Диссертация (1145858), страница 27
Текст из файла (страница 27)
В качествеисточников азота использует: пептон, триптон, дрожжевой экстакт, гидролизат казеина;слабоиспользует:Продуцируетказеин,ауксинынажелатин,среденитраты.сОбладаетL-триптофаном.протеазнойСпособенкактивностью.мобилизациималорастворимых соединений фосфора. Обладает сильной фунгицидной активности противгрибов р.
Fusarium, Alternaria, Pythium.Flavobacterium sp. RM14A. Крупные удлиненные прямые грамотрицательные палочки, 3-4 х0,5 мкм. Каталазо- и оксидазоположительные. Неподвижные. На среде R2A образуютплоские кожистые колонии ярко-желтого цвета, прозрачные, с ровным краем, застилающие119поверхность агара, диаметр колоний более 20 мм. Оптимальная температура роста 18˚С,рост отсутствует при +37˚С, способен к росту при +4˚С, оптимум pH 7,0. Строгий аэроб. Вкачестве источников углерода использует: глюкозу, сахарозу, ксилозу, лактозу, глицерол.
Вкачестве источников азота использует: пептон, триптон, дрожжевой экстракт, казеин,гидролизат казеина, желатин, нитрат; слабо использует: соли аммония; слабо растет набезазотных средах. Обладает протеазной, амилазной и липазной активностью. ОбладаетвыраженнойбактерициднойактивностьюпротивпредставителейродовErwinia,Pseudomonas, Clavibacter, Xantomonas.Serratia plymuthica AM24A. Овальные, почти круглые грамотрицательные бактерии длинной1,5-2 мкм. На среде R2A образуют слизистые колонии темно-малинового цвета со светлымкраем, не прозрачные, край ровный, выпуклый профиль, диаметр колоний 5-7 мм.Оптимальная температура роста 280С, рост отсутствует при +37˚С, штамм способен к роступри +40С, оптимум pH 7,0.
Факультативный анаэроб. В качестве источников углеродаиспользует: глюкозу, арабинозу, сахарозу, ксилозу, лактозу, мальтозу, инозитол, сорбитол,глицерол; слабо: дульцитол. В качестве источников азота использует: пептон, триптон,дрожжевой экстакт, гидролизат казеина, желатин, казеин, соли аммония; слабо используетнитраты; на безазотных средах растет слабо. Обладает протеазной, амилазной и липазнойактивностью.
Продуцирует ауксины на среде с L-триптофаном. Обладает сильнойфунгицидной активности против грибов р. Fusarium, Alternaria, Pythium, бактерициднойактивностью против представителей родов Erwinia, Pseudomonas, Clavibacter, Xantomonas.Collimonas sp. RM14C. Мелкие прямые, длинной около 1 мкм, грамотрицательные палочки.На среде R2A образуют крупные трудноотделяемые кожистые колонии диаметром 30-40 мм,стелящиеся по поверхности агара, выпуклые у центра, изрезанной шероховатойповерхностью, бесцветные и прозрачные.
Оптимальная температура роста280С, ростотсутствует при +37˚С, штамм способен к росту при +4˚С, оптимум pH 7,0. Аэроб. Вкачестве источников углерода использует: глюкозу, арабинозу, ксилозу, лактозу, глицерол,сорбитол, дульцитол, инозитол. В качестве источников азота использует: пептон, триптон,дрожжевой экстракт, казеин, гидролизат казеина; слабо использует желатин, аммоний,нитраты; на безазотных средах растет слабо. Обладает незначительной протеазной илипазной активностью.
Продуцирует ауксины на среде с L-триптофаном. Штамм Collimonassp. RM14C обладаетфунгицидной активностью против Fusarium culmorum, F.sporotrichioides, Alternaria alternata, бактерицидной активностьюпротив Clavibactermichiganensis, Pseudomonas fluorescens. Показана ростстимулирующая активность к томатам.Burkholderia bryophila AM32A.
