Диссертация (1141130), страница 12
Текст из файла (страница 12)
В свою очередь фронт регенерациираспространялся по твердой мозговой оболочке к центральной зонедефекта, но не перекрывал его полностью (рис.51,52).Рисунок 51. Мультиканальная гистопантомограмма гистологического срезатеменных костей крыс с раздельным флуоресцентным окрашиванием через 28 днейпосле трепанации и установки КИ-ПОБ-ГА-Ал. Х50Рисунок 52. Распределение флюорохромов в новообразованной костнойткани теменных костей крыс через 28 дней после трепанации и установки КИ-ПОБГА-Ал. Мультиканальное сложение изображений.
Х 10087Группа ПОБ/ГА/Алг + МСКСветовая микроскопияПри гистологическом изучении образцов костной ткани теменныхкостей черепа крыс через 28 дней после имплантации материала снанесенным на него клеточной культурой выявлено что, костный регенератсостоит из преимущественно пластинчатой костной ткани, перекрывающейобласть дефекта от 63% до 92% процентов поперечника дефекта (рис.53-56).Рисунок 53. Исходный или «нулевой» срез (шлиф) теменных костей черепакрыс с клеточным трансплантатом, через 4 недель после трансплантации. Окрасканебесный трихром. Х50Над костным регенератом располагается остеопластический материалс пористой структурой.
Внутри пор обнаруживается рыхлая неоформленнаясоединительная ткань регенераторного типа с умеренной клеточнойстью(рис.54).Рисунок 54. Срез (шлиф) из центральной области регенерата теменныхкостей черепа крыс с клеточным трансплантатом, через 4 недель послетрансплантации.
Окраска небесный трихром. Х5088Костный регенерат неравномерен по толщине. Костный регенерат,прилежащий к материнской кости имеет тенденцию к постепенномуутолщению к центральной части регенерата, превосходя толщинойисходную кость (рис.55). Смыкания фронтов регенерата над сагитальнымсинусом не происходило в большинстве случаев.Рисунок 55. Срез (шлиф) из центральной области регенерата теменныхкостей черепа крыс с клеточным трансплантатом, через 4 недель послетрансплантации. Костный регенер превышает толщину исходной кости. Окрасканебесный трихром. Х50Структуракостногорегенератапредставляласобоймассивпластинчатой костной ткани с фолькмановскими и гаверсовыми каналами,внутри которых среди рыхлой волокнистой соединительной тканиобнаруживали сосуды различного калибра и степеней зрелости.
Навнутренней выстилке фолькмановских каналов, выявляли наслоенияостеоида, пролиферацию остеобластов (рис.56).89Рисунок 56. Срез (шлиф) из центральной области регенерата теменныхкостей черепа крыс с клеточным трансплантатом, через 4 недель послетрансплантации. Окраска небесный трихром. Х50Твердая мозговая оболочка сохраняла свою структуру.Во всехслучаях костный регенерат находился в тесном взаимодействии как ствердой мозговой оболочкой, так и с остеопластическим материалом.Люминесцентная микроскопияПрикостныймоноканальнойрегенератлюминесцентнойпредставлялсобойобзорноймассивмикроскопиикостнойтканиснеравномерным люминесцентным свечением разной интенсивности,соответствующей всем трем введенным флуорохромам.
Распределениесвечению люменисцентных меток имело слоистый вид с участками сложнойидентификации преимущественного накопления одного из введенныхвеществ (рис.57).Рисунок 57. Мультиканальное люминисценое изображение костногорегенерата.
Гистопантомограмма. Полное заполнение дефекта новообразованнойкостной тканью. Х50Мультиканальное исследование (сложение слоев) выявило различноенакопление флюорохромов в костном матриксе в зависимости от сроков.Такнакоплениедоксициклина,тетрациклинаиопределялось в массиве нообразованной кости (рис.58).ализариначетко90Рисунок 58. Мультиканальное люминисценое изображение костногорегенерата.Гистопантомограмма.Почтиполноезаполнениедефектановообразованной костной тканью. Х50Если накопление тетрациклина и доксициклина имело стертыеграницы, то костный массив содержащий ализариновый красный четкодифференцировался преимуществовал в данной исследовательской группе.Рисунок 59.
Раздельное окрашивание флюорохромами новообразованнойкостной ткани. Люминисцентная микроскопия. Мультиканальное изображений.х100В свою очередь костное вещество, содержащее ализариновыйкрасный преимуществовала в костном регенерате, что свидетельствует онарастании интенсивности репаративного остеогенеза во второй и третьейдекаде исследования (рис.59).Морфометрическое исследование скорости образования костнойтканиПриморфометрическомисследованиистепениискоростиминерализации было выявлено, что наибольший объем минерализованной91костной ткани образовался в дефектах с 14 по 21 сутки. Максимальныепоказатели объема минерализованной костной ткани были в группеостеопластического материала с ПОБ-ГА-АЛГ (см.
