Автореферат (1141403), страница 5
Текст из файла (страница 5)
Параметры хроматографической системы и метода анализа были следующие: хроматограф Agilent 1260 (AgilentTechnologies, США), НФ – колонка Poroshell 120 EC-C18, предколонка Poroshell 120 FastGuard EC-C18, ПФ – ацетонитрил: 20 Ммоль/л раствор ацетата аммония в воде деионизированной (9:1), элюирование – изократическое (скорость потока 0,8 мл/мин), объём пробы,вводимой в хроматограф 20 мкл, tколонки= 35°С, время анализа – 20 мин, время удерживаниягалантамина – около 6,5 мин, время удерживания ликорина – около 17,5 мин, ПО –ChemStation (ver. B.04.03 [54]), Agilent Technologies, США, УФ-детектирование (λ = 290 нм).Аналитическая область данной методики составляет 2,5-50,0 мкг/мл для галантаминаи ликорина.
Относительная ошибка единичного определения с 95 % доверительнойвероятностью составляет от 1,47 до 4,85%, не превышает 5 %.Методикауспешнопрошлавалидационныеиспытанияпопараметрам:специфичность, линейность, предел обнаружения и предел количественного определения,правильность, повторяемость, точность, стабильность, устойчивость и может бытьиспользована для количественного определения АА в ГомЛРС и НГМ.Разработка показателей качества ГомЛРС и НГМ G.woronowii и G.nivalisВходеисследованийпостандартизациинамибылопроанализировано5 экспериментальных серий НГМ и ГомЛРС G.woronowii и G.nivalis в 5 повторностях попоказателям: влажность, органические и минеральные примеси, плотность, сухой остаток,АА.
Нормы числовых показателей, полученных в результате стандартизации ГомЛРС и НГМG.woronowii и G.nivalis представлены в таб. 5. Полученные данные включены в проекты НДна ГомЛРС и НГМ G.woronowii и G.nivalis.19Таблица 5Нормы числовых показателей ГомЛРС и НГМ двух видов подснежниковПоказательВлажностьОрганическиепримесиМинеральныепримесиПлотностьГомЛРСG.woronowiiG.nivalisИнтервалНормаИнтервалНорма76,12Не менее81,41Не менее80,47%75%85,72%80%0,18-0,37%Не более0,17-0,42%Не более0,5%0,5%0,51-0,88%Не более0,54-0,79%Не более1,0%1,0%––Сухой остатокАмариллисовыеалкалоиды–0,05-0,08%НГМG.woronowiiG.nivalisИнтервалНормаИнтервалНорма––0,020,045%–––0,913-0,924–Не менее0,05%–0,9070,927Не менее2,0%Не менее0,01%2,12-2,21%Не менее0,02%0,01-0,03%0,9050,9112,012,09%0,0040,008%0,8980,918Не менее1,5%Не менее0,004%ВЫВОДЫ1.
Выполнено информационно-аналитическое изучение литературных источников,необходимых для выработки современных требований к качеству ГомЛРС и НГМ двухвидов подснежников. Показана актуальность создания подходов к стандартизации ГомЛРС иНГМ G. woronowii и G nivalis, ориентированных на идентификацию и количественноеопределение маркерных БАС с применением современных инструментальных физикохимических методов анализа, главный из которых ВЭЖХ с УФ- и МС- типомдетектирования.2. В сравнительном аспекте изучено морфолого-анатомическое строение свежихцелых растений (листьев, цветков, цветоносов, луковиц, корней) G. woronowii и G nivalis.Установлены диагностические значимые признаки (наличие воскового налета на листьях,строение устьичного аппарата, рафид оксалата кальция, клеток эпидермиса, строениелуковиц, крахмальных зерен, метрологическая характеристика). Комплекс установленныхпризнаков позволяет проводить видовую идентификацию ГомЛРС.3.
С применением современных инструментальных физико-химических методов (ГХМС, ВЭЖХ-УФ, УЭЖХ-УФ-МС, ААС, РФА и др.) изучен качественный состав и определеносодержание основных БАС ГомЛРС и НГМ G. woronowii и G nivalis: АА (галантаминового,тацеттинового,ликоринового,гемантаминовоготипов),флавоноидов(гликозидовкверцетина, кемпферола и изорамнетина), органических (яблочной, янтарной, щавелевой) игидроксикоричных(нео-,крипто-,хлорогеновой)кислот,аминокислот,углеводов(свободных и связанных), установлен элементный состав.4. Разработана и валидирована (по параметрам – специфичность, линейность, пределобнаружения и предел количественного определения, правильность, повторяемость,точность, стабильность и устойчивость) ВЭЖХ-УФ методика определения содержания АА в20ГомЛРС и НГМ G.
woronowii и G nivalis в пересчете на галантамин или ликорин, котораявключена в проекты НД.5. С использованием фармакопейных методик определены показатели качестваГомЛРС (влажность, органическая и минеральная примеси) и НГМ (плотность, сухойостаток) G. woronowii и G. nivalis, установлены их нормы, разработаны характеристикиподлинности (внешние и микроскопические признаки, качественные реакции, ТСХ).6. Исследованы цитотоксические эффекты НГМ подснежников Воронова ибелоснежного на культуре клеток HeLa и Fet MSC.
