Отзыв ведущей организации (1145641)
Текст из файла
«У Т В Е Р Ж Д А 1О» Директор Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биологии развитии Федерального государственного бюджетного учреждении науки Института биологии развития им. Н.К. Кольцова (ИБР РАН) Член-корр, РАН, д.б.н. а 7 им, Н.К. Кольцова РАН (ИБР РАН) ул Вавилона, л, 26, Москва, 119334 тел, 8 14991-135-33-22 Факс 8 1499)-135-80-12 !Ьгиа~! 14Ьгаа11Ыиаиг 1гпр.д14Ьгаксчгггсог.ггл 0КПО 02699062, 01 1Ч1 1027700450800 ИПП714ПП 7736044851077360П101 А.В.Васильев гукай,5 кь Ф~ЛФ„. глГ~/~У 2018 г.
На № 01-115-4901 от 02.032010 Отзыв ведущей организации о научно-практической значимости диссертации Якимовой Анны Олеговны па тему: "Нарупгенпа формировании нервных центров и поведения у мутантов по гену збг 14лт пх/4) 0гоаор/п1л нге1алоопйег", представле51ной к защите на соискание ученой степени кандидата биологических наук по специальности: 03,02.07 — генетика. АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ ИССЛЕДОВАНИЯ Изучение экспрессии и функционирования эволюционно-консервативных генов является фундаментальной задачей современной генетики.
В этом отношении особое место занима!от гены. ыутап1551 которых 17роявля141т гглейгэтро17ный эфйгект. Исследование топкой структуры конкретных аллелей и специфического фенотипа их носителей-мутантов важно для представления полной картины функционирования таких ~снов в разных органах и тканях. ) 77 оюрг7!га л71.1г!77о~гпзтег является классическим генетическим объектом для получения и изучения аллельных вариаиглзв генов с плсйотрош1ым 31рфс!01ом. В те !ение последних ста лет этот организм был незаменим в генетических экспериментах по исследованию механизмов наследственности и процессов развития. Достижения в области визуализации и усовершенствования генетических методик привели к тому, что в последние годы дрозофила также стала одной из наиболее эффективных систем для изучения нл «ггп слОжных функций реГуляторных белков, контролирующих разегитие МОЗГа и поведенческие реакции.
Ряд таких белков являются участниками эволкзционно-консервативных сигнальных каскадов, необходимых для формирования точной позиционной информации в развивающемся мозГе, Где критическое значение иьгегОт динамичные изменения цитоскелета и локализованная (отсроченная) трансляция МРНК.
В этой связи актуальным является выявление и исследование конкретных юшелей генов, продукты которых являются РНК- связывагощими белками. Мутации которых проявляют н«проспецифический фенотип. Работа Якимовой А,О. посвящена изучению нейроспецифической функции гена О. иге/аиор«ггвг - хпг, который кодирует РНК-связывшощий белок эволюционно- консервативного семейства Мцс!еаг Ехрогг Расгог (НХР). участвующего в цитоплазматическом транспорте МРНК. Белки этого семейства могут взаимодействовать с белками, ассоциированными с цитоскелетом, определяя рост отростков нервных клеток и формирование корректных связей между нейронами. Изучение механизма функционирования конкретных генов семейства Ухг' приблизит понимание того, как формируется позиционная информация в развившощемся мозге, определяемая отсроченной трансляцией целевых МРНК.
Важность темы исследования продиктована также тем, *по снижение экспрессии подобных факторов в мозге человека мохгет приводить к нейродегенеративным заболеваниям. Актуальность темы исследования не вызывает сомнений, НОВИЗНА НАУЧНЫХ РКЗУЛЬтАтоВ На наш взгляд основной научной новизной работы Якимовой А.О. является описание новой нейроспецифической функции гена ЗМ в мозге О. глеlгслор~«г, связанной с ростом и терминацией аксонов фоторецепторов„отличной от известной универсальной функции этого гена - контроль ядерно-цитоплазматического экспорта МРНК. Соискатель впервые показала, что нарушение нейроспецифической функции приводит к значимым нейродегенеративным процессам в мозге дрозофилы и вызывает аномальные поведенческие реакции.
