Диссертация (1150276), страница 7
Текст из файла (страница 7)
Методы определения эпинефрина, цистеина и куркуминаМетоды определения эпинефрина в лекарственных препаратах. Длявысокочувствительногоопределениякатехоламиноввфармацевтическихпрепаратах применяются хроматографические методы [110, 111]. Пределы45обнаружения катехоламинов достигают 0,01 нг/л и ниже. Предложен методхемолюминесцентного определения катехоламинов (эпинефрина норэпинефрина,дофамина)спредварительнымхроматографическимразделением[110].Детектирование основано на реакции взаимодействия катехоламинов с люминоломи йодом в щелочной среде. Разработанная методика предложена для определениякатехоламинов в лекарственных препаратах.Для определения катехоламинов, в присутствии таких восстановителей, какаскорбиновая кислота, мочевая кислота, допамин, метилдопа и др.
широкоеприменение находят электрохимические методы анализа. В литературе описанымодифицированные электроды [112, 113], использование которых позволяетдостигать низких пределов обнаружения, например, 0,3 µМ для эпинефрина и 0,1µМ для допамина при их совместном присутствии.Согласно Государственной фармакопее X издания, для количественногоопределения эпинефрина в растворах для инъекций адреналина гидротартратапредложено использовать спектрофотометрическую методику, согласно которойпроводят фотометрирование смешанного раствора пробы, железо-цитратногореактива и аминоуксусного буферного раствора при длине волны 530 нм [114].Предложенпроточныйметодхемолюминесцентногоопределениякатехоламинов (эпинефрина, норэпинефрина и дофамина) [115].
Детектированиеосновано на реакции катехоламинов с люминолом и йодом в щелочной среде.Разработанная методика использована для определения катехоламинов влекарственных препаратах. Линейный диапазон определяемых концентраций дляэпинефрина составил 0,003 – 0,03 µМ. Предел обнаружения – 0,8 нМ.В литературе описан ряд проточно-инжекционных фотометрическихметодик определения эпинефрина в лекарственных препаратах, позволяющихдостигать высокой производительности анализа (до 180 проб в час) [116-120]. Приэтом наибольшее распространение находят окислительно-восстановительныереакции для проточного фотометрического определения эпинефрина. Так, дляпроведения фотометрической реакции предложено использовать периодат натрия[116, 117], при этом величину оптической плотности измеряют в диапазоне 480-49146нм.
Разработана проточная фотометрическая методика совместного определенияэпинефрина и норэпинефрина в щелочной среде. Детектирование проводили при342 нм и 394 нм для эпинефрина и норэпинефрина, соответственно [118]. P. Solichet al. разработали методику проточного определения эпинефрина по реакции с Fe(II) в среде аминоацетатно-карбонатного буферного раствора. Детектированиеокрашенного комплекса осуществляется при длине волны 530 нм [120]. M.F.S.Teixeira et al.
предложили проточную методику определения эпинефрина влекарственных препаратах. Согласно разработанной методике раствор пробы вацетатном буферном растворе пропускали через изготовленную авторами колонку,содержащую гранулы с иммобилизированным на их поверхности диоксидомсвинца. Образующийся адренохром детектировали при длине волны 486 нм [119].Методы определения цистеина в биологически активных добавках.Хроматографические методы широко применяют для определения аминокислот вбиологически активных добавках и продуктах питания [121-123]. Для определенияцистеинатакжеиспользуетсяметодкапиллярногоэлектрофореза[124]Электрофоретическое определение проводят в среде боратного буферногораствора с УФ-детектированием при λ=190-200 нм. Модифицированные электроды(стеклянныеэлектродысмезопористымуглероднымпокрытием[125],модифицированные золотые электроды [126], модифицированные графитовыеэлектроды [127]) находят применение для количественного определения цистеинав присутствии глутатиона.Для определения цистеина предложено использовать флуориметрическиереагенты.
В качестве таких реагентов применение находят ксантеновые красители,в структуре которых присутствуют альдегидные группы [128].Спектрофотометрически цистеин возможно определить по окислительновосстановительной реакции с Fe (III) в присутствии 1,10-фенантролина.Детектируют образующийся комплекс Fe (II) – 1,10-фенантролин при длине волныλ=510 нм.
