Диссертация (1151313), страница 40
Текст из файла (страница 40)
Процентное соотношение лейкоцитов при интенсивности УЗ 0.4 Вт/см2.По нашему мнению, полученные результаты можно объяснить следующим образом.Размер лейкоцитов, находящихся в УЗ поле, превышает длину УЗ волны. Поэтому в зависимостиот попадания в область сжатия или разрежения они могут испытывать сжатие и расширениеобъёма, достигающее 20%. Это будет приводить к уменьшению количества активных каналов засчёт латеральной диффузии молекул липидного бислоя и к изменению функциональногосостояния клетки. Одновременно, в акустическом поле за счёт сжатия в волне клеточныхмембран и реализации пьезоэффекта, может наблюдаться изменение поверхностного заряда и,как следствие, изменение функционального состояния ЦПМ.
После чего мембрана становитсямишенью, на уровне которой реализуются цепи одинаковых в дальнейшем эффектов как дляакустических, так и для электромагнитных волн. Агранулоцитоз (почти полное отсутствиенейтрофилов) клиницисты регистрировали при действии ионизирующей радиации [121],инфекционных агентов (малярия), токсических веществ (сурьма, висмут). Уцелевшимиклеточными формами после перечисленных воздействий были также лимфоциты и моноциты.Возвращаясь к возможному механизму действия УЗ на лейкоциты, следует отметить ещё одинфакт. Из-за присутствия в цитоплазме гранул сжатие гранулоцитов в акустическом полепроисходит неравномерно, и ЦПМ разрывается.
На клетках агранулоцитов такого эффекта необнаружено, так как сжатие происходит со всех сторон примерно одинаково.В случае обработки образцов крови МДЖ одинакового объёма и в одинаковых условияхлейкоциты начинали разрушаться одними и теми же энергетическими «дозами». Поэтому можноконстатировать, что нами подтверждена выявленная ранее общая закономерность понаправлению влияния УЗ терапевтического диапазона интенсивностей на лейкоциты молодыхи животных старшего возраста: рост интенсивности УЗ от 0.05 Вт/см2 до 1.0 Вт/см2 приводитк уменьшению числа жизнеспособных клеток, в первую очередь — гранулоцитов.
Степеньвыраженности изменений зависит от интенсивности УЗ воздействия и возраста животного. Приросте экспозиции озвучивания до 2 минут и более отмечается прогрессивно возрастающий195цитоцидный эффект. Под действием бегущей непрерывной УЗ волны изменяется лейкограмма:увеличивается абсолютное и относительное количество агранулоцитов, при достоверномуменьшении числа гранулоцитов. В диапазоне интенсивностей 0.2–1.0 Вт/см2 происходитобразование агрегатов клеток. С увеличением времени экспозиции эффект прогрессирует.Суммируя полученные данные, можно считать, что выявлена возрастная закономерностьнаправления влияния УЗ терапевтического диапазона интенсивностей на лейкоциты животныхстаршего возраста и молодых.
Полученные результаты можно использовать на практикев ветеринарной диагностике при ультразвуковых, гематологических исследованиях и приразработке методов физиотерапии.Влияние амплитудно-модулированного ультразвука низкихинтенсивностей на соотношение грануло– и агранулоцитов домашних животныхДля определения наличия закономерности в «поведении» разных видов клеток крови в УЗполе воздействию модулированного УЗ подвергали смесь крови разных видов животныхв пропорции 1:1. Инсонацию проводили отобранными биологически активными частотами,которые, как мы показали ранее, оказывают максимальное воздействие на структуру ЦПМи состояние ядер грануло– и агранулоцитов.
Изменения процентного соотношения лейкоцитовпосле действия амплитудно-модулированного УЗ экспериментально подобранного диапазонаинтенсивностей и частот модуляции, направленно влияющими на физиологическое состояниеклеток крови собак, кошек и лошадей отражено в таблице 43.Таблица 43. Направление физиологического воздействия на лейкоциты(M, m = 2%; p < 0.05)Животные I, Вт/см2 ν, Гц t, с Гранулоциты, % Агранулоциты, %5050Лошадь.
Контроль7426Собака. Контроль7129Кот №1. Контроль7030Контроль смеси №1 Л+С3053470.2104537636016843049510.41045237760125330415920Л+С4535656022483032680.710452971602575302377700455–23 *77–951960–34 *66–10053475248316951491.010346620806733Контроль смеси №2 Л+К13056440.410454555601882Л+К130594130453862600195743Кот №2. Контроль5347Контроль смеси №3 Л+К23047530.4800453961Л+К2602971Примечание.
* Агрегация нейтрофилов. Одинаковая вероятность встретить в поле зрения агрегат на несколькодесятков клеток, либо не встретить их вовсе. Большинство клеток разрушены, но идентифицируются.80060304560304560Значения угловых коэффициентов графиков зависимости уменьшения относительногоколичества гранулоцитов в крови от продолжительности экспозиции (рисунки 80–82) вычислялипо формулам уравнения наклона линии регрессии методом наименьших квадратов:=∑(−̅ )(−̅)∑(−̅ )2,8080707060Гранулоциты, %Гранулоциты, %где x̅ и y̅ — средние значения.50403020106050403020100030456075Время инсонации, с0.2 Вт/см²0.4 Вт/см²0.7 Вт/см²1.0 Вт/см²Рисунок 80а.
