Диссертация (1141317), страница 6
Текст из файла (страница 6)
Относительная молекулярная масса 98,97. Плотность 1,257г/см3.Толуол(ГОСТ5789-78,х/ч)–бесцветная,прозрачная,легковоспламеняющаяся жидкость с характерным запахом. Температура кипения110,626°С, растворимость в воде 0,057 г на 100 г при 16°С, с воздухом образуетвзрывоопасные смеси. Относительная молекулярная масса 92,14. Плотность 0,867г/см3.Четыреххлористый углерод (ГОСТ 20288-74, ч) – Бесцветная прозрачнаяжидкость, нерастворимая в воде с характерным запахом, температура кипения 7677°С, с воздухом образует взрывоопасные смеси. Плотность 1,595 г/см3 при 20°С.Тионил хлорид (ТУ 601-413-87, х/ч) – бесцветная или слабо желтоватаяжидкость с резким запахом.
Температура кипения 74,8 °С, бурно взаимодействуетс водой, разлагаясь с образованием сернистой и хлористоводородной кислот.Относительная молекулярная масса 118,97. Плотность 1,655.34Характеристика субстанции аммифуринАммифурин – кристаллический порошок от светло-желтого с зеленоватымоттенком цвета, со специфичным запахом, чувствителен к свету, легко растворимв хлороформе, мало и медленно растворим в спирте этиловом 95%, практическинерастворим в воде.Для аммифурина температура плавления не является характерной и зависитот соотношения входящих в его состав фурокумаринов: ксантотоксина,бергаптена и изопимпинеллина.Ксантотоксин – бесцветное кристаллическое вещество, температураплавления 145 – 146°С.Бергаптен – бесцветное кристаллическое вещество желтого цвета,температура плавления 188 – 911 °С.Изопимпинеллин – кристаллическое вещество желтого цвета, температураплавления 148 – 151 °С.Характеристика субстанции анмаринаАнмарин – сумма 5'-изопропенил-4',5' – дигидропсоралена (70%) и 5'изопропилпсоралена (30%) – белый с желтоватым, желтовато-зеленоватым иликремоватым оттенком или светло-желтый кристаллический порошок со слабымспецифическим запахом, чувствителен к свету.
Легко растворим в хлороформе,мало растворим в спирте этиловом 95%, практически не растворим в воде.Температура плавления не является характерной величиной и зависит отсоотношения компонентов.Анмарин получают по реакции дегидратации из мармезина, выделенного изплодов амми большой.Мармезин (ТУ 9369-173-04868244-2010) – индивидуальное химическоевещество, производное дигидрокумарина.
Белый или белый со слегка желтоватымоттенком кристаллический порошок со слабым специфическим запахом.Температура плавления 188 – 190°С.35Технологическое оборудованиеПодбор оптимальных условий экстракции и очистки фурокумариновпроводились в лабораторных условия, валидация технологического процессапроводилась на оборудовании цеха фитохимии ЗАО «Фармцентр ВИЛАР».Извлечение фурокумаринов проводили в экстракторах, вместимостью 1000л, концентрирование извлечений осуществляли на вакуум-выпарных аппаратахSimax (Чехия), фильтровали экстракты на друк-фильтрах с фильтрующимматериалом, гидролиз на стадии очистки проводили в стеклянных реакторахобъемом 200 л, снабженных мешалкой.
В работе использовались сборники,мерники и другие емкости различного объема для сбора и временного храненияполупродуктов производства.Технологический процесс валидирован в соответствии с ГОСТ Р 522492009и«Правиламиорганизациипроизводстваиконтролякачествалекарственных средств» [21,45].Приборы и методики приготовления растворов веществ ГФ XI ч.1.Фотографии цельных и размолотых плодов амми большой были полученына стереомикроскопе MOTIC-CMZ-161 (Испания) с увеличением х30.Размер частиц цельного и измельченного сырья осуществляли на лазерноманализаторе LS 13320 Beckman Coulter.Определение оптической плотности проводили на спектрофотометре СФ2000 (Россия) и Cary100Scan (Varian).ВЭЖХ анализ количественного определения мармезина в сырьепроводили на жидкостном хроматографе фирмы «Waters» с УФ- детектором,хроматографической колонкой из нержавеющей стали, размером 250x4,0 мм иразмером частиц 7 мкм.