Предел обнаружения цистеина составляет 5 µМ [129].47Влитературеописаныпроточныефотометрическиеметодикидляопределения цистеина, основанные на принципах диффузионно-конвективныхметодов (ПИА, SIA) [129-132]. В качестве фотометрических реагентов дляпроточногоопределенияцистеинапредложеноиспользовать:Fe(II)-ортофенантролин [129], ортофталевый альдегид - N-ацетилцистеин [130],5,10,15,20-тетракис(4-N-триметиламмониофенил) [131], а также автокаталитическуюсистемуNa2SO3/H2O2 [132].Минимальныйпределобнаруженияпроточного фотометрического определения цистеина достигает 0,12 µМ,максимальная производительность анализа – 30 проб в час.Методы определения куркумина в биологически активных добавках.
Ваналитической практике для определения куркумина и его деривативов вбиологическиактивныхспекрофотометрии[133,добавках134],распространениетонкослойнойполучилихроматографииметоды[135,136],высокоэффективной жидкостной хроматографии [137, 138], высокоэффективнойжидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием [139],вольтамперометрия [140], спектрофлуориметрия [141-145].Куркумин проявляет флуоресцентные свойства при его растворении ворганических растворителях (этанол, ацетонитрил, ацетон, 1,4-диоксан и др.) [144]и растворах поверхностно-активных веществ [145].
При этом диапазон длин волнвозбуждения лежит в диапазоне 370-455 нм, а максимум флуоресценции вдиапазоне 492-521 нм, в зависимости от растворителя. Также в литературе описаныфлуоресцентные реагенты для определения куркумина: комплекс Eu3+ -триптофан[142], бис(2,4,6-трихлорфенил)оксалат в присутствии пероксида водорода [146],циклодекстрин [147] и др. На данный момент проточных методик определениякуркумина не предложено.481.5.
ЗаключениеВ обзоре литературы рассмотрены основные типы миниатюризированныхустройств, функционирующих на принципах проточных методов анализа.Представленымикро-миниатюризацииимезофлюидныеустройства,диффузионно-конвективныхразработанныепроточныхметодов:дляПИА,мультишприцевого ПИА и последовательного инжекционного анализа. Во всехэтих устройствах образование аналитических форм происходит в каналах чипа поддействием диффузии и конвекции, при этом наблюдается дисперсия пробы впотоке носителя, которая снижает чувствительность анализа. Проточные методы спринудительной конвекцией, такие как проточно-порционный и циклическийинжекционный анализ [79, 16], обеспечивают более высокую чувствительность посравнению с диффузионно-конвективными.
Продемонстрирована возможностьминиатюризации проточно-порционного фотометрического анализа с помощьюмезофлюидных устройств, в которых образование аналитических форм и ихдетектирование осуществляется в смесительном канале при механическомперемешивании пробы и растворов реагентов. Новые возможности дляавтоматизации химического анализа открыл ЦИА [16]. Несмотря на преимуществаЦИА, такие как унификация гидравлических схем и отсутствие дисперсии пробыдля метода характерен относительно большой расход пробы, реагентов иобразующихся отходов [50].
С этой точки зрения, миниатюризация ЦИА –актуальная задача. В литературном обзоре рассмотрены основные материалы итехнологии изготовления микро- и мезофлюидных устройств.Обсуждаются некоторые методики определения эпинефрина, цистеина икуркумина, которые находят широкое применение в аналитической практике.Исходя из представленного обзора литературы можно заключить, что микрои мезофлюидные устройства позволяют автоматизировать химический анализ,значительно снизить объемы проб, уменьшить стоимость анализа за счет снижениярасходов реагентов и существенно сократить его время.
Широкое распространениеполучили микро- и мезофлюидные устройства, изготовленные из полимерных49материалов с интеграцией функциональных элементов для осуществлениядетектирования. Наибольшее применение находят микро- и мезофлюидныеустройства с фотометрическим и флуориметрическим детектированием.50Глава 2. Методика экспериментальных исследований2.1. Средства измерений и оборудование контроллер потоков Flow Controller PRO-6000 Yabegawa co., Япония; шприцевой насос Yabegawa co., Япония; перистальтические насосы Yabegawa co., Япония; шприцевой насос LSP02-1B Baoding Longer Precision Pump Co., Китай кран-дозатор VRS 50, Yabegawa Co., Япония спектрометр МАYA 2000-PRO, Ocean Optics, США; спектрофлуориметрJascoSpectrofluorometerFP-8300,оснащенныйтермостатом и магнитной мешалкой Jasco STR-812 спектрофотометр Jasco Spectrophotometer V-560 кварцевые кюветы; термостат LT-100. Температурный диапазон: от +10 ºС до +100 ºС.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
