Диссертация (1141130), страница 11
Текст из файла (страница 11)
Материалв виде шариков показывал стабильную пролонгированную равномернуюспособность к резорбции.На рисунках (39,40) представлена тканевая реакция на имплантациюматрикса в динамике на разных сроках: 7, 14, 21 и 28 день.78А.В.Б.Г.Рисунок 39. Тканевая реакция на имплантацию скаффолда в видетрубочки, заполненной матриксом. А – 7 дней, б – 14 дней, в – 21 дней, г- 28 дней.Видно постепенное прорастание соединительной ткани в полость трубочки поматриксу. Синими стрелками показана стенка трубочки, которая в исследуемыесроки не подвергается резорбции. Красной стрелкой показано направлениепрорастания соединительной тканиА..Б.Г.В..Рисунок 40.
Тканевая реакция на имплантацию маткрикса в виддегранул. А- 7 дней ; Б- 14 дней; В- 21 дней ; Г- 28 дней . Видна постепеннаярезорбция материала гранул3.6. Гистологическогоиссследованиярегенерациикостныхдефектов бедренных костей крысПрибедренныхгистологическомкостейкрысисследованиисобразцовимплантированнымкостнойтканиостеопластическимматериалом выявлено, что костная ткань имеет линейный полнослойныйдефект кортикальной пластинки с переходом на губчатую кость. Спил костиокружен поперечно полосатой мускулатурой в которой располагаются полягубчатого материала и линейный объект по типу мембраны, частичноперекрывающий костный дефект. Диаметр кости резко утолщен за счетбольшого числа очагов остеогенеза и субнадкостничных наслоений.Кортикальная пластинка диафиза бедренной кости имеет выраженные79субнадкостничные и внекостные очаги активного остеогенеза безформирования четкой структуры.
Нагромождения костного матриксапредставленопреимущественнобалкамиретикулофибрознойипластинчатой кости без четких границ, иногда эти костные структурывходили в контакт с остеопластическим материалом, окружали его.В свою очередь в просвете костного канала так же расположеныгубчатые рыхлые структуры остеопластического материала в окружениибалок костного вещества. С краев дефекта кортикальной кости, со стороныэндостаопределяетсяростновообразованнойкостнойтканибезформирования четких структур.При детальном изучении поверхности остеопластического материалавыявлено, что большая ее часть покрыта гигантскими клетками инородныхтел, мелкими балками новообразованной костной ткани в окружениисоединительнойтканиснезначительнойлимфо-плазмоцитарнойинфильтрацией, кровоизлияниями (рис.
41,42).Рисунок 41. Гистологическоеисследование на 28 суткиРисунок 42. Гистологическоеисследование на 60 сутки80Прибедренныхгистологическомкостейисследованиикрыссобразцовкостнойимплантированнымитканигрануламиостеопластического материала выявлено, что костная ткань имеет линейныйполнослойный дефект кортикальной пластинки с переходом на губчатуюкость. Спил кости окружен поперечно полосатой мускулатурой в которойрасполагаются гранулы материала различного диаметра.
В свою очередь впросвете костного канала так же расположены гранулы остеопластическогоматериала в окружении балок губчатой кости. С краев дефектакортикальной кости определяется рост новообразованной костной ткани.Иногда гранулы материала соприкасаются с новообразованной костью,однако в большинстве своем разрознено находятся среди рыхлойсоединительнойткани.Придетальномизученииповерхностиостеопластического материала выявлено, что ее в некоторых местахпокрывают гигантские клетки инородных тел, окружающая соединительнаяткань с незначительной лимфо-плазмоцитарной инфильтрацией (рис.43,44).Рисунок 43.
Гистологическоеисследование на 28 суткиРисунок 44. Гистологическоеисследование на 60 сутки81Таким образом, на данном этапе исследования выявлено, чтополиоксибутират в виде гранул самостоятельно не поддерживает остеогенезв костной ране, способен к миграции и частично препятствуетрастпространению фронта регенерации. Однако в виде губчатой структурактивность остеогенеза возрастала, вероятно, из-за развитой поверхностиматериала.3.7.
Гистологическоеиссследованиерегенерациикостныхдефектов на теменных костях крысГруппа – КИ-ПОБ.Препараты теменных костей крыс с полнослойным дефектом костнойткани до твердой мозговой оболочки. Над дефектом в окружениисоединительнойтканирасполагаетсядискматериаласпористойструктурой. Частично диск проникает в костный регенерат. Под ним сматеринской кости определяется рост новообразованной костной ткани.Костные балки образуют островки кости балочного строения на твердоймозговой оболочке. Между островками нежноволокнистая клеточнаясоединительная ткань богатая тонкостенными сосудами. Островки частоотстоят друг от друга на некотором расстоянии, иногда сливаясь междусобой. На поверхности костных балок могут быть обнаружены активныеостеобласты и наслоения остеоида.