График зависимости измененияпроцентного содержания гранулоцитов в смеси кровиразных видов животных (лошади и собаки) от времениинсонации под воздействием модулированногоультразвука терапевтического диапазонаинтенсивностей с частотой модуляции 10 Гц.0030456075Время инсонации, сЛ+С 10 ГцЛ+К1 10 ГцЛ+К2 800 ГцЛ+С 20 ГцЛ+К1 30 Гц80б. График зависимости изменения процентногосодержания гранулоцитов в смеси крови разных видовживотных (лошади и собаки; лошади и кошек) отвремени инсонации под воздействиеммодулированного ультразвука интенсивностью0.4 Вт/см2 с различной частотой модуляции.
В легенде:Л — лошадь, С — собака, К1, К2 — кошачьи.1978070Гранулоциты, %605010 Гц40700 Гц30800 Гц20100030456075Время инсонации, сРисунок 81. График зависимости изменения процентного содержания гранулоцитов в смеси крови лошадии собаки от времени инсонации под воздействием модулированного ультразвука интенсивностью 0.7 Вт/см2с различной частотой модуляции.Рисунок 82. Значения угловых коэффициентов линий регрессии для графиков разрушения гранулоцитов. а, б —кровь кошек разного возраста; в, д — смесь крови лошади и собаки, г — смесь крови разных животных.1 группа2 группа3 группа0.000-0.100-0.200-0.300-0.400-0.388-0.380-0.500-0.499-0.600-0.549а.
Для графиков на рисунке 74 а. Непрерывный УЗ,0.05 Вт/см2.0.20.40.71.0Вт/см² Вт/см² Вт/см² Вт/см²-0.400-0.450-0.470-0.641-0.827б. Для графиков на рисунках 75 б и 76 б. НепрерывныйУЗ различной интенсивности10 Гц700 Гц800 Гц-0.837-0.844-0.8340.0000.000-0.200-0.200-0.400-0.400-0.600-0.600-0.600-0.800-1.0000.000-0.100-0.200-0.300-0.400-0.500-0.600-0.700-0.800-0.900Л+К2Л+С Л+С Л+К1 Л+К1 80010 Гц 20 Гц 10 Гц 30 Гц Гц0.000-0.2000.2 Вт/см², 0.2 Вт/см², 0.4 Вт/см², 0.4 Вт/см²,2 группа3 группа1 группа4 группа4 группа-0.800-0.865-0.934-0.854-0.928-1.200в. Для графиков на рисунке 80а.Модуляция 10 Гц.-0.646-1.000-0.875-0.909-0.974-1.044-1.200г. Для графиков на рисунке 80б.Интенсивность 0.4 Вт/см2.-0.800-1.000-1.200д. Для графиков на рисунке 81.Интенсивность 0.7 Вт/см2.198Вычисление угловых коэффициентов линий регрессии для графиков разрушениягранулоцитов после действия непрерывным ультразвуком интенсивности 0.05–0.4 Вт/см2 далоследующие результаты (рисунок 82а, б).
Минимум абсолютного значения коэффициента b лежалв диапазоне от 0.38 до 0.55 (для 0.05 Вт/см2), увеличиваясь в зависимости от возраста животного.В пределах одной возрастной группы (группа 1) уменьшение количества гранулоцитов отвремени воздействия носит дозозависимый эффект (модуль b близок к 0.4). При этом, значениетангенса угла наклона линии регрессии зависело от вида животного: у кошек, в отличие от собак,ни разу не опускалось до минус 0.9.Диапазон изменения модуля коэффициента b лежал в пределах от 0.64 до 1.044, чтоотражало рост скорости разрушения гранулоцитов в УЗ поле при увеличении временивоздействия, что соотносится с данными, полученными по непрерывному УЗ.
Динамикаразрушения клеток крови при воздействии до 45 с и после сильно различается, на что указываетрезкое возрастание (до 1.8 и более, вплоть до 2.5) абсолютного значения углового коэффициента,посчитанного для соответствующих фрагментов кривой, — это и отражает скорость разрушениягранулоцитов. Очевидно, что количество разрушенных клеток увеличивается с наращиваниемвремени воздействия — но скорость разрушения является сложной функцией, что и отражаетразный угол наклона линии регрессии для отдельно взятых частей графика.Угловые коэффициенты линий регрессии изменения числа гранулоцитов послевоздействия модулированным УЗ с частотами модуляции из диапазона 10–30 Гц (околоминус 0.9) оказывались по абсолютному значению выше, чем после воздействия на частотемодуляции 800 Гц. Анализ физиологических изменений клеток крови разных видов животныхпод действием амплитудно-модулированного УЗ (таблица 22 на странице 101; таблицы 44, 47;рисунок 88б на страницах 206–215 далее) показал, что модуляционная частота 800 Гц действуетв основном напрямую на ядра клеток — их состояние, целостность — и только после этогонаступает лизис клетки.