Автореферат (1141344), страница 4
Текст из файла (страница 4)
Каждый раствор измеряли на спектрофотометре 3 раза. Исследование проводили в двух последовательностях, с участием двух разных аналитиков.Для полученных значений анти-Xa активности концентраций были рассчитаны величины стандартного отклонения (S.D. inter-day: 0,0103; 0,0072; 0,0035, intra-day:0,0192; 0,0066; 0,0041), относительного стандартного отклонения (RSD, %, interday: 5,2452; 7,6714; 7,5668; intra-day: 9,3321; 7,0561; 9,4779) и относительной погрешности (ε, % inter-day:-7,7044; 0,0000; 10,4466; intra-day: -2,9088; -0,7447;3,2695). Для полученных значений анти-IIa активности концентраций были рассчитаны величины стандартного отклонения (S.D.
inter-day: 0,0024; 0,0018; 0,0008,intra-day: 0,0023; 0,0014; 0,0007), относительного стандартного отклонения (RSD,% inter-day: 6,0659; 9,9137; 9,2979; intra-day: 5,8438; 7,5445; 7,8190) и относительной погрешности (ε, % inter-day: -3,4146; -0,3623; 2,4390; intra-day: -2,4390; 0,4529; 2,2358).Определение анти-Ха и анти-IIа активностей НМГ in vivo. Проводили анализ 3 образцов активности стандартных растворов эноксапарина натрия 0,00МЕ/мл, 0,48 МЕ/мл, 0,93 МЕ/мл для определения анти-Ха и 0,150 МЕ/мл, 0,300МЕ/мл, 0,600 МЕ/мл для определения анти-IIа активности.
Каждый раствор измеряли на спектрофотометре 3 раза. Исследование проводили в двух последовательностях, с участием двух разных аналитиков. Для полученных значений анти-18Xa активности концентраций были рассчитаны величины стандартного отклонения(S.D.
inter-day: 0,00; 0,04; 0,07, intra-day: 0,00; 0,05; 0,06), относительного стандартного отклонения (RSD, % inter-day: 0,00; 7,21; 7,24; intra-day: 0,00; 9,40; 6,07) иотносительной погрешности (ε, % inter-day0,00; 4,17; 2,87; intra-day:0,00; 2,08;2,15). Для полученных значений анти-IIa активности концентраций были рассчитаны величины стандартного отклонения (S.D.
inter-day: 0,015; 0,011; 0,015, intraday: 0,014; 0,009; 0,018), относительного стандартного отклонения (RSD, % interday: 9,962; 3,448; 2,500; intra-day: 9,428; 2,977; 2,920) и относительной погрешности (ε, % inter-day: 2,222; 1,556; 0,278; intra-day: 0,000; 1,250; 0,528). Полученныевеличины относительного стандартного отклонения (прецизионность) и относительной погрешности (правильность) соответствовали нормам (не более 10,00 %).На основании анализа линейности, правильности и прецизионности были установлены аналитические области разработанных методик (приведены на калибровочных графиках). Таким образом, по результатам валидации методик определенияанти-Ха и анти-IIа активности эноксапарина натрия в препаратах и плазме кровикроликов было показано, что они разработанные методики пригодны для указанных аналитических задач.Результаты и их обсуждение сравнительного исследования препаратабиоаналога эноксапарина натрия в условиях in vitroВ ходе количественного определения анти-Ха и анти-IIа активности препаратов эноксапарина натрия по разработанной методике были получены величины анти-Ха и анти-IIа активности для исследуемого и референтного препаратов, соответствующие нормам отношения активностей по USP (Табл.
8). Кроме того, было показано, что при анализе различных серий исследуемого и референтного препаратовданные соотношения не меняется от серии к серии. Таким образом, было установлено, что исследуемый разрабатываемый препарат «Эноксапарин натрия» обладаетмежсерийной однородностью по величинам анти-Ха и анти-IIa активности in vitro, атакже их соотношению (RSD не более 5 %).Таблица 8Результаты определения анти-Ха и анти-IIа активности исследуемых препаратовЭноксапарин натрия, активностьКлексан®, активностьсерия №анти-Хаанти-IIасоотношениеанти-Хаанти-IIасоотношение110 4802 8403,6910 2642 6683,851923456Ср.знач.RSD,%10 07710 5279 83410 66510 31910 3173,012 5902 6802 6602 7882 4932 6754,753,893,933,703,834,143,864,3210 29710 67210 84310 63410 22510 4892,482 5652 7592 7352 7602 6312 6862,944,013,873,963,853,893,911,68Результаты и их обсуждение сравнительного исследования препаратабиоаналога эноксапарина натрия в условиях in vivoРезультаты биологического этапа исследования.
В ходе проведения эксперимента по исследованию фармакокинетики образцов исследуемого и референтного препаратов эноксапарин натрия, животные всех экспериментальных групп –«опыт 1» и «опыт 2» – не проявили никакого заметного различия в показателях состояния: поведение, внешний вид, физиологические функции. Показатели массытела и температуры тела подопытных кроликов также не выявили значимого различия между группами.Анализ фармакокинетических параметров для определения активностейанти-Ха и анти-IIа.