Мелкие прямые укороченные грамотрицательные палочки.На среде R2A образуют колонии среднего размера диаметром 8-10 мм, желтовато-лимонного120оттенка, непрозрачные, слегка выпуклые, с ровным краем и пастообразной консистенции.Оптимальная температура роста 28˚С, рост отсутствует при +37˚С и при +4˚С, оптимум pH4,5. В качестве источников углерода использует: глюкозу, арабинозу, мальтозу, лактозу,маннитол. В качестве источников азота использует: пептон, триптон, гидролизат казеина,дрожж. экстракт, казеин; слабо использует: желатин, соли аммония и нитраты; слабо растетнабезазотныхсредах.Штаммобладаетнезначительнойамилазнойактивностью.Продуцирует ауксины на среде с L-триптофаном.3.3.7.
Заключение к разделу 3.3Скрининг изолятов с комплексом хозяйственно-ценных свойств (табл. 3.7) позволилотобрать ряд перспективных штаммов эндофитных бактерий сфагнов. Молекулярногенетическая идентификация выявила широкое разнообразие выделенных микроорганизмов.Доминирующимигруппамибактерийсредиизучаемыхсфагнум-ассоциированыхмикроорганизмов являлись представители родов Pseudomonas, Serratia, Burkholderia,ТакжеследуетуделитьвниманиефактуприсутствияFlavobacterium,Collimonas.представителейрода Burkholderia среди изучаемых изолятов. Виды B. bryophila и B.phenazinium в нашей работе были обнаружены в ассоциации со S. fallax и S. magellancum,отобранных на территории как России, так и Австрии, что подтверждает мнение овысокоспецифичнойвзаимосвязимеждупредставителямиэтогородабактерийисфагновыми мхами (Vandamme et al., 2007).
Бактерии с высоким антагонистическимпотенциалом были идентифицированы, как представители родов Pseudomonas, Serratia иFlavobacteriumбиоконтрольные–родовибактерий,которыеростстимулирующиезарекомендовалиагенты,исебяширококакхорошиеприменяютсявсельскохозяйственной микробиологии для создания биопрепаратов широкого спектрадействия (Шенин с соавт., 1996; Кравченко с соавт., 2002; Тихонович с соавт., 2005).Характеристикаферментативнойактивностиизучаемыхизолятовбактерийсвидетельствовала о наличии у них довольно активных гидролитических ферментов,выявлены штаммы, наиболее активно выделявшие протеиназы, амилазы, липазы ицеллюлазы.
Оптимальные температуры роста для данных бактерий находились в пределах18-28°C, при температуре +37°C рост изучаемых бактерий полностью подавлялся. Отмечено,что некоторые из изучаемых штаммов характеризовались способностью к психрофильномуросту при +4°С, что вероятно объясняется приспособленностью к температурным режимамболотных экосистем в регионах, отличающихся пониженными температурами. ОптимумыpH колебались от 5.5 до 7.0, при pH=8.0 рост всех изучаемых штаммов бактерий заметно121подавлялся. У одиннадцати исследованных штаммов in vitro отмечена способность кнакоплению ауксинов на среде с L-триптофаном, что говорит о потенциальной возможностииспользования данных штаммов как ростстимулирующих. Восемь перспективных штаммовхарактеризовались способностью растворять малорастворимые соединения фосфора, такиекак ортофосфат кальция и фосфоритна мука.
