Диссертация (1141348), страница 2
Текст из файла (страница 2)
ВкачествесубстратовдляCYP1A2иCYP2C9подобраныширокораспространённые лекарственные вещества c низким риском возникновениянежелательных лекарственных явлений в принимаемых дозировках (кофеин илозартан, соответственно), в то время как для изоферментов CYP3A4 иCYP2D6подобраныэндогенныесубстраты(кортизолипинолин,соответственно) с целью снижения инвазивности метода.Разработаны и валидированы методики количественного определенияпри совместном присутствии в плазме крови и моче кофеина, параксантина,лозартана, E-3174, кортизола, 6-β-гидроксикортизола, пинолина и 6-гидрокси1,2,3,4,-тетрагидро-β-карболинаметодомВЭЖХ-МС/МСсцельюфенотипирования основных ферментов метаболизма.Теоретическая и практическая значимостьРазработанытеоретическиеподходыкиспользованиюметодиксовместного количественного определения экзогенных и эндогенных веществс целью определения активности основных изоферментов CYP, участвующихв метаболизме лекарственных средств (CYP1A2, CYP3A4, CYP2C9, CYP2D6).Полученные результаты и условия пробоподготовки могут бытьрекомендованы для решения задач, связанных с определением активностицитохрома Р450 на примере других эндогенных и экзогенных субстратов егоосновных изоферементов в различных комбинациях.Результаты диссертационного исследования представляют практическуюзначимостьклиническихдляспециалистовфармакологов,фармакокинетическихосуществляющихлабораторийподбориоптимальнойфармакотерапии при использовании препаратов с узким терапевтическимдиапазоном действия, а также при лечении пациентов с полипрагмазией либозаболеваниями, влияющими на активность системы метаболизма.7Основные положения, выносимые на защиту:– Разработанные методики проподготовки образцов биожидкости(плазмыкровиимочи),позволяющиеизолироватьисследуемыелекарственные вещества и эндогенные соединения (кофеин, параксантин,лозартан, E-3174, кортизол, 6-β-гидроксикортизол, пинолин и 6-гидрокси-1, 2,3, 4,-тетрагидро-β-карболин) при совместном присутствии.– Разработанные аналитические методики совместного количественногоопределения аналитов в плазме крови и моче методом ВЭЖХ-МС/МС.–Результатывалидацииразработанныханалитическихметодиксовместного количественного определения аналитов в плазме крови и мочеметодомВЭЖХ-МС/МСпоосновнымпараметрам:селективность,линейность, эффект матрицы, степень извлечения, точность и прецизионность,предел количественного определения, перенос пробы, стабильность.– Результаты определения активности изоферментов CYP1A2, CYP3A4,CYP2C9, CYP2D6 в различных исследованиях с помощью разработанныхметодик пробоподготовки и количественного определения.Методология и методы исследованияМетодология исследования заключалась в изучении литературныхданных по теме исследования, оценке актуальности темы и степени ееразработанности, постановке соответствующих целей и задач исследования поразработке методик совместного определения лекарственных веществ –субстратов-маркеров различных изоферментов цитохрома P450 методом LCMS/MS, обработке полученных данных, формулировании выводов на основерезультатов и определении практической значимости результатов работы.Валидация методик проводилась согласно «Руководства по экспертизелекарственных средств.
Том 1» под редакцией А.Н. Миронова, 2013 г., а такжеруководств FDA и EMA. Статистическая обработка полученных результатовизмерения проводилась с использованием программ IBM SPSS Statistics23.0.0.0 и Microsoft Excel 2016 методом описательной статистики и T-критерия8для независимых выборок с целью выявления различий между среднимизначениями.Достоверность научных положений и выводовПервичныеданные,полученныеврезультатепроведенногоисследования с использованием ВЭЖХ-МС/МС, являются достоверными.Разработанныеметодикиудовлетворяюткритериямприемлемостивалидационных параметров. Использованное оборудование зарегестрировано вРеестре средств измерений и имеет соответствующие свидетельства о поверке.Апробация результатов исследованияОсновные положения работы и результаты исследования доложены нанаучном совете НИИ Фармации «Достижения и перспективы молодых ученыхНИИ Фармации» (Москва, 2014), на Конгрессе Европейской академииаллергологии и клинической иммунологии (EAACI) (Барселона, 2015).Апробация диссертации состоялась «31» августа 2016 г.