В качестве подвижной фазы использовалиацетонитрил:1% уксусная кислота (2:18). Скорость подачи элюента 1,0 мл/мин.Объем вводимой пробы - 20 мкл. Детектирование проводилось при длиневолны 336 нм.36Исследование состава и соотношения аммифурина и анмарина методомЯМР-спектроскопии проводили на приборе Gemini 200 Varian (США).Приготовление раствора PCO мармезина.
Около 0,050 г (точная навеска)PCO мармезина растворяют в 50 мл спирта 96 % в мерной колбе вместимостью100 мл, доводят объем раствора спиртом 95% до метки и перемешивают (растворА). 1 мл раствора А переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводятобъем раствора спиртом 80 % до метки и перемешивают (раствор Б). Раствор Биспользуют свежеприготовленным.Приготовление раствора ГСО ксантотоксина: около 0,02 г (точная навеска)ГСО ксантотоксина, отвечающего требованиям, растворяют в 95% спирте вмерной колбе вместимостью 50 мл, доводят объём раствора 95% спиртом дометки и перемешивают.
Хранят раствор в тёмном месте в колбе с притёртойпробкой, не допуская испарения растворителя. Раствор годен для применения втечение трёх месяцев.37ГЛАВА 2. ПОДБОР ОПТИМАЛЬНЫХ ПАРАМЕТРОВТЕХНОЛОГИЧЕСКОГО ПРОЦЕССА ПОЛУЧЕНИЯ СУБСТАНЦИЙАММИФУРИНА И АНМАРИНА2.1 Обоснование получения двух субстанций в едином технологическомпроцессе.На основании проведенных исследований нами выявлено, что в настоящеевремяполучениесубстанцииаммифуринаизплодоваммибольшойосуществляется по технологии, в которой не учитывается возможность выделениямармезина. В свою очередь, мармезинин представляет собой биологическиактивное вещество, обладающее антимикотической активностью, и являетсяцелевым продуктом при получении субстанции анмарина (Рисунок 7).Плоды амми большой,Плоды амми большой,ЭкстракцияЭкстракцияОсаждениеОсадоксумма фурокумариноваммифуринаОчисткаТехническийаммифуринРаствормармезининафурокумариныаммифуринаОчисткаРаствормармезининаГидролизМармезинДегидратацияАммифуринАнмаринУтилизируемыеотходыпроизводстваРисунок 7 – Схемы получения субстанций аммифурин и анмаринОчистка38Данное обстоятельство диктует необходимость разработки комплекснойтехнологической схемы переработки плодов амми большой, позволяющейрационально использовать лекарственное растительное сырье.
В этой связи намиопределеныоптимальныеусловияэкстракцииипоследующегофракционирования, выделения и очистки фурокумаринов аммифурина ианмарина. (Рисунок 8).ЭкстракцияПлодыамми большойСпирт этиловый90-96%концентрированиеФракционированиеТехническая суммафурокумариновВодный раствормармезининаОчисткаГидролизТехническийаммифуринМармезинДегидратацияОчисткаАнмаринАммифуринРисунок 8 – Комплексная схема получения субстанций аммифурин и анмаринОптимизациюконтролятехнологическихсодержанияиэтаповсоотношенияосуществлялифурокумариновсовременных физико-химических методов анализа.спосредствамиспользованием392.2.