Данные штаммы (в основном представители р.Pseudomonas) будутвключены в разработку микробиологическихмобилизации малодоступных соединений фосфора.препаратов для122Таблица 3.7. Таксономическая принадлежность, хозяйственно-ценные и физиологические свойства наиболее перспективных штаммовШтаммФунгицидная активность(в целом)Бактерициднаяактивность (в целом)ФерментативнаяактивностьфосфатовРастворение(Ca3(PO4)2/ фосфоритнаямука)безазотныхнаРостсредахПродукция ауксинов (насреде с L-триптофаном)Оптимум tРост при +37Рост при +4Оптимум pHэндофитных бактерий-ассоциантов сфагновых мхов.Pseudomonas brenneri RM14BPseudomonas poae RF11DPseudomonas asplenii RF13HSerratia plymuthica AF24APseudomonas poae RM13CPseudomonas.
sp. RM13DPseudomonas fluorescens RF14JPseudomonas poae RF12CFlavobacterium saccharophilum RM14AF. saccharophilum RF14AF. sp. NFXBurkholderia bryophila AM11BBurkholderia bryophila AM32ABurkholderia phenazinum RM13BCollimonas sp. RF12HCollimonas sp.
RF13FCollimonas sp. RM14CCollimonas sp. RF13GStenotrophomonas rhizophila RF13CPedobacter cryoconitis RM11DPedobacter sp. RF14CPedobacter kribbensis RF14GPseudomonas sp. RF14DPseudomonas poae RF14HPedobacter sp. RM12BChryseobacterium soli RM12F+++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++±+++++++-P(+), L(+)P(++)А(+++), L(++)P(++), А(+), L(++)P(+), А(+)P(++)P(++), L(+)А(++)P(++), А(+++), L(++)P(+), A(++), L(++), С(++)P(+), A(+)А(+), L(++)А(+)A(+)A(+++), L(++)P(+), L(+)P(+), L(+)P(++), А(++)P(++), А(++), С(+++)P(++), А(++), L(++)P(+), А(+)P(+), А(+)С(+++)P(++), A(+++), L(+)+/++/+-/-/+/++/++/++/+-/-/±/+-/-/-/-/-/-/-/-/-/-/-/-/+/+-/-/-++++++-+++++++++++++++++++++2828282818282828182828182828281818282818281828282828-++++++±++++-6.06.06.07.05.06.06.06.07.07.06.05.04.56.06.06.06.06.06.07.07.06.06.06.06.06.0Примечание. Величина зоны подавления фитопатогена: «-» - отсутствует, «+»- до 5 мм, «++» - 5-15 мм, «+++» - более 15мм; ферментативнаяактивность:«P»протеаза,«А»амилаза,«L»липаза,«C»целлюлаза.1233.4.
Эндофитные бактерии-ассоцианты сфагновых мхов, как активные колонизаторыризосферы сельскохозяйственных культур и продуценты высокоэффективныхбиопрепаратов для сельского хозяйства3.4.1. Колонизационная активность in plantaИзначально возникший вопрос о способности штаммов бактерий, выделенных из тканейсфагновых мхов, успешно колонизировать ризосферу высших растений, имеющихсельскохозяйственное значение, являлся основной особенностью данных исследований. Отрешения этой проблемы зависело, насколько эффективны будут штаммы, обладающиеповышеннымростстимулирующимиантагонистическимпотенциаломпротивфитопатогенов, в условиях системы «высшее растение - бактерия».Использование метода гнотобиотических систем позволило дать положительный ответ наэтот ключевой вопрос работы.Колонизационный потенциал 5 штаммов тестируемых бактерий, выделенных из сфагновыхмхов (табл.
3.8), имел достаточно высокие значения. Тестируемые штаммы хорошоприживались и в ризосфере и на корнях пшеницы, а так же на поверхности корней томатов,не уступая, а в ряде вариантов превосходя соответствующие показатели контрольногоштамма P. chlororaphis RR228. Максимальные значения приживаемости на корнях, какпшеницы,такитоматовзарегистрированыдляSerratiaplymuthicaAM24AиStenotrophomonas rhizophila RF13C. Относительные значения численности данных бактерийна корнях по сравнению с ризосферой также были максимальными и составляли 14%.Численность остальных штаммов также была высока и сопоставима с показателямиколонизационной активности контрольного штамма.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
