Сведения о результатах публичной защиты (1145820), страница 3
Текст из файла (страница 3)
° Установлено, что функциональные характеристики альбуми на человека и альбумина крысы отличаются между собой в меньшей степени по сравнению с функциональными характеристиками бычьего альбумина. Более консервативными являются бычий альбумин по отношению к альбумину человека и альбумина крысы, а также сайт Садлоу 11 по отношению к сайту Садлоу 1 всех исследованных видов альбумина. ° Установлено, что эффективность фосфорилирования сайта Садлоу П всех трех видов альбумина при взаимодействии с параоксоном выше эффективности ацетилирования этого сайта при взаимодействии с л-нитрофенилацетатом. ° Определена аффинность зомана к двум сайтам связывания альбумина быка методом остаточного ингибировання ацетилхолинэстеразы.
° Определены сайты и характер взаимодействия альбумина с субстратамн эстераз и фосфорорганическими соединениями, с использованием биохимических методов ы гйго и методов молекулярного моделирования т яйсо. Теоретическая значимость работы состоит в том, что предложена схема и математическая модель для описания эстеразной активности альбуми на„впервые проведен биохимический анализ функционирования двух сайгон альбумина в сочетании с анализом 1п ийсо, Результаты важны для развития методологии до клинических исследований холинэргических фармакологических препаратов. Сочетание методов теоретической и экспериментальной оценки (псевдо)эстеразной активности альбумина позволит найти способы направленного воздействия на определенные сайты или молекулу альбумина в целом лигандами природного и искусственного происхождения, повышая эффективность антидотной терапии, а также терапии различных заболеваний. Применительно к проблематике диссертации результативно использован комплекс биохимических методов, включающий спектрофотометрическое определение эстеразной активности альбумина по отношению к основному субстрату эстераз — инитрофенилацетату, и по отношению к параоксону, а также по отношению к зоману с использованием принципа остаточного ингибирования ацетилхолиэстеразы: кроме того, использован комплекс методов молекулярного моделирования„ включающий докинг лигандов в центрах связывания альбуминов с помощью программного пакета Ащодос!с 4.0.
и метод молекулярной динамики для оценки стабильности полученных комплексов лиганд-белок с помощью программного пакета бКОМАСЯ. Практическая значимость работы обоснована тем, что установленные функциональные характеристики взаимодействия с п-нитрофенилацетатом и параоксоном сайтов Садлоу 1 и Садлоу 11 альбумина крысы и человека ближе между собой и существенно отличаются от характеристик бычьего альбумина, что позволит точнее оценивать экспериментальные данные с учетом видовой специфики, что в свою очередь важно в свете задач трансляционной медицины.
Значение полученных соискателем результатов для практики подтверждается тем, что: установлено сходство функциональных характеристик сайтов Садлоу 1 и Садлоу 11 альбумина крысы и человека и их отличие от функциональных характеристик бычьего альбумина с и-нитрофенилацетатом и параоксоном в качестве субстратов: определены кинетические и равновесные характеристики истинно эстеразной активности сайта Садлоу 1 альбум и на крысы, человека и быка, которые свидетельствуют о необходимости использования альбуми на крысы в экспериментальных моделях и ий.о, а не более дешевый и доступный бычий альбумин; предложенная оригинальная схема для описания эстеразной активности альбумина и математическая модель.
подтверждающая данную схему, позволят усовершенствовать существующие модели токсикокинетики фосфорорганических соединений в организме млекопитающих: проведен биохимический анализ функционирования двух сайтов альбумина в сочетании с анализом !и зИсо; пример такого сочетанного анализа является важным вкладом в развитие методологии доклинических исследований фармпрепаратов. Оценка достоверности результатов исследования выявила, что: ° результаты экспериментов получены с применением методов, адекватных задачам исследования, и подвергнуты корректной статистической обработке; ° данные, представленные в диссертации, являются достоверными и воспроизводимыми; ° достоверность полученных данных подтверждается обоснованным выбором экспериментальных методик. согласованностью теоретических предпосылок исследования и полученных результатов.
достаточным количеством повторений экспериментов и корректностью проведйнного статистического анализа. Диссертация не содержит некорректных заимствований. На заседании 21 июня 2018 Диссертационный совет, заслушав и обсудив диссертацию Шмурана Владимира Игоревича «Сравнительный анализ связываюи(ей и эстеразной активности сывороточного альбумина человека, быка и крысы», пришел к выводу о том, что представленная работа является оригинальным. законченным (в рамках поставленных задач) научно-квалификационным исследованием.
полностью отвечающим требованиям„ предъявляемым к диссертациям на соискание ученой степени кандидата наук (п.9 «Положения о присуждении ученых степеней», утвержденного Постановлением Правительства РФ № 842 от 24.09.2013, в действующей редакции от 02.08.2016). Диссертационный совет принял решение присудить Шмурану Владимиру Игоревичу ученую степень кандидата биологических наук по специальности 03.01. 04 — биохимия.
При проведении тайного голосования диссертационный совет в количестве 24 человека (из них 6 докторов наук по специальности 03.01.04 — биохимия), участвовавших в заседании, из 33 человек. входящих в состав Совета., проголосовал: «за» - 24, «против» - нет. недействительных бюллетеней — нет. Председатель диссертационного совета Д.212.23 доктор биологических наук, профессор, академик РАН Ученый секретарь диссертационного совета Д.212Ъф„'1 0 ° с.".'л ~;.'' ло ор б юук, ~р ф»тс.,:: Ноздрачев А.Д. Алексеев Н.П.
Личный вклад соискателя состоит в личном участии во всех экспериментах, представленных в данной работе, проведении статистической обработки полученных результатов, участии в написании тезисов и статей, представлении результатов на конференциях. Экспериментальная часть работы выполнена на базе ФГУП «НИИ гигиены. профпатологии и экологии человека» ФМБА России.
Все полученные результаты исследования представлены на всероссийских и международных конференциях, опубликованы в периодических научных изданиях, рекомендованных ВАК РФ; кроме того, в настоящее время по ним готовятся новые совместные публикации. .
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
