Диссертация (1141317), страница 9
Текст из файла (страница 9)
Хлороформноеизвлечение отфильтровывают и упаривают до объёма 1-2 мл. К остаткуприливают 5 мл хлороформа, затем 10 мл 95% этанола, количественно переносятв мерную колбу вместимостью 25 мл и доводят объём колбы 95% этанолом дометки и измеряют оптическую плотностьПри анализе аммифурина: около 0,04 г препарата (точная навеска)растворяют в 75 мл этанола 96 % в мерной колбе вместимостью 100 мл доводятобъем этанолом 96 % до метки и перемешивают (раствор А). 1 мл раствора Апереносят в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем этанолом 96 % дометки, перемешивают и снимают спектр на спектрофотометре.Оптическую плотность всех подготовленных растворов измеряют наспектрофотометре при длине волны 352 нм в кювете с толщиной поглощающегослоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют этанол 95 %.Параллельно измеряют оптическую плотность раствора ГСО ксантотоксина.Содержаниесуммыфурокумариноввпересчетенаксантотоксинрассчитывают в процентах с учетом разведений и влажности.По данным фармакопейной статьи в субстанции аммифурина содержаниесуммы фурокумаринов должно быть не менее 95 и не более 103%.Наряду с этим, при отработке оптимальных параметров технологическогопроцесса нами было изучено соотношение ксантотоксина, бергаптена и57изопимпинелина в сумме фурокумаринов в промежуточном и готовом продукте(Таблицы 4,7,10).Порезультатаманализапромышленныхсерийаммифуринабылоустановлено, что ксантотоксин, бергаптен и изопимпинелин в готовом продуктедолжны находиться примерно в равном соотношении (Рисунок 5).
Данноепредположение подтверждено результатами ЯМР-скопии.Рисунок 5 – ЯМР-спектр фурокумаринов аммифурина3.2.Постадийный контроль получения анмаринаФармацевтическую субстанцию анмарина, представляющую собой смесьдвух изомеров ангидромармезина, в ходе технологического процесса получаютнепосредственно по реакции дегидратации из мармезина, выделенного из плодовамми большой [32]. Таким образом, именно мармезин является основнымсоединением, содержание которого необходимо контролировать в исходномсырье и промежуточных продуктах.58Однако ФС 42-1996-83 «Амми большой плоды» регламентирует толькосодержание суммы фурокумаринов в пересчете на ксантотоксин.
Данноеобстоятельство диктует необходимость внесения изменений в ФС и введениемпоказателя, нормирующего содержание мармезина.Для этих целей при оптимизации технологического процесса намииспользован метод ВЭЖХ с УФ-дектированием при длине волны 336 нм.Методика проведения анализа: Около 2 г (точная навеска) неизмельчённыхплодов, отобранных из аналитической пробы, помещают в колбу вместимостью100 мл (с притёртой пробкой), добавляют 50 мл 95% этанола. Колбу закрываютпробкой и взвешивают (с точностью до 0,01 г.), затем присоединяют к обратномухолодильнику с водяным охлаждением и нагревают на кипящей водяной бане втечение двух часов. Колбу с содержимым охлаждают до комнатной температуры,взвешивают с точностью до 0,01 г.
и доводят массу колбы до первоначального95% этанолом. Полученный экстракт перемешивают, фильтруют через вату ипереносят пипеткой 45 мл в круглодонную колбу вместимостью 100 мл иотгоняют до объёма 5 мл. К полученному спиртовому остатку приливают 10 млочищенной воды, нагретой до 60-70 °С, перемешивают и охлаждают. Затемобрабатывают смесь в делительной воронке 15 мл эфира три раза, каждый развстряхивая в течение 3 минут. Раствор упаривают на роторном испарителе доудаления этанола, добавляют 2 мл концентрированной хлористоводороднойкислоты и нагревают на кипящей водяной бане в течение 15 минут.
