Отзыв официального оппонента (1145728)

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла

1ОТЗЫВофициального оппонента доктора биологических наукЕкатерины Александровны Никитинойна диссертацию Тимофея Сергеевича Глинина на тему«Пути стабилизации и дестабилизации генома клеток костного мозга мыши придействии ольфакторных хемосигналов», представленную к защите насоискание ученой степени кандидата биологических наук по специальности03.02.07 – генетикаДиссертационное исследование Т.С.

Глинина посвящено исследованиюроли ольфакторных психосоциальных факторов в индукции различныхсостояний нервной системы, приводящих к изменению дестабилизации геномаклеток костного мозга с привлечением животной модели на мышах.Актуальность работы. Для современной генетики и медицины крайненеобходимопониманиемеханизмовподдержаниястабильностигеномасоматических клеток. Дестабилизация их генома может приводить квозникновению большого числа патологий, в том числе таких социальнозначимыхзаболеваний,какрак,атеросклероз,нейродегенеративныезаболевания.

Следует отметить, что несмотря на интенсивные исследования вэтой области, данные заболевания получают все большее распространение. Этосвязано с тем, что имеющихся знаний о механизмах поддержания стабильностигеноманедостаточнодляпониманияпатогенетическойосновыэтихзаболеваний. Кроме того, дестабилизация генома является одним из основныхмеханизмов старения организма. Универсальным проявлением старенияявляется ухудшение способности поддерживать базовый уровень гомеостаза иадекватно реагировать на стресс. Ответ организма на воздействие стрессорныхфакторов обусловлен специфической активацией нервной системы, что можетбыть выражено в активации развития стресс-реакции в ответ на однивоздействия и блокировании стресса в случае других воздействий.

Детальномуисследованию этой актуальной проблемы и посвящена диссертационная работаТ.С. Глинина.2Поскольку дестабилизация генома клеток играет важную роль вформировании большого числа патологий у млекопитающих, включаячеловека, изучение роли нервной системы в регуляции данного процесса,предпринятое в рамках диссертационного исследования Т.С. Глинина,представляет сугубый интерес как для фундаментальной науки, так и дляприкладных медико-биологических исследований.Необходимо подчеркнуть важность и перспективность исследованийавтора, посвященных изучению психосоциальных стрессорных факторов.

Этопредставляется особенно важным в свете того, что у человека большая частьстрессоров относится к неинвазивным психосоциальным факторам. Пониманиемеханизмов их действия требует поиска адекватных животных моделей.Удобной моделью для изучения психосоциальных стрессоров являетсяиспользование социально-значимых хемосигналов у мышей.Именно с использованием мыши в качестве модельного объекта авторомпоказано, что именно стресс-реакция, вызванная хемосигналами, приводит кдестабилизациигеномамикроповрежденияхклетокДНК,акостноготакже–вмозга,проявляющейсяхромосомныхвперестройках,наблюдаемых при клеточных делениях.Такимобразом,изучениеролинервнойсистемыврегуляциидестабилизации генома клеток соматических клеток является актуальнымнаправлением, исследование которого позволит приблизиться к болееглубокому пониманию механизмов развития целого ряда патологий, а такжепроцессов старения.Структура диссертации.

Материал изложен ясно, диссертация хорошоструктурированаиоформлена.Работаизложенана175страницахмашинописного текста и состоит из списка сокращений, введения, обзоралитературы, изложения материалов и методов исследования, собственныхрезультатов исследования и их обсуждения, заключения, выводов и спискацитируемой литературы. Работа иллюстрирована 33 рисунками и 3 таблицами.Однако нельзя назвать соотношение разделов в диссертации сбалансированным3по объему. Глава «Материал и методы» является излишне подробной. Списоклитературы включает 368 источников, из них 35 отечественных (7 –самоцитирование) и 333 зарубежных.Во введении обоснована актуальность и степень разработанности темыисследования, четко и корректно сформулированы цель и задачи исследования,научная новизна, теоретическая и практическая значимость, положения,выносимые на защиту, отражены методология и методы диссертационногоисследования, личный вклад автора, степень достоверности и апробациярезультатов, структура диссертации.В«Обзорелитературы»приводитсяразвернутаяхарактеристикафизиологического стресса, в том числе его влияния на иммунную систему.Подробно разбирается влияние стресса на стабильность генома.

Большоевниманиеуделеноиндукциифизиологическихответовольфакторнымивоздействиями у домовой мыши, послужившей модельным объектом дляпроведения исследований. При чтении «Обзора литературы» становитсяочевидным, что автор обладает глубокими и обширными знаниями кругапроблем и литературы по избранной тематике.В главе «Материалы и методы» изложена общая характеристикаэкспериментального материала (высокоинбредные линии мышей), подробноописаны схемы экспериментов, методы исследования, в частности, методщелочного кометного электрофореза, ана-телофазный метод учета нарушениймитоза и хромосомных аберраций, твердофазный иммуноферментный анализ,функциональнаямагнитно-резонанснаятомография,атакжеметодыстатистической обработки результатов.

