лошадей отличаются наличиемярко выраженной крупной зернистости, что позволяет отследить эти изменения клеточныхструктур в УЗ поле.
Более сохранные после УЗ обработки всегда лимфоциты, причём молодые,мелкие формы клеток сохраняются дольше крупных (рисунки 97–99). Ультразвуком быстро221разрушаются нейтрофилы (сегменто– и палочкоядерные) из-за наличия зернистости. Скоростьи динамику изменений моноцитов и базофилов отследить сложно, так как этих клетокв процентном отношении в норме всегда небольшое количество. При распространении УЗ волныклетки находятся в областях сжатия или разрежения, так как размеры клетки меньше длиныволны УЗ.
Если есть гранулы или клеточные включения (гранулоциты, внутриклеточныепаразиты), то сжатие клетки происходит неравномерно, следовательно, есть возможностьразрыва ЦПМ. На агранулоцитах (моноциты, лимфоциты), клетках, лишённых ядер(тромбоциты, эритроциты), так же, как и клетках с несегментированным ядром (палочкоядерныенейтрофилы) сжатие может происходить всесторонне, одинаково равномерно по всей длинеЦПМ. Таким образом, на гранулоцитах и клетках с включениями больше «работает» модульсдвига, на остальных — модуль Юнга. Модуль сдвига примерно равен 1/3 модуля Юнга.Рядом с гранулами в цитоплазме могут возникать внутриклеточные микротечения.В эозинофилах содержится эозинофильная пероксидаза, которая обладает цитотоксическимэффектом.
Возможно, после того, как гранулы эозинофилов выходят в межклеточноепространство (см. страницу 227), мы наблюдаем не только акустическое воздействие, асочетанное влияние УЗ и активного фермента.Рисунок 97. Фотографии мазков крови лошади. Эритроциты.а) 0.2 Вт/см2, модуляция 200 Гц, 45 с. Обведено в кружок: «гантели» и другие деформации эритроцитов. Обведенопрямоугольниками: относительно прямолинейные цепочки клеток.б) 0.4 Вт/см2, модуляция 10 Гц, 30 с. Множество самопроизвольных построений в поле зрения: «соты» изэритроцитов, цепочки клеток и другие фигуры.в) 0.05 Вт/см2, модуляция 500 Гц, 45 с. Тени эритроцитов (ср. рисунок 17 е на странице 77).г) 0.05 Вт/см2, модуляция 100 Гц, 60 с. «Гантели» (5 шт.
в поле зрения) и этапы их образования.д) 0.7 Вт/см2, модуляция 100 Гц, 45 с. Цепочки, «соты».е) рисунок 20г со страницы 87. 1.0 Вт/см2, непрерывный УЗ, 30 с. Многочисленные включения в эритроциты(чёрные точки — не паразиты и не дефект съёмки), агрегации. 1: тромбоциты. 2: лимфоцит в окруженииэритроцитов.222Рисунок 98. Фотографии мазков крови лошади. Лейкоциты.а) 0.2 Вт/см2, модуляция 10 Гц, 40 с.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