Полученныйраствор обрабатывают 10 мл хлороформа три раза, каждый раз встряхивая втечение 3 минут. Хлороформные извлечения фильтруют через безводный сульфатнатрия и отгоняют на ротационном испарителе досуха. Сухой остаток растворяютв 2 мл этанола 95 % (раствор А). 20 мкл раствора А вводят в хроматограф.Параллельно анализируют раствор РСО мармезина.Содержание мармезина в процентах вычисляют по формуле:Х=1 ∗ 1 ∗ ∗ ∗ 100 ∗ 1 ∗ ∗ 10059где S1 – площадь пика мармезина на хроматограмме испытуемого раствора;V1 – объем разведения испытуемого раствора, мл;m0 – масса навески мармезина, г;Р – содержание мармезина в РСО мармезина, %;S0 – площадь пика мармезина на хроматограмме РСО мармезинаm1 – масса навески сырья, г;V0 – объем разведения раствора СО мармезина, мл;Содержание мармезина в сырье должно быть не менее 0,1%.Данная методика была адаптирована и применена в постадийном контролепроизводства анмарина.Анализ готовой субстанции проводили методом спектрофотометрии.Методика проведения анализа: около 0,04 г препарата (точная навеска)растворяют в 75 мл спирта 96 % в мерной колбе вместимостью 100 мл.
доводятобъем раствора спиртом 96 % до метки и перемешивают (раствор А). 1 млраствора А переносят в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объемраствора спиртом 96 % до метки и перемешивают.Измеряютоптическуюплотностьполученногорастворанаспектрофотометре при длине волны 308 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. Вкачестве раствора сравнения используют спирт 96 %.Параллельно в тех же условиях измеряют оптическую плотность раствораГосударственного образца (ГСО) ксантотоксина.Содержание анмарина в процентах (Х) вычисляют по формуле:=1 ∙ 0 ∙ 100 ∙ 50 ∙ ∙ 1000 ∙ 1 ∙ 1 ∙ (100 − )где D1 - оптическая плотность испытуемого раствора;D0 - оптическая плотность раствора ГСО ксантотоксина;а1 - навеска препарата в граммах;а0 - навеска ГСО ксантотоксина в граммах;W - потеря в массе при высушивании в процентах;60Р – содержание основного вещества в ГСО ксантотоксина, впроцентах.Соотношениеизомеровангидромармезинавсубстанциипроводили методом ЯМР (Рисунок 6).Рисунок 6 – ЯМР-спектр анмаринаанмарина61Выводы к главе 31.
Предложен метод спектрофотометрии для осуществления постадийногоконтроля производства аммифурина.2. Внедрен метод оценки качества и содержания мармезина с помощьюВЭЖХ.3. Изучен состав и соотношение фурокумаринов аммифурина и анмарина всырье, полупродуктах и готовом продукте методом ЯМР-спектроскопии.62ГЛАВА 4. КОМПЛЕКСНАЯ ТЕХНОЛОГИЯ ПОЛУЧЕНИЯСУБСТАНЦИЙ АММИФУРИН И АНМАРИН4.1. Разработка технологии производства лекарственных субстанцийаммифурин и анмарин из плодов амми большой.Экстракция,концентрированиеизвлеченияифракционированиефурокумаринов.Измельченные плоды амми большой взвешивают 60 килограмм изагружают через верхний люк в экстрактор (загрузка №1).
На первую экстракциюсырья загрузки №1 в экстрактор подают спирт этиловый ректификованный,плотностью 0,805 г/см3, при соблюдении соотношения сырья и экстрагента припервом контакте фаз. Первую экстракцию проводят в течение четырёх часов прислабом кипении (температура 75- 80 С), и непрерывном перемешивании.
Спустяуказанное время содержимое экстрактора охлаждают до 20 – 25 °С и сливаютчерез друк-фильтр в сборник первое спиртовое извлечение.Первое спиртовое извлечение загрузки №1, полученное в пусковом режиме,направляют в сборник на концентрирование.На вторую экстракцию сырья загрузки №1 экстракторподают спиртэтиловый ректификованный плотностью 0,805 г/см3 в объеме, равном слитомупервому извлечению. Вторую экстракцию проводят в течение трех часов прислабом кипении (температура 75- 80 С), и непрерывном перемешивании.
Спустяуказанное время содержимое экстрактора охлаждают до 20 – 25 °С и сливаютвторое спиртовое извлечения через друк-фильтр в сборник, которое используют вкачестве экстрагента для первой экстракции сырья загрузки №2.Аналогичным образом проводят третью экстракцию сырья загрузки №1 втечение двух часов, подавая на третью экстракцию сырья в экстрактор спиртэтиловый ректификованный из мерника плотностью 0,805 г/см3 в количестве,равном слитому второму извлечения. Спустя указанное время экстракторохлаждают до 20-25 °С и фильтруют через друк-фильтр третье спиртовое63извлечение в сборник, которое используют в качестве экстрагента для второйэкстракции сырья загрузки №2.Послепроведениятрехэкстракцийвэкстрактореведутпроцессрегенерации спирта этилового из отработанного сырья (шрота).Растительное сырьё в мешках взвешивают на весах и загружают черезверхний люк в экстрактор (загрузка №2).
