Диссертация (1141039), страница 13

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 13)

Статистически значимое повышение активности ферментаСОД в (1,9 раза) было зарегистрировано только в колоноцитах.Использованиеантиоксидантаспрофилактическойцельюснижалоколичество продуктов ПОЛ. Содержание МДА в плазме крови и колоноцитахуменьшилось в 1,4 раза по сравнению с показателями группы животных вусловиях экспериментального дисбиоза, а АГП в 1,2 раза в плазме крови и в 1,7раза в ткани кишечника (таблица 17).Таблица 17 – Содержание продуктов ПОЛ в условиях профилактическогоиспользования антиоксиданта.Группы животныхСодержаниемалонового диальдегида,мкмоль/г ткани (М±m)ГомогенаттканиПлазма,кишечника,мкат/млмкат/г белкатканиСодержание ацилгидроперекисей,у.е (М±m)Плазма,у.е.Гомогенаттканикишечника,у.еКонтроль2,46±0,953,57±0,570,81±0,090,31±0,03(интактные мыши)Дисбиоз3,95±0,41**6,82±0,72***1,13±0,07**0,70±0,08***Профилактика2,73±0,39х4,67±0,42х0,95±0,05х0,42±0,05хх«Эмоксипин»Примечание: *- p<0,05 по сравнению с контрольной группой, ** - p<0,01 по сравнению сконтрольной группой, *** - p<0,001 по сравнению с контрольной группой; х- p<0,05 посравнению с группой «дисбиоз», хх- p<0,01 по сравнению с группой «дисбиоз», ххх- p<0,001 посравнению с группой «дисбиоз».Полученные значения количественного содержания продуктов ПОЛ умышейприпрофилактическомиспользованиисопоставимы с данными интактных животных.антиоксидантанебыли735.2 Изменения состояния пристеночной микрофлоры толстого кишечника имолекулярно-биохимических показателей крови и колоноцитов мышей вусловиях коррекции антиоксидантом эмоксипиномИспользование эмоксипина после воспроизведения экспериментальногодисбиоза привело к увеличению численности кишечных палочек с нормальнойферментативной активностьюв 1,5 раза.

