Диссертация (1141415), страница 16
Текст из файла (страница 16)
При изготовлении водных извлечений для расчетанеобходимогоколичестваводытребуетсяучитыватькоэффициентводопоглощения сырья (Квп) [58]. Квп это показатель, определяющий количествоводы в миллилитрах, удерживаемое 1 г лекарственного растительного сырьяпосле его отжатия в перфорированном стакане инфундирного аппарата [26].Для травы горца почечуйного данный показатель ранее не был установлен.В таких случаях НД рекомендует пользоваться Квп, общим для даннойморфологической группы сырья (Квп для травы равен 2 мл/г). Однако, такойподход следует считать не рациональным, так как Квп имеет индивидуальноезначение для каждого вида сырья.Для обоснования выбора режима настаивания водные извлечения готовилив соотношении 1:10 с использованием двух режимов получения настоя и отвара.Из травы, содержащей флавоноиды готовят настои, но поскольку в траве горцапочечуйного содержится большое количество дубильных веществ (глава 4.4.3)было целесообразно изучить возможность изготовления из сырья отвара.
Впервом случае растительное сырье нагревали 15 минут на кипящей водяной банеи настаивали при комнатной температуре 45 минут, во втором случае нагревали30 минут, настаивали при комнатной температуре 15 минут [26,116].110Коэффициент водопоглощения для сырья с размером частиц 7 мм составил7,5.7.2. Анализ водных извлечений из травы горца почечуйногоИз травы горца почечуйного были изготовлены по фармакопейной методикенастой и отвар.Водные извлечения готовились с учетом коэффициента водопоглощения.Описание полученных лекарственных форм представлено в табл. 43.В соответствии с требованиями ОФС «Настои и отвары» ГФ XIII была данахарактеристика водных извлечений и определены показатели качества (табл.43).Хроматографический анализ показал, что в настой переходят все группыБАВ, содержащихся в сырье (глава 4.2.): флавоноиды, сапонины, дубильныевещества, органические кислоты, оксикоричные кислоты, кислота аскорбиновая,аминокислоты, полисахариды.Таблица 43.
Характеристика водных извлечений из травы горца почечуйного (n =5; р = 0,95)РежимнастаиванияНастойОтварОрганолептическиехарактеристики, рНслегкаопалесцирующаямутная жидкостькоричневатого цветасо слабым запахомгорьковатого вкуса,рН 5,98слегкаопалесцирующаямутная жидкостькоричневатого цветасо слабым запахомгорьковатого вкуса,рН 5,98Сухойостаток,%Содержание, %СуммыСуммыдубильныхфлавоноидоввеществ1,54±0,060,54±0,030,114±0,0051,55±0,060,42±0,020,037±0,002111Согласно полученным данным из травы горца почечуйного целесообразноготовить настой, так как в этом случае достигается наибольший выход БАВ.Для определения содержания в водных извлечениях суммы флавоноидов идубильных веществ были адаптированы методики определения этих групп БАВ втраве горца почечуйного [35,83].Количественное определение дубильных веществ:В коническую колбу вместимостью 750 – 1000 мл отбирали 25 мл настоя,прибавляли 500 мл воды, 25 мл индигосульфокислоты и титровали припостоянном перемешивании раствором калия перманганата (0,02 моль/л) дозолотисто-желтого окрашивания.Параллельно проводили контрольный опыт.
К 25 мл индигосульфокислотыприбавляли 525 мл воды и титровали калия перманганатом (0,02 моль/л) дозолотисто-желтого окрашивания.Количественное определение флавоноидов:1 мл настоя, переносили в мерную колбу на 25 мл, добавляли 1 мл 2%спиртового раствора AlCl3, доводили 96% этиловым спиртом до метки иоставляли для созревания окраски на 40 мин.Раствор сравнения готовилиследующим образом: 1 мл извлечения доводили 96% этиловым спиртом в колбена 25 мл до метки. По истечении 40 мин проводили измерение оптическойплотности на спектрофотометре Hitachi U 1900 при длине волны 412±2 нм. Вкачестве сравнения использовали 0,05% раствор стандартного образца ГСОрутина.7.3.
Получение жидкого экстракта (1:1) травы горца почечуйногоТрава горца почечуйного ранее использована для получения жидкогоэкстракта (разрешен к выпуску с 1952 г.). В настоящее время эта лекарственнаяформагорцапочечуйногоневыпускаетсяотечественнымифарм.производителями, поэтому для дальнейших исследований жидкий экстракт былполучен в лабораторных условиях и проведена его стандартизация в соответствии112с требованиями ГФ XI по содержанию спирта, сухому остатку и содержаниютяжелых металлов [26,29].Жидкиеэкстракты(1:1)травыгорцапочечуйногоготовилисиспользованием наиболее распространенных методов их получения, перколяции иремацерации [91,106]. Согласно ранее проведенным исследованиям [54,97],флавоноиды наиболее полно извлекаются спиртом этиловым 70%, поэтому онбыл выбран в качестве в экстрагента при получении экстрактов. Траву горцапочечуйного измельчали до размера частиц, проходящих сквозь сито с диаметромотверстий 1 мм.