Несомненно, важным и интересным результатом Якимовой А.О. является установленный ею локальный характер распределения белка БВК, ограниченный определенными нейробластами и их потомками к тому же в составе не всех, но ряда транспортных нейрональных РНП-гранул, говорящий о наличии целевых МРНК, транспорт которых осуществляется этим белком. ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ Практическая значимость результатов работы Якимовой А.О. заключается в том, что она показала зависимость величины нейродегенеративных процессов в мозге дрозофил от уровня экспрессии гена кЬк усугубля~огпуюся с возрастом, Учитывая высокий консерватизм белков семейства )МХЕ, результаты работы Якимовой А.О., полученные на дрозофиле, можно интерпретировать к подобным процессам у человека.
Результаты диссертации можно использовать В качестВС демонстрационного материала при чтении спецкурсОВ на медицинских и биологических факультетах высших образовательных заведений. ОЦЕНКА СОДЕРЖАНИЯ ДИССЕРТАЦИИ Диссертация Якимовой А.О. Состоит из станлар нных разделов; «Введению>, «Обзора литературы», «Материалов и методов», «Результагов», «Обсуждения результатов», «Заключения»„«Выводов» и «Списка литературы». !'Вбота изложена на )55 страницах текста, иллюстрирована 59 рисунками и 4 таблицами. Список цитируемой литературы Вклк1чает 324 исто~ника. Во Введении автор лаконично обосновывает актуальность и степень разработанности выбранной темы, формулирует цель и задачи исследования, выделяет научную новизну, практическу1о ценность, степень достоверности и апробацию результатов работы, дает сведения о публикациях и выступлениях на научных форумах.
Цель исследования и задачи сформулированы корректно. Обзор литературы читается легко и с интересом, написан с использованием последних научных данных и свидетельствует о компетентности автора. Он снабжен 25 цветными рисунками - половина от всех рисунков (59) диссертационной работы, облегчающими восприятие материала.
Обзор состоит из 4-х разделов. В первых 2-х разделах автор дает подробнейшук~ характеристику структурно-функциональной организации мозга дрозофилы, рассматривает этапы формирования этого органа и генетический контроль его развития от эмбриона до имаго. Эти разделы дают ясное представление о дрозофиле„как модельном генетическом объекте„который можно с успехом использовать для изучения эволюционно консервативных процессов нейрогенеза, нарушение которых может приводить к нейродегенеративным заболеваниям, Два последних раздела посвящены характеристике эволюционно-консервативных белков семейства ХХГ (факторов ядерно-цитоплазматического транспорта) и их специфической роли в нейрогенезе.
Гомолог одного из этих белков (ХХН) у дрозофилы кодируется геном Ип исследованию нейроспецифической функции которого и посвящена диссертационная работа. Автор приводит вскх известную на текущий момент. информацию, относительно этого гена и его муггантных производных, отме пщ недостаточность исследования нейробиологических функций белка БВК, несмотря нейроспецифический фенотип и аномальное поведение особей ряда аллелей. «Обзор литературы» производит целостное впечатление и полностью соответствует названинз и тематике диссертации, В главе «Материалы и методы» представлены подробные протоколы применяемых автором экспериментальных методик. Соискатель обосновывает выбор объекта исследований - ~~с~~~~~й рецессивного летального аллеля кЬ.' и особей ~о~трольны~ генотипов.
Для получения дрозофил необходимого генотипа Якимова А.О. грамотно использовала классические генетические методы постановки скрещиваний. Изучение динамики активности мутантных и дикий дрозофил соискатель проводила в сравнительных поведенческих тестах на отрицательный геотакснс. Для препарирования, окраски и анализа структур мозга и имагинальных дисков Якимова А,О. использовала гистологические и иммуногистохимичсские методы. Анализ препаратов соискатель проводила при помощи световой и лазерной сканирующей конфокальной микроскопии. Все эксперименты Якимова А.О. сопровождала строгими контролями и обязательными независимыми повторами. Объем выборок и их статистический ан щиз не дайт сомневаться в достоверности полученных результатов, Использованные мсегоды характеризуют автора как экспериментатора высокой квалификации в области цито- и нейрогенетики.