В некоторых случаях с материнскойкости фронт регенерации имел строение, напоминающее языки. Изучениесерийных срезов не выявило перекрытие дефекта новообразованнойкостной тканью на этот срок наблюдения.Всвоюнезначительноочередь,нежноволокнистаяинфильтрированасоединительнаяпреимущественнотканьлимфоцитамииплазмоцитами. Полиморфноядерные лейкоциты не обнаруживаются. Внекоторых местах на поверхности материала можно обнаружить гигантскиеклетки инородных тел (рис.45,46,47).82Рисунок 45. Гистопантомограмма теменной кости крыс с критическимкостным дефектом спустя 28 дней после операции.
Островки костной ткани натвердой мозговой оболочке. Окраска небесный трихром. Х50.Рисунок 46. Гистопантомограмма теменной кости крыс с критическимкостным дефектом спустя 28 дней после операции. Островки и фронт регенерациикостной ткани по типу языка на твердой мозговой оболочке. Окраска небесныйтрихром. Х50.Рисунок 47. Гистопантомограмма теменной кости крыс с критическимкостным дефектом спустя 28 дней после операции. Новообразованная костнаяткань не заполняет полностью критический дефект. Островки костной ткани натвердой мозговой оболочке.
Окраска небесный трихром. Х5083Морфометрическое исследование окрашенных препаратовПри морфометрическом исследовании препаратов, окрашенныхнебеснымтрихромом,определялиотносительныйобъемкостнойновообразованной костной ткани (BV/TV) в костном регенерате дефекта иотносительный объем соединительной ткани (BV/TV). Относительныйобъем костной ткани в дефекте теменной кости составил в среднем 27%(медиана), а соединительная ткань в свою очередь 73 % (медиана).Флуоресцентная микроскопияОкрашивание доксициклином (желтое окрашивание) обнаруживалосьв ранних костных пластинках, прилежащих к сосудам (до 14 сутокэксперимента).
Основной костный массив окрашивался тетрациклином(зеленоеокрашивание),чтосвидетельствуетопреимущественномостеогенезе на срок с 14 по 21 день. В дальнейшем накоплениеализаринового красного (красное окрашивание) демонстрирует снижениескорости остеогенеза и уменьшения объема образованного костногоматрикса. Синее окрашивание характеризует фоновое свечение остеина безфлуоресцентныхметок.Всвоюочередьфронтрегенерациираспространялся по твердой мозговой оболочке к центральной зонедефекта,нонеперекрывалегополностью(рис.48,49).Рисунок 48. Мультиканальная гистопантомограмма гистологического срезатеменных костей крыс с раздельным флуоресцентным окрашиванием через 28 днейпосле трепанации. Х5084Рисунок 49. Раздельное окрашивание флюорохромами новообразованнойкостной ткани.
Люминисцентная микроскопия. Мультиканальное изображений.х100Группа – КИ-ПОБ-ГА-Ал.Препараты теменных костей крыс с полнослойным дефектом костнойткани до твердой мозговой оболочки. Над дефектом в окружениисоединительнойтканирасполагаетсядискматериаласпористойструктурой. Частично диск проникает в костный регенерат. Под ним сматеринскойкостиопределяетсяростновообразованнойкостной.Новообразованная костная ткань преимущественно имеет пластинчатоестроение в виде узких конусов с основанием, обращенным к материнскойкости и верхушкой обращенной к центру регенерата. Изучение серийныхсрезов не выявило полного перекрытие дефекта новообразованной костнойтканью на этот срок наблюдения. В большинстве случаев не произошлосближение и слияние фронтов регенератов с краев дефектов. В центральнойчасти остается небольшой участок свободный от костной ткани.Всвоюнезначительноочередьнежноволокнистаяинфильтрированасоединительнаяпреимущественнотканьлимфоцитамии85плазмоцитами.
Полиморфноядерные лейкоциты не обнаруживаются. Внекоторых местах на поверхности материала можно обнаружить гигантскиеклетки инородных тел (рис.50).Рисунок 50. Гистопантомограмма теменной кости крыс с критическимкостным дефектом спустя 28 дней после операции. Новообразованная костнаяткань не заполняет полностью критический дефект. Окраска небесный трихром.Х50Морфометрическое исследованиеПри морфометрическом исследовании препаратов окрашенныхнебеснымтрихромомопределялиотносительныйобъемкостнойновообразованной костной ткани (BV/TV) в костном регенерате дефекта иотносительные объем соединительной ткани (BV/TV). Относительныйобъем костной ткани в дефекте теменной кости составил в среднем 36%(медиана), а соединительная ткань в свою очередь 64 % (медиана).Флуоресцентная микроскопияПримикроскопическомисследовании,сиспользованиефлуоресцентной микроскопии, образцов костной ткани теменных костейкрыс выявлено, что накопление флуоресцирующих меток в костной тканипроизошло успешно.
Окрашивание доксициклином (желтое окрашивание)обнаруживалось в ранних костных пластинках, прилежащих к сосудам (до14сутокэксперимента).тетрациклином(зеленоеОсновнойкостныйокрашивание),чтомассивокрашивалсясвидетельствуетопреимущественном остеогенезе на срок с 14 по 21 день. В дальнейшем86накопление ализаринового красного (красное окрашивание) демонстрируетснижение скорости остеогенеза и уменьшения объема образованногокостного матрикса. Синее окрашивание характеризует фоновое свечениеостеина без флуоресцентных меток.