Отзыв официального оппонента 2 (1145649)

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла

отзыв официального оппонента о диссертации Якимовой Анны Олеговны на тему: "Нарушения формирования нервных центров и поведения у мутантов по гену кЬг (Рт пх~1) 0гозорЫа те!апояаз~ег", представленной на соискание ученой степени кандидата биологических наук по специальности 03.02.07— генетика Синтез мРНК, ее процессинг, сплайсинг и последующий экспорт из ядра являются очень тесно связанными процессами. Соответственно, исследование того, как мРНК экспортируется из ядра и какие факторы вовлечены в этот процесс, существенно для понимания фундаментальных механизмов реализации генетической информации. Работа А. Якимовой посвящена исследованию гена Иг дрозофилы из семейства генов Ах~Двое)еаг ехрогг гасщг), представители которого имеются в геноме эукариот от дрожжей до человека и кодируют факторы, вовлеченные в транспорт болыпинства мРНК из ядра в цитоплазму.

Белки семейства МХЕ являются высоко консервативными, обладают сходной доменной структурой и исследования на дрозофиле — классическом генетическом объекте позволяют пролить свет на функционирование факторов ядерного экспорта мРНК у эукариот в целом. В то же время, мутации гена Ии; кодирующего фактор пхй у дрозофилы характеризуются широким спектром плейотропных эффектов, некоторые из них являются доминантными, среди которых наиболее часто встречаются нарушения фертильности самцов, дефекты нервной системы и нарушения поведения.

Это заставляет предположить существование у гена яЬг дополнительных тканеспецифичных функций, реализующихся через экспрессионный полиморфизм гена яЬк Диссертационная работа А.О. Якимовой направлена на исследование одной из наиболее сложных и интересных проблем, возникающих при рассмотрении подобных многофункциональных генов— специфической роли обладающего общеклеточными функциями гена ~яЬг) в формировании нервной системы и поведения. У человека нарушения функций генов семейства Мх~ ассоциируют с серьезными дефектами развития мозга, умственной отсталостью и аутизмом.

Формирование полноценно функционирующего мозга определяется согласованной реализацией генетических программ развития, определяющих формирование всего многообразия различных типов нейронов, и установлением корректных связей между ними. Именно для исследований таких сложных процессов, как формирование мозга, дрозофила„для которой очень хорошо разработаны генетические методы, биология развития, генетика поведения, является незаменимой моделью, а данные, полученные в таких исследованиях, могут быть экстраполированы на более сложно устроенные организмы, включая человека.

В связи с этим можно сделать вывод, что работа А.О. Якимовой безусловно очень актуальна и заслуживает серьезного внимания. Диссертационная работа А.О. Якимовой изложена на 155 страницах и построена традиционно, состоит из оглавления, списка сокращений, введения, обзора литературы (Тлава 1), главы материалы и методы (Глава 2), разделов результаты (Тлава 3) и обсуждение результатов (Глава 4), заклточения, выводов н списка литературы. Список цитируемой литературы содержит 324 наименования работ отечественных и зарубежных авторов, из которых 1б — на русском язьгке. В обзоре литературы автор последовательно рассматривает особенности строения и морфогенеза мозга и глаз у дрозофилы, ключевые процессы, происходящие при формирования мозга 27.

те1алодазгег и определяющие их факторы, а также последствия нарушения этих процессов и, наконец, семейство белков ХХР. При чтении обзора литературы обращает на себя внимание очень высокая научная эрудиция автора„ тщательность проработки материала .и разносторонность представленной информации. Очень детально описана анатомия нервной системы дрозофилы на разных этапах развития, механика развития, генетический контроль детерминации возникновения различных типов нейронов и связей между ними. Специальный раздел посвящен белкам семейства ХХг, их структуре и функциям„тщательно рассмотрены имеющиеся в мировой литературе сведения о гене збг дрозофилы.