Автором использован широкий арсеналсовременных методик, позволяющих сделать обоснованное заключение поисследуемой проблеме.В главе «Результаты и обсуждение» приведены результаты собственныхисследований и анализ полученных данных. Экспериментальный материализложендетальноихорошопроиллюстрированрисунками.Вэкспериментальной части работы Тимофей Сергеевич проводит исследование4способности 2,5-диметилпиразина влиять на стабильность генома мышей.Обнаружено, что воздействие 2,5-ДМП повышает частоту нарушений митоза уразличных линий мышей, это позволяет автору предполагать, что данныйкластогенный эффект феромона является неспецифическим для домовой мыши.Входеисследованиядиссертантпроводитсравнениединамикивыявления микро- и макроповреждений ДНК при действии 2,5-ДМП.

При этомпиквозникновенияхемосигналанарушенийприходилсяна24митозачасаприпредоставлениивоздействия,втоданноговремякакмикроповреждения к этому моменту уже исчезали. На основании литературныхданныхирезультатовсобственныхисследованийавторприходиткзаключению о роли репарационных механизмов в формировании ответнойреакции на стресс.Интересен раздел, посвященный сопоставлению эффекта быстройдестабилизации генома, индуцированного 2,5-ДМП и другими стрессорнымифакторами, как полностью неинвазивными (хемосигналы мочи коши), так итребующимифизическогоконтактасживотными(иммобилизация).Полученные диссертантом данные о дестабилизации генома клеток костногомозга у мышей при действии как классических стрессоров (воздействие мочикошки и иммобилизация), так и 2,5-ДМП, являются оригинальными ипредставляют особый интерес в свете знаний о том, насколько важную рольиграет соматический мутагенез в функционировании костного мозга и всейгематопоэтической системы.

Выявленная в данной работе способность нервнойсистемы индуцировать геномную нестабильность соматических клеток пристрессе может объяснять высокую скорость мутагенеза, наблюдаемую вгематопоэтических стволовых клетках и приводящую к апоптозу и истощениюпула стволовых клеток костного мозга при старении.Проведенное Т.С. Глининым изучение гормонального ответа на действие2,5-ДМП показало, что в возникновении генотоксического эффекта послевоздействия стрессора принимают участие как глюкокортикоиды, так икатехоламины, причем последние действуют через β-адренорецепторы.

Эти5данные подтверждают возможность участия стресс-гормонов в быстройиндукции геномной нестабильности и представляют большой интерес дляразвития данной перспективной области исследований.Входеисследованийбалансовыхвзаимодействий2,5-ДМПихемосигналов самок-одиночек (ХСО) при индукции нарушений митоза вклетках костного мозга самцов мышей выявлено, что и генотоксическийэффект 2,5-ДМП и протекторный эффект ХСО полностью исчезают приинактивацииобонятельногоэпителия.Этопозволяетрассматриватьиспользуемые феромоны как источники социально значимой информации, аописанныегенетическиеэффектымогутбытьвызваныиндукциейопределенных состояний нервной системы животных.Особо следует подчеркнуть логическую взаимосвязь всех разделовисследования, четкую постановку задач экспериментов, вытекающих изполученных в предыдущих частях работы результатов, что свидетельствует окомплексном походе автора к изучаемой проблеме.Все результаты, представленные на защиту, получены либо личнодиссертантом, либо при его непосредственном участии, что подтверждаетсяопубликованными 7 статьями в рецензируемых изданиях, рекомендованныхВАК,иапробациейконференциях.результатовВыводыработынамеждународныхполностьюобоснованыироссийскихполученнымирезультатами исследования.ПредставленноеТ.С.Глининымдиссертационноеисследование,несомненно, обладает научной новизной, демонстрируя, что предоставление2,5-ДМП активирует ось гипоталамус-гипофиз-надпочечники, и тем самыминдуцирует стресс-реакцию у самцов мышей.

Впервые были изученынейроэндокринныепутидействия2,5-ДМП,ибылопоказано,чтопредоставление данного хемосигнала приводит к инактивации главныхобонятельных луковиц. Кроме того, впервые выявлено, что как гормональные,так и генотоксические эффекты 2,5-ДМП могут быть нейтрализованыпредоставлением самцам мышей хемосигналов самок-одиночек.6Теоретическая и практическая значимость работы определяетсяполученными сведениями о способности острого стресса дестабилизироватьгеном клеток, поскольку повреждения генома клеток ассоциированы спатогенезом ряда заболеваний человека, таких как многие виды рака,нейродегенеративные заболевания, атеросклероз и заболевания кровеносной ииммунной системы.

Характеристики

Тип файла PDF

PDF-формат наиболее широко используется для просмотра любого типа файлов на любом устройстве. В него можно сохранить документ, таблицы, презентацию, текст, чертежи, вычисления, графики и всё остальное, что можно показать на экране любого устройства. Именно его лучше всего использовать для печати.

Например, если Вам нужно распечатать чертёж из автокада, Вы сохраните чертёж на флешку, но будет ли автокад в пункте печати? А если будет, то нужная версия с нужными библиотеками? Именно для этого и нужен формат PDF - в нём точно будет показано верно вне зависимости от того, в какой программе создали PDF-файл и есть ли нужная программа для его просмотра.

Список файлов диссертации