Статистический анализ результатов определения активностейэноксапарина натрия в плазме крови и параметров фармакокинетики и биодоступности заключался в расчете среднеарифметических (Mean) и среднегеометрических (GMean) значений, стандартного отклонения (SD), коэффициента вариации(CV, %), медианы (Median) и их интервальной оценки (Доверит, L-90%, U-90%).Описательную статистику, расчет фармакокинетических параметров и дисперсионный анализ проводили при помощи пакета MS Excel с расширением для проведения фармакокинетического анализа Boomer. Интервальные значения фармакокинетических параметров рассчитывали по формулам: L-90 = Mean - ΔX; U-90 =Mean + ΔX; где ΔX – доверительный интервал. Коэффициенты вариации рассчитывали по формуле: CV = (SD * 100)/Mean.Для расчета основных фармакокинетических параметров в используемомпрограммном обеспечении были применены следующие расчетные формулы:, где20AUC0-t - площадь под кривой «концентрация – время» в пределах от нуля домомента отбора последней пробы крови (12 ч), Ci – значение концентрации эноксапарина натрия в момент времени t, t – время отбора пробы, n – общее количествовременных точек отбора проб, i – порядковый номер временной точки отбора проб.AUC0-∞ = AUC0-t + Ct/kel , где Ct - концентрация в последней временнойточке отбора проб, T1/2 = ln2/kelХарактер фармакокинетических кривых, полученных после введенияпрепаратов (T) и (R), в целом сходен, причем индивидуальная вариабельностьзначений активностей эноксапарина натрия в обоих случаях примерно одинакова.Различия в уровнях активности эноксапарина натрия после введения изученныхпpепаpатов, не носят систематического хаpактеpа.
Интервальные значенияосновных фармакокинетических параметров (Cmax, AUC0-t, Cmax/AUC) дляразрабатываемого препарата эноксапарин натрия составили, соответственно 0,36 –0,45 МЕ/мл; 2,01 – 2,63 МЕ*ч/мл; 0,16 – 0,20 ч-1.Интервальные значения основных фармакокинетических параметров (Cmax,AUC0-t, Cmax/AUC) для препарата сравнения составили, соответственно 0,35-0,39МЕ/мл; 2,05-2,68 МЕ*ч/мл; 0,14-0,19 ч-1. Коэффициенты вариации основныхфармакокинетических параметров (Cmax, AUC0-t, Cmax/AUC) для разрабатываемогопрепарата эноксапарин натрия составили, соответственно 19,13 %, 22,79 % и 17,11%.
Коэффициенты вариации основных фармакокинетических параметров (Cmax,AUC0-t, Cmax/AUC) для препарата Клексан® составили, соответственно 10,01 %,22,93 % и 23,88 %.Фармакокинетика лекарственных средств считается эквивалентной, еслиграницы оцененного доверительного интервала для AUC0-t находятся в пределах0,8 – 1,25. Для показателей Cmax и Cmax/AUC0-t, характеризующихся большейвариабельностью, эти пределы составляют 0,75 – 1,33. Интервальные значенияотношений относительной степени всасывания эноксапарина натрия(f’),максимальных значений активностей эноксапарина натрия (f’’) и Cmax/AUC (T/R)после введения исследуемого препарата и препарата сравнения незначительноотличались от единицы (f’ = 0,85 – 1,18; f’’ = 0,99– 1,22; Cmax/AUC t (T/R) = 0,99 –1,31)иукладывалисьвнорму.Коэффициентывнутрииндивидуальной21вариабельности (CV, %) параметров биоэквивалентности составили 28,07 %, 18,45% и 23,92 %, соответственно.По результатам фармакокинетических исследований по анти-IIа активностипрепарата-биоаналога эноксопарина натрия было установлено, что характерфармакокинетическихкривых,полученныхпослевведенияпрепаратовэноксапарин натрия (T) и Клексан (R), в целом сходен.Рис.
5. Усредненные фармакокинетические профили (анти-Ха активность, линейнаяшкала)Рис.6.Усредненные фармакокинетическиеполулогарифмическая шкала)профили(анти-Хаактивность,Интервальные значения основных фармакокинетических параметров (Cmax,AUC0-t, Cmax/AUC) для эноксапарин натрия составили, соответственно 0,409 –0,529 МЕ/мл; 1,892 – 2,497 МЕ*ч/мл; 0,196 – 0,236 ч-1. Интервальные значения основных фармакокинетических параметров (Cmax, AUC0-t, Cmax/AUC) для препаратаКлексан® составили, соответственно 0,398-0,480 МЕ/мл; 1,845-2,621 МЕ*ч/мл;0,181-0,230 ч-1. Коэффициенты вариации основных фармакокинетических параметров (Cmax, AUC0-t, Cmax/AUC) для препарата эноксапарин натрия составили, соответственно 21,91 %, 23,70 % и 15,69 %.
Коэффициенты вариации основных фармакокинетических параметров (Cmax, AUC0-t, Cmax/AUC) для препарата Клексан®составили, соответственно 16,16 %, 29,84 % и 20,35 %.Сопоставление значений AUC0-t с общим AUC0-∞ (их отношение составлялозначительно больше 80 %) свидетельствовало о том, что длительность наблюдения22являлась достаточной. Интервальные значения отношений относительной степенивсасывания эноксапарина натрия (f’), максимальных значений активностей эноксапарина натрия (f’’) и Cmax/AUC (T/R) после введения исследуемого препарата ипрепарата сравнения незначительно отличались от единицы (f’ = 0,907 – 1,102 f’’ =0,942– 1,216; Cmax/AUC (T/R) = 0,940 – 1,230) и укладывались в норму.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