Установлено, что наиболее высокаяцитотоксическая активность характерна для НГМ и гомеопатических разведений D1, D2, С1.7. В соответствии с современными требованиями разработано и оформлено 4 проектанормативной документации: «Подснежник Воронова растения целые свежие – Galanthusworonowii planta tota recens», «Galanthus woronowii, Galanthus – Настойка гомеопатическаяматричная», «Подснежник белоснежный растения целые свежие – Galanthus nivalis planta totarecens», «Galanthus nivalis, Galanthus – Настойка гомеопатическая матричная».Практическиерекомендации.РезультатыисследованиякомплексаБАСподснежников представляют интерес для научных работников, занимающихся изучениемхимического состава растительного сырья, а также разработкой и внедрением в практическоездравоохранение инновационных фитопрепаратов и нормативной документации.
Разработанные методики целесообразно использовать в контрольно-аналитических лабораторияхдля идентификации и количественного определения БАС в ГомЛРС и НГМ подснежников.Перспективы дальнейшей разработки темы. Данные исследования могут служитьосновой для дальнейшего совершенствования методов оценки качества сырья подснежникови препаратов на их основе. В будущем актуальным будет проведение доклинических иклинических исследований с целью выявления эффективности и безопасности лекарственных форм на основе подснежников.СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ1.Боков, Д.О. Текущее состояние и дальнейшие перспективы фармакогностических исследованийпредставителей подкласса Лилииды (Liliidae) / Д.О. Боков, И.А. Самылина // Инновации в медицине ифармации 2014: мат.
дистанционной науч.-практ. конф. студ. и мол. уч. Минск: БГМУ, 2014. – С. 503-507.2.Боков, Д.О. Использование современных физико-химических методов анализа (ВЭЖХ/МС/МС,спектрофотометрии) для идентификации и определения содержания биологически активных соединений влекарственном растительном сырье и препаратах на его основе / Д.О. Боков, И.А.
Самылина // Сб. мат.Междунар. науч.-практ. конф. «Перспективы внедрения инновационных технологий в фармации».Орехово-Зуево: МГОГИ, 2014. – С.27-36.3.Боков,Д.О.Изучение,стандартизацияпрепаратовнаосновепредставителейAmaryllidaceae,перспективных для фармакологической регуляции нейродегенеративных заболеваний и мигрени / Д.О.21Боков, И.А. Самылина// Мат. финала общероссийского науч.-практ. мероприятия «Эстафета вузовскойнауки-2014» III молодежный медицинский форум «MedWAYS – перспективные научные направления2014». – М.: Изд-во Первого МГМУ им. И.М. Сеченова, 2014.
– С. 102.4.Боков, Д.О. Современные аспекты применения в гомеопатии некоторых лекарственных растений (сем.Amaryllidaceae, Trilliaceae) средней полосы России при лечении неврологических расстройств / Д.О. Боков,И.А. Самылина // Гомеопатический ежегодник. Сб. мат. XXV Московской междунар. гомеопатической конф.«Развитие гомеопатического метода в современной медицине».– М.: МГЦ, 2015. – С. 180-183.5.Боков, Д.О.
Алкалоиды двух видов подснежника: химический состав, биосинтез и фармакологическиесвойства / Д.О. Боков, И.А. Самылина // Медицинский альманах. – 2015. – № 2 (37). – С. 125-130.6.Боков, Д.О. Химический состав и применение в медицине подснежника / Д.О. Боков, И.А. Самылина //Мат. III науч.-практ. конф. «Современные аспекты использования растительного сырья и сырья природногопроисхождения.
– Сеченовский вестник. – 2015. – №1 (19). – С. 78-79.7.Боков, Д.О. Методические подходы к оценке безопасности гомеопатических лекарственных средств наоснове лекарственного растительного сырья подснежников / Д.О. Боков, И.А. Самылина // Мат. VI науч.практ. конф. «Актуальные проблемы оценки безопасности лекарственных средств». – Сеченовскийвестник. – 2015. – № 2(20).
– С. 88-89.8.Bokov, D.O. Homeopathic remedies of snowdrops: key aspects for standardization procedures / D.O. Bokov, I.A.Samylina // Proceedings of the V International scientific-practical conference “Fundamental science andtechnology - promising developments”.
North Charleston, USA, 2015. – No. 2. – PP. 184-186.9.Боков, Д.О. Спектрофотометрия в анализе двух видов подснежника (Galanthus L.) / Д.О. Боков, И.А.Самылина, Д.М. Попов // Бутлеровские сообщения. – 2015. – Т. 42. – № 5. – С. 71-77.10. Боков, Д.О., Самылина И.А. Характеристика представителей рода Galanthus L., как источниковгомеопатических препаратов / Д.О. Боков, И.А. Самылина // Сб. мат. конгресса (тезисы докладов) XXIIРоссийский Национальный Конгресс «Человек и лекарство», Москва. – 2015. – С. 180.11. Боков, Д.О. Компонентный состав биологически активных соединений и использование гомеопатическихпрепаратов подснежника / Д.О.
Боков, И.А. Самылина // Клинические и теоретические аспекты современной медицины: мат. VI Междунар. науч. конф. «SCIENCE4HEALTH 2015». – Москва: РУДН, 2015. – С. 66.12. Боков, Д.О. К вопросу о стандартизации гомеопатических лекарственных средств двух видов подснежника/ Д.О. Боков // Сб.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
