Диссертация (1141415), страница 5
Текст из файла (страница 5)
И. Сиверцев, Г. И. Самарина). Экстракт проявляет слабительное действие иувеличивает диурез у мышей (Т. К. Бороздина, А. П. Беликова) [130].Противовоспалительный эффект жидкого экстракта доказан в опытах накрысах [148,156].У больных с атоническими запорами используют спиртовой жидкийэкстракт травы горца почечуйного.
Больным с проктогенными запорами истрадающим геморроем дают настой травы горца почечуйного [8,11,107,111].В народной медицине некоторых стран используются для лечения опухолейразличной этиологии, в том числе рака желудка. Фармакологические иклинические испытания препаратов (10%-ный настой и спиртовой экстракт)показали возможность применения их в гинекологической практике при26кровотечении и для усиления родовой деятельности [6,102]. В Аргентинеприменяется для лечения грибковых инфекций кожи [153].Настой применяют в гинекологической практике при фиброматозе матки.При альгодисменорее горец оказывает некоторое болеутоляющее действие.Настой используют для спринцеваний при кольпитах [123].Выводы к главе 11.
В настоящее время имеются единичные, не систематизированные, работы,затрагивающие отдельные аспекты изучения состава флавоноидов горцапочечуйного.2. Метаболомнормативнаягорцапочечуйногодокументациясовершенствования.наизучентравунедостаточно.горцаДействующаяпочечуйноготребует27Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫОбъектами исследования являлись образцы высушенной травы горцапочечуйного, горца малого, горца шероховатого и горца щавелелистногозаготовленные летом 2012-2014 гг. в Воронежской области согласно Инструкциипо сбору сырья.Стандартизациятравыгорцапочечуйногопроводиласьсогласнотребованиям ГФ ХI [29,30].УФ–спектрыизучаемыхобъектовбылиполученыспомощьюспектрофотометров СФ – 2000-01 и Hitachi U- 1900. Спектральный диапазон – от200 до 750 нм.
Диапазон измерений спектральных коэффициентов направленногопропускания – от 1 до 100%. Предел допустимого значения абсолютнойпогрешности спектрофотометра при измерении спектральных коэффициентовнаправленного пропускания – 1,0%. Предел допустимого значения среднегоквадратичного отклонения случайной погрешности спектрофотометра приизмерении спектральных коэффициентов направленного пропускания – 0,2%.Высота щели – 0,72 мм.Характеристика УФ - канала: спектральный диапазон – от 200 до 390 нм;предел допустимого значения абсолютной погрешности установки длины волны±0,4 нм; наименьший разрешаемый спектральный интервал – 1 нм.Для идентификации БАВ использовали метод ТСХ, анализ проводили напластинках марки Sorbfil.
Используемые СО: DL-Яблочная кислота ИМП, D (-) –Фруктоза ИМП, коричная кислота Ч, кверцетин ЧДА, галловая кислота 99% PA –ACS, рутин 97%.Количественное определение БАВ проводили по методикам:-Органическиекислоты,аминокислотыинекоторыемакро-имикроэлементы определяли с помощью метода капиллярного электрофореза«Капель 105/105М» [55].- определение полисахаридов проводили по методике ГФ XI вып. 2 ФС«Листья подорожника большого» гравиметрическим методом ст. 20 [30].28- определение экстрактивных веществ в растительном сырье проводилисогласно методике ГФ XI, вып.1. стр. 295 [29] и ГФ ХIII (ОФС.1.5.3.0006.15) [26].-суммуорганическихкислотопределялититриметрически(алкалиметрическое титрование) по методике ГФ XI вып.
2 ФС «Плодышиповника» ст. 38 [30].- содержание кислоты аскорбиновой титриметрически по методике ГФ XIвып. 2 ФС «Плоды шиповника» ст. 38 [30].-суммуполифенольныхсоединений(дубильныхвеществ)–пермангонатометрическим титрованием по ОФС «Определение содержаниядубильных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственныхрастительныхпрепаратах»(ОФС.1.5.3.0008.15)[26],атакжеспектрофотометрически по методике Разаренова К.Н.
с соавторами [100].- сумму свободных аминокислот определяли также спектрофотометрическипо методике Олешко Г.И. [101].Настой и отвар травы горца почечуйного готовили согласно методикеобщей статьи ГФ XI, вып. 2, с. 147 «Настои и отвары», ОФС Настои и отвары(ОФС.1.4.1.0018.15) [26,30].Микроскопические исследования сырья проводили на микроскопе Биомед6.0 и в соответствии с требованиями общих статей ГФ XI, вып.1 «Методы анализалекарственногорастительногосырья»и«Техникамикроскопическогоимикрохимического исследования лекарственного растительного сырья» и ГФ XIII«Техника микроскопического и микрохимического исследования лекарственногорастительногосырьяилекарственныхрастительныхпрепаратов»(ОФС.1.5.3.0003.15).