Достоинством экспериментальной части представленной к защите работы является безупречная логика, последовательность и тщательность проведения экспериментов, критичность опенки полученных результатов. Экспериментальную работу Якимова А.О. начинает с изучения влияния аллеля,яЬ на поведение самцов и самок О. т«1иппрптег. Для этого соискатель сравнивает динамику активности особей в поведенческих тестах на отрицательный геотаксис. Сложность оценки влияния этого аллеля в поведенческих тестах заключается в том, что его носители являются рецессивными леталямн и получить жизнеспособных особей можно только в сочетании с дикой копией гена. Соискатель сравнивает динамику активности особей семи генотипов и строит эксперименты так, чтобы учесть влияние дозы гена «Ьг дикого типа (в норлищьном положении на Х-хромосоме и при его транслокации на У-хромосому), мутантного аллеля ког и делсции района И».
Эти эксперименты, сопровождающиеся строгим статистическим анализом, позволили выявить /з доминантно-негативный эффект аллеля И/ у самцов и его влияние на возрастную динамику активности дрозофил обоих полов. В поисках причин аномального поведения особей-носителей аллеля Иг'" Якимова А,О, исследует морфологическую структуру мозга и уровень нейродегенерации.
Эта серия экспериментов выполнена с помощью сравпигслы/о/о а/щ//пза парафн//овь/х срезов н колфокальпых нюбражений мозга особей всех семи генотипов. В результате соискатель, приходит к выводу, что присутствие аллеля ьЬг в гетерозиготном состоянии приводит к и возникновению структурных дефектов мозга у самцов и нейродегенеративных повреждений преимущественно в сетчатке, медулле зрительных долей и антеннальном механосенсорном моторном центре. В поисках механизма, лежащего в основе этих нарушений, Якимова А.О. тщательно анализирует мозг личинок разных генотипов и обнаруживает признаки паруп/ения упорядоченности фоторецепторных аксонов у самцо/з- /7 носителей аллеля Иг, а также признаки нейродегенсрации в медулле.
Соискатель делает обоснованный вывод о том, что дефекты структуры и очаги нейродегенерации в медулле могут быть следствием элиминации нейронов, сформировавших аберрантныс синаптические связи. Последняя серия экспериментов заключалась в определении характера локализации белка БВЙ в разлива/ощемся мозге.
В результате Якимова А.О. получила уникальные данные, демонстрирующие наличие ВВК в составе специфических РНП-гранул, присутствующих, как в теле, так и в отростках нервных клеток. Более того, оказалось, что БВК выявляется также в составе нейрональных транспортных РНП-гранулах, содержащих РНК-связывающий белок дРМК1. Соискатель делает обоснованный вывод о том, что у белка БВК, как и у белка ЙРМК1, есть специфические мРНК-мишени в цитоплазме. Экспериментальный материал хорошо документирован и иллюстрирован. В главе «Обсуждение» автор оценивает свои результаты, сравнивая их с известными работами в данной области, справедливо замечая необходилюсть дальнейшего исследования функций различных изоформ белка БВК в нервной системе и поиска их м РНК-мишеней.
Раздел «Заключение» предваряет «Выводы», помогая сконцентрировать внимание читающего на важности полученных результатов. Тем не менее, диссертация Якимовой А.О. содержит ряд погрешностей, на которые хотелось бы обратить внимание автора. 1. В подписи к рис. 7 (стр. 23) имеется опечатка: сигнал "Врр" назван "Вр". 2. Иногда неправильно употребляется падеж, например, "в формирующемся глазу" (стр, 24), нужно "в формирующемся глазе"„а лучше: "в структурах глаза"; или на стр. 48: "на переднем краю" вместо "крае" (стр.) и т.д, 3.
Характеристики
Тип файла PDF
PDF-формат наиболее широко используется для просмотра любого типа файлов на любом устройстве. В него можно сохранить документ, таблицы, презентацию, текст, чертежи, вычисления, графики и всё остальное, что можно показать на экране любого устройства. Именно его лучше всего использовать для печати.
Например, если Вам нужно распечатать чертёж из автокада, Вы сохраните чертёж на флешку, но будет ли автокад в пункте печати? А если будет, то нужная версия с нужными библиотеками? Именно для этого и нужен формат PDF - в нём точно будет показано верно вне зависимости от того, в какой программе создали PDF-файл и есть ли нужная программа для его просмотра.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