Обзор литературы очень хорошо иллюстрирован и содержит 27 рисунков с детальными комментариями к каждому из них. В качестве недостатка стиля изложения именно этой части работы можно отметить только излишнее„на наш взгляд, употребление многочисленных сокращений (42 только для русских терминов), что временами затрудняет восприятие очень насыщенного информацией текста, особенно в тех случаях, когда несколько таких не всегда очевидных сокращений присутствуют в одном предложении. В целом, безусловно создается впечатление, что автор очень хорошо знаком с состоянием изучаемых проблем и легко ориентируется в наиболее перспективных направлениях их развития. Глава «Материалы и методы» содержит подробное описание генетических, цитологических и иммуноцитохимических методов, использованных автором работы. В работе использованы методы анализа поведения дрозофилы (тест на отрицательный геотаксис)„методы приготовления препаратов органов на различных стадиях развития (мозг личинок первого возраста, глазо-антеннальные имагинальные диски и мозг личинок третьего возраста, мозг имаго); методы иммуногистохимической окраски; приготовления парафиновых срезов голов имаго; анализ препаратов при помощи световой и лазерной сканирующей конфокальной микроскопии.

Использованные автором методы вполне современны надежны и позволили получить оригинальные результаты. Все использованные методы являются абсолютно адекватными для решения поставленных автором диссертации задач, корректно выбраны и использованы методы статистической обработки полученных результатов.

В разделе «Результаты» А.О. Якимова рассматривает результаты собственных исследований роли гена юг в развитии и функционировании мозга у П. те1алодазтег и характеристик локомоторной активности особей различных генотипов. Особенно благоприятное впечатление оставляет тщательный подход автора работы к выбору всех необходимых контролей в каждом проведенном эксперименте, позволяющих учитывать влияние изменения дозы гена зЬг и хромосомной локализации аллеля дикого типа при исследовании эффектов мутации яЬг~ или делеции этого гена кЬг (в гетерознготе). В работе описаны результаты последовательных исследований (начииая с изучения локомоторной активности особей), где результаты каждого из проведенных экспериментов корректно используются для выдвижения соответствующих экспериментально проверяемых предположений и служат логическим обоснованием для постановки дальнейших экспериментов.

Такой подход крайне привлекателен н построение этого раздела работы выглядит логически очень стройным, но и необходимым образом включает детальное обсуждение результатов по ходу изложения (в том числе с привлечением данных литературы), так что, возможно, разделы «Результаты» и «Обсуждение результатов» стоило объединить.

< '3 Исследуя локомоторную активность, А.О. Якимова показала, что аллелыЬг ' проявляет доминант-негативные характеристики и приводит к нарушению активности особей, наиболее сильно выраженному у самцов. Поскольку в основе поведенческих дефектов могут лежать аномалии структуры нервных центров мозга, на следующем этапе автор исследовала структуры мозга самцов и самок тестируемых генотипов.

Используя методы конфокальной микроскопии и анализа парафнновх срезов, А.О. Якимова выявила, что нарушение поведения и способности к отрицательному геотаксису у самцов, несущих аллель |Ьг в гетерозиготе, ассоциировано с дефектами определенных функциональных .13 центров мозга — эллипсоидного тела и медуллы, а также с увеличением уровня нейродегенерации. Логичным продолжением этих экспериментов было исследование тех процессов, которые могли привести к формированию подобных дефектов в ходе развития дрозофилы. Автором было показано, что дефекты формирования медуллы у самцов, несущих аллелыЬг" в гетерознготе, связаны с нарушением роста и терминации аксонов фоторецепторных нейронов и сопровождается повьппенным уровнем нейродегенерации уже на личиночной стадии развития. Наконец, поиск возможных механизмов, лежащих в основе выявленных дефектов, привел автора к исследованию локализации белка 8ВК в клетках мозга в динамике личиночного развития.

Характеристики

Тип файла PDF

PDF-формат наиболее широко используется для просмотра любого типа файлов на любом устройстве. В него можно сохранить документ, таблицы, презентацию, текст, чертежи, вычисления, графики и всё остальное, что можно показать на экране любого устройства. Именно его лучше всего использовать для печати.

Например, если Вам нужно распечатать чертёж из автокада, Вы сохраните чертёж на флешку, но будет ли автокад в пункте печати? А если будет, то нужная версия с нужными библиотеками? Именно для этого и нужен формат PDF - в нём точно будет показано верно вне зависимости от того, в какой программе создали PDF-файл и есть ли нужная программа для его просмотра.

Список файлов диссертации