Визуализацию диагностических признаков проводили спомощью цифровой фотокамеры [26,30].Жидкие экстракты (1:1) из травы горца почечуйного готовили методоммацерации и перколяции. Качество полученных жидких экстрактов оценивали посодержанию тяжелых металлов, сухому остатку, содержанию спирта пометодикам ГФ XI, вып. 2, стр.160 и вып.1, стр 26. [29,30] и ОФС «Экстракты»(ОФС.1.4.1.0021.15) [26].29Антиокислительнуюактивностьтравыипрепаратовопределялититриметрически по методике Т.В. Максимовой с соавторами [85].Анализ мембранопротекторной активности сырья и препаратов горцапочечуйногоиспользовали«Методразрешающеговоздействия»сиспользованием культуры инфузорий Paramecium caudatum [1,67,142].
В работеиспользовали культуру инфузорий, содержащую в экспоненциальной фазе неменее 2500 – 3000 особей в мл среды, а в стационарной не менее 6500 – 7500особей.Валидация методики количественного определения флавоноидов в травегорца почечуйного была проведена согласно ОФС «Валидация фармакопейныхметодов» (ОФС.1.1.0012.15) [27].Определение золы общей травы горца почечуйного проводили согласнометодике ГФ XI, 21. Общая зола (ОФС 42-0055-07) и ГФ XIII «Зола общая»(ОФС.1.2.2.2.0013.15) в муфельной печи при температуре 5000С с последующимпрокаливанием до постоянной массы [26,29].Количественное определение кальция и магния в извлечении из сырьяпроводили комплексонометрическим титрованием по методике [115].Количественноеопределениеэлементногосоставапроводилипометодикам:- Содержание Fe, Mn, Zn, Co, Ni, Cr, Cu определяли с помощью атомноабсорбционной спектроскопии по методикам, указанным в ГОСТ 26928, ГОСТ Р51637, ГОСТ 30178, ГОСТ 28414.- Содержание P титриметрическим методом по МУ 01-19/47 11-92.- Содержание Ca, Na, K, Mg с помощью капиллярного электрофореза поГОСТ 26931, М 04-65-2010.- Содержание макро – и микроэлементов в траве горца почечуйного и почвы сместа произрастания определяли с помощью метода хромато-масс-спектроскопиис индуктивно связанной плазмой на приборе "ELAN-DRC".
Для контроляправильности определения использовали метод добавок. Рабочие стандартныерастворыдляэтогоготовятпутемсмешиваниянесколькихопорных30многоэлементных стандартных растворов для масс-спектрометрии, производстваPerkin-Elmerилианалогичные,содержащиеразныегруппыэлементов.Используемые референс-стандарты:Для анализа почв: почва дерновоподзолистая ГСО 5360-90, ООКО-153почва дерновоподзолистая супесчаная ГСО 2498-83-2500-83, СДПС-1, СДПС-2,СДПС-3.Для анализа проб растительного происхождения:ГСО состава стравосмеси (Тр-1), ГСО 8922-2007ГСО состава элодеи канадской (ЗК-1), ГСО 8921-2007ГСО состава листа березы (ЛБ-1), ГСО 8923-2007- Содержание тяжелых металлов (свинец, кадмий, ртуть, мышьяк) определялиследующими методами: атомно-абсорбционная спектрометрия на приборе «ААСКвант-2А», Анализатор ртути «Юлия», КФК 3-01-«ЗОМС» для каждого элементасоответственно.-Пестициды (ДДТ и его метаболиты, ГХЦГ (альфа, бета, гамма-изомеры)методом газовой хроматографии на приборе «Цвет 500М», радионуклиды (Цезий137, Стронций-90) на комплексном универсальным спектрометре УСК «ГаммаПлюс» с использованием программного обеспечения «Прогресс».Для ГХМС- анализа использовали хроматограф газовый Agilent 7890B сМС-интерфейсом Agilent 5977A MSD.
Ионизация - электронный удар, энергияионизации70эВ,сканирование30-550а.е.м.(Да).Газ-носитель - гелий (1,0 мл/мин); термостат 50°С - 3 минуты, 50-190°С10°/мин, 190-25020°/мин,300°С10мин.Инжекция - 1 мкл, деление потока 80:1. Колонка неполярная HP-5MS UI 30м x0.25мм, 0.25мкм.Результаты, полученные в процессе исследования обрабатывали методамистатистической обработки, указанными в ГФ XIII Статистическая обработкарезультатовхимическогоэкспериментаиспользовали программу «Statistica - 7.0».(ОФС.1.1.0013.15)[27].Также31ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬГлава 3. Изучение характеристик подлинности лекарственногорастительного сырьяВ связи с современными требованиями в НД должна присутствоватьхарактеристика внешнего вида и микроскопии трех категорий сырья: цельного,измельченного и порошкованного.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