Предварительно, для получения экстракта методом перколяции(рис. 25.) сырье, замачивали экстрагентом в плотно закрытой емкости (6 часов) инастаивали в перколяторе 24 часа, затем экстрагировали непрерывным токомэкстрагента.При использовании метода дробной мацерации (ремацерации) (рис. 26.)экстрагент делили на 3 части и настаивали последовательно в каждой части по 24часа [91,106] (табл. 44.).При изготовлении жидких экстрактов для наиболее полного извлечениядействующих веществ важно правильно рассчитать объем экстрагента, чтовозможно с использованием коэффициента спиртопоглощения (Ксп) [124]. Кспрассчитывали как разницу между заданным и полученным объемом извлеченияпо отношению к массе сырья, взятого для приготовления экстракта.
Ксп длятравы горца почечуйного = 1.Таблица 44. Характеристика жидких экстрактов 1:1 травы горца почечуйногоПоказательПрозрачностьЦветЗапахВкусСодержание спиртаСухой остатокЖидкий экстрактполученный методомперколяцииПрозрачная жидкостьЗеленовато коричневыйСпецифическийГорьковатый66%1,26%Жидкий экстрактполученный методомремацерацииПрозрачная жидкостьЗеленовато коричневыйСпецифическийГорьковатый67%1,55%113Тяжелые металлыСодержаниефлавоноидов, %Выдерживают испытания на тяжелые металлы0,305±0,015%0,346±0,016%Хроматографический анализ жидкого экстракта травы горца почечуйногона содержание БАВ показал наличие следующих групп БАВ, присутствиекоторых было показано в траве горца почечуйного (см.п. 4.2): флавоноидов,сапонинов, дубильных веществ, органических кислот и оксикоричных кислот,кислоты аскорбиновой, аминокислот, полисахаридов.Одним из главных показателей качества лекарственных препаратоврастительного происхождения является количественная оценка содержания в нихдействующих веществ.
При этом необходимо учитывать принцип сквознойстандартизации в ряду растительное сырье : лекарственный препарат.В связи с этим дана количественная оценка содержания в изучаемомжидком экстракте травы горца почечуйного суммы флавоноидов в пересчете нарутин по модифицированной спектрофотометрической методике [54] (табл. 44.).Проведенные исследования показали возможность применения обоихметодовполученияжидкогоэкстрактаизтравыгорцапочечуйного(экстрагируемость действующих соединений примерно одинаковая), однако, прииспользовании метода ремацерации в жидкий экстракт переходит большееколичество БАВ наблюдается большое значение при определении сухого остатка(табл. 44.) [90].Анализ ЛФ на количественного содержание БАВ проводили по методикаманалогичным определению БАВ в сырье (глава 4.4.).Таблица 45. Содержание БАВ в настое и жидком экстракте (1:1)БАВФлавоноиды(спектрофотометрия)Полисахариды (гравиметрия)Свободныеаминокислоты(спектрофотометрия)Содержание всырьеСодержание внастоеСодержание вжидком экстракте1,260±0,014%0,114±0,005%0,346±0,016%16,950±0,850%1,100±0,030%0,700±0,030%0,610±0,030%0,200±0,006%0,380±0,019%114Сумма дубильных веществ(пермангонатометрическоетитрование)Органические кислоты(алкалиметрическоетитрование)Аскорбиновая кислота(титриметрия)Оксикоричные кислоты(спектрофотометрия)14,600±0,800%0,540±0,030%2,800±0,112%0,603±0,004%0,130±0,004%0,450±0,018%0,034±4,6*10-4%0,015±4,5*10-4%0,007±2*10-4%1,200±0,014%0,050±0,001%0,310±0,009%Рис.25.
Технологическая схема производства жидкого экстракта методомперколяции115Рис. 26. Технологическая схема производства жидкого экстракта методомремацерацииВыводы к главе 71. Из травы горца почечуйного был получен настой, дана его характеристика иоценка качества. В настой из сырья переходят все группы БАВ.2. В лабораторных условиях изготовлен жидкий экстракт травы горцапочечуйного, дана его характеристика и определены показатели качества.Показано, что использование метода ремацерации позволяет получитьжидкий экстракт с более высоким содержанием БАВ.116Глава 8.
Изучение фармакологической активности травы горца почечуйногоНа основании известных литературных данных о широком спектрефармакологической активности флавоноидов [155] и растительного сырья –источника их получения, было высказано предположение о наличии у горцапочечуйногоантиоксидантнойактивностиимембраностабилизирующегодействия. Для проверки высказанной гипотезы было проведено изучение сырья ипрепаратов (настоя и жидкого экстракта) горца почечуйного8.1. Изучение антиоксидантной активности травы горца почечуйногоОдной из самых перспективных групп БАВ, обладающих антиоксидантнойактивностью, являются растительные фенольные соединения, к которымотносятся флавоноиды.
Интерес к растительным антиоксидантам фенольнойприроды, как факторам, повышающим устойчивость к неблагоприятнымвоздействиям окружающей среды, связан с их адаптогенным действием[3,136,149,150].На данном этапе исследовалась возможность использования горцапочечуйного как источника веществ, обладающих антиоксидантной активностью(АОА).ОпределениеантиоксидантнойактивностипроводилипометодикеТ.В.Максимовой с соавторами [47,67,85]. Методика позволяет определитьсодержание в растительных объектах веществ, обладающих антиоксидантнойактивностью. В отличии от оригинальной методики, где пересчет активностипроводился на кверцетин, в нашей работе в качестве стандартного вещества,обладающего АОА был выбран рутин, присутствие которого в сырье былопоказано ранее.В колбу для титрования объемом 50 мл помещали 8 мл кипяченной иохлажденной дистиллированной воды, 1 мл 20% раствора кислоты серной, 1 мл1170,05 М (f=1/5) раствора калия перманоната и перемешивали.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