Количество эшерихий со сниженнойферментативной активность снизилось до значений lg КОЕ 4,23±0,76, что в 1,7раза ниже численности определяемых бактерий группы гентамициновогодисбиоза (таблица 18).Таблица 18 – Влияние антиоксиданта эмоксипина на состав мукозноймикрофлоры толстого кишечника мышейВыделенныемикроорганизмыКоличество микроорганизмов, lgKOE/г (M±m)Группы животныхКонтрольДисбиозКоррекция(интактные мыши)«Эмоксипин»E. colic нормальной6,77±0,783,95±0,53**5,88±0,72хферментативной активностьюE. colicо сниженной4,37±0,767,03±0,95*4,23±0,76хферментативной активностьюEnterobacterspp.4,47±0,792,37±0,56*4,32±0,88Salmonella spp.5,65±0,666,44±0,866,54±0,81***Citrobacter spp.4,37±0,920±00±0***Enterococcus spp.3,42±0,900±0***1,19±0,30*хххStreptococcus spp.2,93±0,606,17±1,09*5,79±0,71**Staphylococcus2,74±0,604,10±0,754,38±0,87(коагулазоотрицательные)Staphylococcus aureus03,40±0,62***4,09±0,62***Proteus spp.04,01±0,66***4,10±0,69******Candida spp.1,26±0,324,94±0,745,09±0,72***Lactobacillus spp.6,15±0,703,73±0,77*5,64±0,84**Bifidobacterium spp.7,93±0,934,24±0,725,88±1,14Примечание: *- p<0,05 по сравнению с контрольной группой, ** - p<0,01 по сравнению сконтрольной группой, *** - p<0,001 по сравнению с контрольной группой; х- p<0,05 посравнению с группой «дисбиоз», хх- p<0,01 по сравнению с группой «дисбиоз», ххх- p<0,001 посравнению с группой «дисбиоз».Зарегистрировано появление представителей рода Enterococcus, lg КОЕкоторых составил 1,19±0,30, при этом полученные значения не достигликонтрольных.74Число стрептококков и грибов рода Candida превышало значение контроляи не имело достоверных отличий от группы животных, у которых моделировалидисбиоз.Вместесмикробиоценозатолстоготемумышейкишечникаопытнойгруппыидентифицировалисьвсоставезолотистыестафилококки и бактерии рода Proteus, отсутствовали представители родаCitrobacter.Не было отмечено статистически значимых количественных различий впопуляции бифидо- и лактобактерий, коагулазоотрицательных стафилококков,бактерий рода Salmonella и Enterobacter.При коррекции выявленных при экспериментальном дисбиозе измененийсостава клеточных эритроцитов антиоксидантом эмоксипином происходитдостоверная нормализация содержания всех исследуемых фракций фосфолипидов(таблица 19).Таблица19–Количественныехарактеристикифосфолипидовмембранэритроцитов крови мышей в условиях коррекции антиоксидантомГруппыживотныхКонтроль(интактныемыши)ДисбиозКоррекция«Эмоксипин»Фосфолипиды (M±m)Лизофосфатидилхолин2,92±0,735,97±0,78**2,87±0,32ххх**Сфингомиелин7,23±0,2711,52±1,096,80±0,79хххФосфатидилинозитол/серин16,93±1,1911,35±0,95***15,89±1,17хх*Фосфатидилхолин14,75±1,0111,57±1,1015,38±1,31хКардиолипин2,51±0,231,41±0,17***2,83±0,29хххФосфатидилэтаноламин15,82±0,9611,28±1,17**16,46±1,10хх***Примечание: - p<0,05 по сравнению с контрольной группой, - p<0,01 по сравнению сконтрольной группой, *** - p<0,001 по сравнению с контрольной группой; х- p<0,05 посравнению с группой «дисбиоз», хх- p<0,01 по сравнению с группой «дисбиоз», ххх- p<0,001 посравнению с группой «дисбиоз».В сравнении с группой экспериментального дисбиоза количественноесодержание фракций ЛФХ и СМ снизилось в 2,1 и 1,7 раза соответственно.Отмечено достоверное повышение содержания КЛ в 2 раза, ФЭ в 1,5 раза, ФИ/ФСв 1,4 раза, ФХ в 1,3 раза.

Все числовые показатели исследуемых фракций, заисключением ФИ/ФС, достигли значений контрольной группы.75Анализируя количественные характеристики мембранных нейтральныхлипидов, следует отметить изменения состава их фракций (таблица 20).Таблица 20 – Количественные характеристики мембранных нейтральных липидовэритроцитов крови мышей в условиях коррекции антиоксидантомГруппыживотныхНейтральныелипиды (M±m)Контроль(интактные мыши)ДисбиозКоррекция«Эмоксипин»Холестерол47,27±1,1255,40±1,17***48,89±1,59ххМоноацилглицеролы2,89±0,243,51±0,402,55±0,19хДиацилглицеролы2,09±0,242,65±0,242,51±0,16Свободные жирные кислоты1,91±0,181,47±0,161,78±0,13*Триацилглицеролы6,79±0,699,52±0,847,19±0,67х***Эфиры холестерола27,75±1,7938,52±1,8431,29±1,35ххПримечание: *- p<0,05 по сравнению с контрольной группой, ** - p<0,01 по сравнению сконтрольной группой, *** - p<0,001 по сравнению с контрольной группой; х- p<0,05 посравнению с группой «дисбиоз», хх- p<0,01 по сравнению с группой «дисбиоз», ххх- p<0,001 посравнению с группой «дисбиоз».Выявлено снижение ХС в 1,1 раза, ЭХС в 1,2 раза, ТГ в 1,3 раза и МГ в 1,4раза в сравнении с группой «экспериментальный дисбиоз».