Оптимизация стадии экстракции суммы фурокумаринов из сырьяРанее в технологии получения аммифурина и анмарина использовали неизмельченные плоды амми большой. Для обоснования введения стадииизмельчения плодов амми нами определен размер частиц цельного иизмельченного сырья, изучено влияние измельчения сырья на время смачиванияего экстрагентом.12Рисунок 9 – Цельные (1) и измельченные (2) плоды амми большой (ув.х30)В ходе исследования частицы цельного и измельченного сырья (Рисунок 9)диспергировали в спирте этиловом 90% и помещали в сосуд для образцалазерного анализатора. Дисперсионная среда с диспергированными в нейчастицами перемещается по замкнутой системе прибора и подвергаетсявоздействию лазерного луча. В зависимости от размера частиц происходитрассеивание света, интенсивность которого фокусируется оптикой Фурье нафотодиодных детекторах, переводится в цифровой сигнал и обрабатываетсямикропроцессором оптического модуля и отражается в виде дифракционнойдиаграммы (Рисунок 10).
Диаграмма образца представляет собой сумму диаграммрассеяния света каждой частицы, являющейся характеристикой её размера.4012Рисунок 10 – Дифракционная диаграмма частиц цельного сырья (1) иизмельченного сырья (2)В результате проведенного исследования установлено, что цельное сырье на82 % представлено частицами (плодами) размером 0,7-1,5 мм, средний диаметрчастиц – 1,2 мм. В ходе анализа также было определено, что процесс смачиваниячастиц составляет около 20 мин.В свою очередь, измельченное сырье представляет собой смесь фрагментовплодов и фрагментов отделившейся оболочки плодов, при этом преобладающейфракцией (75%) являются частицы с размером 0,04 -0,3 мм, средний диаметрчастиц – 0,287 мм.
Смачивание частиц проходило в течение 2 мин.Таким образом, измельчение сырья приводит к уменьшению размера частицсреднего размера частиц с 1,2 до 0,287 мм и сопровождается отделениемоболочки плодов, что приводит к снижению времени смачивания сырья в 10 раз иподтверждает необходимость введения стадии измельчения плодов амми большойв технологический процесс.Экстракция является ключевой стадией производства фитопрепаратов, воснове которой лежит избирательное извлечение необходимых биологически41активных соединений, определяемое общими законами массопередачи иобусловленное растворимостью веществ и природой растворителя [8,43,48,52].Целевым продуктом при получении субстанции аммифурин является суммафурокумаринов (бергаптена, ксантотоксина, изопимпинеллина), субстанциианмарин–мармезин.Посколькуэтивеществаобладаютумереннойрастворимостью в спирте этиловом, а также учитывая технологическиедостоинстваданногоэкстрагента,предложеногармонизироватьстадиюэкстракции и сделать ее единой для двух технологических схем.
Для выбораэкстрагента была исследована зависимость выхода экстрактивных веществ исуммы фурокумаринов от используемого типа экстрагента. Для интенсивностиэкстракцию вели при температуре кипения экстрагента, соотношение сырье экстрагент 1:6 соответственно, время экстракции 4 часа (Таблица 2).Таблица 2 – Выход экстрактивных веществ и фурокумаринов в зависимостиот процентной концентрации этанола в экстрагентеНаименованиеЭтанол, %70809096Содержание экстрактивных веществ в экстракте от загруженного сырья, %Первый экстракт11,257,554,8Второй экстракт3,32,21,461,4Третий экстракт0,750,50,330,3Всего экстрактивных веществ:15,310,26,796,5Содержание фурокумаринов в экстракте от содержания в сырье, %Содержание аммифурина72,873,073,774,0Содержание мармезина73,973,573,172,5Согласно полученным результатам, этанол и его водные растворы взаданных условиях одинаково извлекают фурокумарины (изопимпинеллин,бергаптен, ксантотоксин, мармезин), однако, этанол в концентрации 70 – 80 %извлекает значительно больше экстрактивных веществ, которые затрудняютвыделение,фракционирование иочисткуфурокумариновв дальнейшемтехнологическом процессе (Рисунок 11).
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