Табл 5).Таблица № 5КИ-ПОБКИ-ПОБ-ГА-Алг.МСК-ТИКЕд. изм.T.Ar2,3±0,412,6±0,22см2MARD0,02±0,0010,01±0,0052,4±0,310,038±0,004MART0,025±0,00140,04±0,0020,021±0,003см2MARA0,015±0,00110,025±0,00260,029±0,002см2Md.ArD0,015±0,00340,022±0,00250,065±0,005см2Md.ArT0,021±0,0030,017±0,00120,044±0,005см2Md.ArA0,018±0,0010,023±0,00090,082±0,005см2MFR0-14114±12144±21388±19,5мкм/суткиMFR15-21MFR22-28228±17133±10576±27355±22333,3±15,7483±14,7мкм/суткимкм/суткисм2Таким образом, при морфологическом исследовании выявлено, чтостимуляциярепартивногоостеогенезаклеточнымтрансплантатомпроисходит на ранние сроки после трансплантации ткане-инженернойконструкции (ТИК).
По сравнению с другими группами происходит какувеличение площади костного регенерата, образовавшегося за первые 14суток (МСК-ТИК Md.ArD=0,065±0,005 см2), так и увеличение скоростиприроста костной ткани (МСК-ТИК MFR0-14=388±19,5 мкм/сут). Однако впоследующем (с 15-21 сутки), скорость образования кости замедляется(МСК-ТИКMFR15-21=333,3±15,7),чтовыражаетсявумереннойстабилизации площади новообразованной костной ткани на уровне0,044±0,005 см2 (МСК-ТИК Md.ArT). В последующем (с 22-28 день)скоростьобразованиякостнойтканипослетрансплантацииТИКувеличивается (МСК-ТИК MFR22-28=483±14,7 мкм/сутки), что приводитобразованию значительно массива костной ткнаи - площадь, занимаемая92новообразованной костной тканью в этот период (22-28 день) составляла0,082±0,005 см2.Проводя сравнительный анализ между группами, выявлено что,трансплантациятканеинженернойконструкции(ТИК),содержащаяклеточную культуру проявляла выраженную стимуляцию репаративногоостогенеза с увеличением первичной площади, занимаемой костнымрегенератом на поверхности твердой мозговой оболочки.
Последующееснижение скорости образования костни на значительной площади костногорегенерата, может быть связано с временным истощением регенераторногопотенциала новообразованной кости, с последующим восстановлением егои значительным ускорением образования костной ткани, за счет стимуляциисо стороны трансплантата.93ЗаключениеПроблема травматизма является одной из основных тем научныхразработок в челюстно-лицевой хирургии и хирургической стоматологии[Христофорандо Д.Ю., 2011; Левенец А.А., 2013].
Также наблюдаетсяутяжеление характера и вида травм, в частности, повышение доли тяжелыхпереломов верхней челюсти, массивных разрушений средней зоны лица[Дубровин М.С., 2013; Лёвина К.С., 2014].В России число больных с патологией челюстно-лицевой области и еёсложность, особенно травматического происхождения, в настоящее времярастет. Согласно данным Министерства Здравоохранения РоссийскойФедерации количество больных с «Травматическими повреждениями,отравлениями и некоторые др. последствия воздействия» составило в 2015году – 13 млн 299 тыс 691 человек, в 2016 году – 13 млн 086 тыс 966 человек.Восстановление объёма и структуры альвеолярной кости челюстейпосле потери зубов является не менее актуальной и социально-значимойпроблемой.
Наиболее современным методом ортопедического лечения причастичной или полной потери зубов, является протезирование сиспользованием дентальных имплантатов. Достаточный объем кости нетолькообеспечиваетусловиядляправильногопозиционированияимплантатов, но и способствует в дальнейшем ремоделированию костнойткани под нагрузкой. Качество кости влияет на успех остеоинтеграции и,соответственно,нафункциональнуюсостоятельностьдентальныхимплантатов [Альфаро Ф.Э., 2006].Восстановлениекостныхдефектовсложнойформыявляетсянепростой задачей. Дефекты и деформации в челюстно-лицевой области какправило имеют индивидуальное строение и для их восстановлениятребуются не просто остеопластические материалы, а костные имплантаты(КИ) повторяющие форму дефекта [Jardini A.L., 2014].94Создание сложных комбинированных остеопластических материаловиликостныхимплантатовсрасширеннымиструктурнымиифункциональными свойствами стало возможным благодаря развитиюрегенеративной медицины и инженерных направлений в биологии имедицине:биоинженерии(вчастности,тканевойинженерии)ибиотехнологии.