Количественныеизменения фракций ДГ и СЖК были ниже уровня достоверности.Зарегистрировано повышение активности ферментов АОЗ у животных,которым вводился эмоксипин после формирования лекарственного дисбиоза(таблица 21).Отмечено повышение активности фермента каталазы в плазме кровии в ткани кишечника в 1,7 раза и 1,5 раза соответственно.Таблица 21 – Активность ферментов АОЗ в условиях коррекции антиоксидантом.Группы животныхАктивность каталазы(М±m)ГомогенаттканиПлазма,кишечника,мкат/млмкат/г белкатканиАктивность супероксиддисмутазы(М±m)Плазма,у.е.Гомогенат тканикишечника,у.еКонтроль12,86±0,8714,11±0,8814,24±1,0314,23±1,03(интактные мыши)Дисбиоз10,20±0,78*10,12±1,62*11,50±0,77*7,79±1,22***Коррекция17,10±1,49ххх14,76±1,15х16,58±1,21ххх16,15±1,00 ххх«Эмоксипин»Примечание: *- p<0,05 по сравнению с контрольной группой, ** - p<0,01 по сравнению сконтрольной группой, *** - p<0,001 по сравнению с контрольной группой; х- p<0,05 по76сравнению с группой «дисбиоз»,сравнению с группой «дисбиоз».хх- p<0,01 по сравнению с группой «дисбиоз»,ххх- p<0,001 поСтатистически значимое повышение активности фермента СОД обнаруженов плазме и в колоноцитах мышей в 1,4 раза 2 раза соответственно.

Важноотметить, что полученные значения активности ферментов АОЗ достиглизначений группы контроля(интактные животные).При определении содержания продуктов ПОЛ было выявлено снижениеМДА в плазме крови в 1,6 раза, а в колоноцитах в 2,2 раза по сравнению споказателями группы животных с экспериментальным дисбиозом (таблица 22).Отмечено уменьшение АГП в плазме крови в 1,4 раза и в ткани кишечникав 2,4раза. Содержание МДА и АГП в колоноцитах, а также АГП в плазме крови неотличались от значений в контрольной группе.Таблица 22 – Содержание продуктов ПОЛ в условиях коррекции антиоксидантомСодержаниеСодержание ацилгидроперекисей,малонового диальдегида,у.е (М±m)мкмоль/г ткани (М±m)Гомогенат тканиГомогенатПлазма,кишечника,Плазма,тканимкат/млмкат/г белкау.е.кишечника,тканиу.еГруппы животныхКонтроль(интактные2,46±0,953,57±0,570,81±0,090,31±0,03мыши)Дисбиоз3,95±0,41**6,82±0,72***1,13±0,07**0,70±0,08***Коррекция2,49±0,18хх3,08±0,62ххх0,76±0,04ххх0,29±0,03ххх«Эмоксипин»Примечание: *- p<0,05 по сравнению с контрольной группой, ** - p<0,01 по сравнению сконтрольной группой, *** - p<0,001 по сравнению с контрольной группой; х- p<0,05 посравнению с группой «дисбиоз», хх- p<0,01 по сравнению с группой «дисбиоз», ххх- p<0,001 посравнению с группой «дисбиоз».***Профилактическоеиспользованиеантиоксидантаэмоксипинапривелокпоявлению в составе кишечного микробиоценоза бактерий рода Enterococcus,отсутствующихприлекарственномдисбиозе,тогдакакприпримененииантиоксиданта с целью коррекции изменений качественного иколичественного состава муцинового слоя толстого кишечника отмечено77увеличение количества кишечных палочек с нормальной ферментативнойактивностью, снижение численности эшерихий со сниженной ферментативнойактивностью, появление энтерококков.Введение экспериментальным животным эмоксипина до формированиягентамициновогодисбиозапозволилонормализоватьизменениявколичественном содержании фракций фосфолипидов (ЛФХ, ФИ/ФС, ФХ, КЛ иФЭ) и нейтральных липидов (ХС, ЭХС).

Также вызвало нормализациюактивности СОД в кишечнике, но не оказало существенного влияния наактивность фермента в плазме крови экспериментальных животных. Повышениеактивности каталазы обнаружено как в плазме крови, так и в ткани кишечника.Профилактическое применение антиоксиданта снижало концентрацию продуктовперекисного окисления липидов, но полученные значения определяемыхпоказателей не достигли контрольных.При проведении антиоксидантной терапии эмоксипином с целью коррекциинарушений липидного обмена, вызванных применением антибиотика широкогоспектра действия, происходило восстановление количественных показателей всехизученных фракций фосфолипидов мембран эритроцитов и некоторых фракцийнейтральных липидов, а именно ХС, ЭХС, МГ и ТГ.Коррекциявыявленныхэмоксипиномпридисбиозе,измененийвызвалаактивностиферментовАОЗ,достоверное повышение активностиферментов СОД и каталазы, как в плазме крови, так и в колоноцитахэкспериментальных животных.