на заседании кафедрыфармацевтической и токсикологической химии им. А.П. Арзамасцевафармацевтического факультета Первого МГМУ имени И.М. Сеченова.Личный вклад автораАвтору принадлежит ведущая роль в проведении экспериментальныхисследований, анализе и обобщении полученных результатов. Автором личнопроведена разработка, валидация методик совместного количественногоопределения исследуемых аналитов методом ВЭЖХ-МС/МС, статистическаяобработка результатов исследования.
Вклад автора является определяющим навсех этапах исследования: от постановки задач, их экспериментально –теоретическойреализациидообсуждениярезультатоввнаучныхпубликациях, докладах и внедрения в практику.Внедрение результатов исследованияРазработанные в результате проведенной работы методики внедрены влабораторнуюпрактикудлялабораторииклиническойопределенияфармакологииактивностиФГБУметаболизма«ГНЦвИнститут9Иммунологии» ФМБА России и отдела клинической фармакокинетики Центраклинической фармакологии ФГБУ НЦЭСМП Минздрава России.Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтическойнаукиДиссертационная работа выполнена в соответствии с тематикой ипланом научных исследований ФГАОУ ВО Первый МГМУ им.
И.М. СеченоваМинздраваРоссии(Сеченовский«СовершенствованиепоследипломногоУниверситет),образовательныхобразованиякомплекснаятехнологиймедицинскогоитема:додипломногоифармацевтическогообразования». Номер государственной регистрации 01.2.011.68237.Соответствие диссертации паспорту научной специальностиНаучныеспециальностиположения14.04.02диссертации«Фармацевтическаясоответствуютхимия,формулефармакогнозия».Результаты проведенного исследования соответствуют области исследованияспециальности,конкретнопункту4паспортаспециальности«Фармацевтическая химия, фармакогнозия».Объем и структура диссертацииДиссертация изложена на 118 страницах машинописного текста, состоитиз введения, обзора литературы, экспериментальной части, 5 общих выводов исписка использованных источников. Диссертация включает 13 таблиц и 14рисунков.
Библиографический список содержит 122 источника, из них 112 наиностранных языках.ПубликацииПо материалам диссертации опубликовано 6 работ, из них 3 – визданиях из Перечня ВАК, 2 – в издании, включенном в базу Scopus и Web ofScience.10ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ1.1.Характеристика системы биотрансформации ксенобиотиковЕжедневночеловеческийорганизмподвергаетсявоздействиючужеродных химических соединений, называемых ксенобиотиками.
Онипроникают в организм через желудочно-кишечный тракт, кожу, легкие всоставе вдыхаемого воздуха, пищи, напитков и лекарственных средств.Организм реагирует на лекарственные вещества так же, как и на любой другойксенобиотик. Некоторые гидрофильные лекарственные вещества выводятсяпочками в неизмененном виде. Лекарственные вещества, обладающиебольшей липофильностью, вступают в реакцию с различными ферментами,трансформирующими их химическую структуру. Соответственно, метаболизм(биотрансформация) – широкое понятие, собирающее в себя химическиепревращения, происходящие с химическими веществами в организме [1].Результатомпроцессовметаболизмалекарственныхвеществявляетсяснижение липофильности вещества, повышение его гидрофильности, а такжеизменение фармакологической активности лекарственного вещества.Метаболизм большинства лекарственных веществ осуществляется впечени, однако данный процесс может проходить и в других органах:желудочно-кишечный тракт, легкие, почки и т.д.
В целом, все химическиепроцессы биотрансформации химических веществ разделяют на две группы,известные как фазы метаболизма I и II:11• Реакции I фазы (несинтетические). В процессе этих реакций,лекарственные вещества образуют метаболиты с большей гидрофильностью,чем субстрат, за счет образования активных функциональных групп, чтоповышает способность молекулы к конъюгации. Одними из основных реакцийI фазы являются реакции окисления, в частности – реакции присоединениягидроксильного радикала (-ОН).
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