На первую экстракцию сырья загрузки№2 в экстрактор подают второе спиртовое извлечение от загрузки №1 и спиртэтиловый ректификованный плотностью 0,805 г/см3 из мерника для достижения.Необходимого соотношения сырья и экстрагента при первом контакте фаз.Первую экстракцию сырья загрузки №2 проводят в экстракторе аналогичновышеописанному для загрузки №1. Спустя указанное время экстракторохлаждают до 20-25 °С и первое спиртовое извлечение загрузки №2 сливают,затем его направляют на концентрирование.На вторую экстракцию загрузки №2 в экстрактор подают третье спиртовоеизвлечение загрузки №1. Вторую экстракцию загрузки №2 в экстракторе проводятаналогично вышеописанному для загрузки №1.
По истечении времени экстракторохлаждают до 20 – 25 °С. Второе спиртовое извлечение загрузки №2 сливаютчерез друк-фильтр и в дальнейшем используют в качестве экстрагента для первойэкстракции сырья загрузки №3.На третью экстракцию загрузки №2 в экстрактор подают спирт этиловыйректификованный плотностью 0,805 г/см3 в объеме, равном слитому второмуспиртовому извлечению загрузки №2. Третью экстракцию загрузки №2 вэкстракторе проводят аналогично вышеописанному для загрузки №1. Спустяуказанное время экстрактор охлаждают до 20 - 25 °С.
Третье спиртовоеизвлечение загрузки №2 сливают через друк-фильтр в сборник и используют вкачестве экстрагента для второй экстракции загрузки №3.Послепроведениятрехэкстракцийвэкстрактореведутпроцессрегенерации спирта этилового из шрота.В экстрактор, освобожденный от шрота загрузки №1, загружают плодыамми большой (загрузка №3).64На первую экстракцию сырья загрузки №3 в экстрактор подают второеспиртовое извлечения загрузки №2.На вторую экстракцию сырья загрузки №3 в экстрактор подают третьеспиртовое извлечение загрузки №2.
Второй экстракт используют в качествеэкстрагента для первой экстракции загрузки №4.На третью экстракцию сырья загрузки №3 в экстрактор подаютспиртэтиловый ректификованный. Полученное третье извлечение загрузки №3используют в качестве экстрагента для второй экстракции загрузки №4.Послепроведениятрехэкстракцийвэкстрактореведутпроцессрегенерации спирта этилового из шрота.Далее процесс происходит в установившемся режиме.Примечание.
В установившемся режиме для экстракции фурокумаринов изплодов амми большой используют спирт этиловый ректификованный или отгонспирта этилового концентрацией не менее 90% (плотностью не более 0,829 г/см3при 20°С).Процесс концентрирования первого спиртового извлечения проводят вциркуляционном вакуумно-выпарном аппарате при температуре не более 50 С ивакуумметрическом давлении не менее 91 кПа (0,93 кгс/см2) в 15 раз. Полученныйконцентрированный экстракт, сливают в предварительно взвешенную на весахемкость для разделения суммы фурокумаринов.Разделение суммы фурокумаринов проводят трехкратным объёмом водыпри перемешиваниидо создания однородной массы.
Емкость накрываюткрышкой, помещают в холодильную камеру и выдерживают в течение 24 часовпри температуре не более 6 оС.4.1.1. Получение субстанции аммифуринПолучение раствора динатриевых солей кумариновых кислот.По истечении времени разделения из емкости с осадком суммыфурокумаринов декантируют водный маточный раствор в сборник. Водныйматочный раствор используют для получения субстанции анмарин.65Для получения раствора динатриевых солей кумариновых кислот проводятгидролиз фурокумаринов в щелочной среде при перемешивании в течение одногочаса. При этом происходит раскрытие лактонного кольца и образованиединатриевыхсолейсоответствующихфурокумариновыхкислот.Даннуюоперацию проводят с целью извлечения балластных веществ из реакционноймассы хлороформом.В реактор подают спирт этиловый ректификованный.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