Важно отметить, что полученные данныедостигли значений в группе интактных животных. Также отмечена нормализациясодержания продуктов ПОЛ (МДА и АГП) в плазме крови и колоноцитах мышей.Следовательно, использование эмоксипина с целью коррекции изменениймолекулярно-биохимическихэкспериментальныхпоказателейживотных,колоноцитовприводиткиплазмыповышениюкровиадаптивно-компенсаторных возможностей макроорганизма при экспериментальном дисбиозев большей степени выраженности, нежели применение данного препарата дляпрофилактики.78Таким образом, результаты наших исследований свидетельствуют о том,что эмоксипин не оказывает ингибирующего действия на качественный иколичественный состав микробиоценоза толстого кишечника, стабилизируетлипидный обмен, уменьшая выраженность мембрано-деструктивных явлений ивосстанавливая функциональное состояние клеток крови.Это может бытьобусловленовыраженнымантиоксидантным,антигипоксическиммембранопротекторным действием препарата антиоксидантного ряда [35].и79ГЛАВА 6ОСОБЕННОСТИ ИЗМЕНЕНИЯ ПРИСТЕНОЧНОЙ МИКРОФЛОРЫТОЛСТОГО КИШЕЧНИКА, МОЛЕКУЛЯРНО-БИОХИМИЧЕСКИХПОКАЗАТЕЛЕЙ КРОВИ И КОЛОНОЦИТОВ МЫШЕЙ ПРИ КОРРЕКЦИИЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ДИСБИОЗА ПРОБИОТИКОМ «РИОФЛОРАИММУНО НЕО» И АНТИОКСИДАНТОМ ЭМОКСИПИНОМ6.1 Изменения пристеночной микрофлоры толстого кишечника мышей прикоррекции экспериментального дисбиоза пробиотиком «РиоФлора ИммуноНео» и антиоксидантом эмоксипиномСочетанноеприменениеантиоксидантаэмоксипинаипробиотика«РиоФлора Иммуно Нео» с целью коррекции нарушений качественного иколичественногоположительноесостававлияниемикробиоценозанатолстогопредставительностькишечникамукознойоказаломикрофлорыэкспериментальных животных.Одновременное использование вышеупомянутых препаратов привело кувеличениючисленностиоблигатныхпредставителейтолстокишечногомикробиоценоза.

Количество бифидобактерий и эшерихий с нормальнойферментативной активностью возросло в 2,1 раза и составило lg 8,89±0,56 и lg8,13±0,86соответственно, а лактобактерий в 2,2 раза и составило lg 8,14±0,82(таблица 27).Таблица 27 – Влияние пробиотика «РиоФлора Иммуно Нео» и антиоксидантаэмоксипина на состав мукозной микрофлоры толстого кишечника мышейВыделенныемикроорганизмыE. colic нормальнойферментативной активностьюE. colicо сниженнойферментативной активностьюEnterobacterspp.Количество микроорганизмов, lgKOE/г (M±m)Группы животныхКонтрольДисбиозКоррекция(интактные мыши)«Эмоксипин» и«РиоФлораИммуно Нео»6,77±0,783,95±0,53**8,13±0,86ххх4,37±0,767,03±0,95*1,93±0,51*ххх4,47±0,792,37±0,56*7,21±1,00*ххх80Salmonella spp.5,65±0,666,44±0,864,12±0,73***Citrobacter spp.4,37±0,920±04,02±0,89хххEnterococcus spp.3,42±0,900±0***4,95±0,65ххх*Streptococcus spp.2,93±0,606,17±1,093,26±0,67хStaphylococcus2,74±0,604,10±0,752,86±0,56(коагулазоотрицательные)Staphylococcus aureus03,40±0,62***2,09±0,39***Proteus spp.04,01±0,66***1,07±0,30***ххх***Candida spp.1,26±0,324,94±0,741,29±0,40хххLactobacillus spp.6,15±0,703,73±0,77*8,14±0,82ххх**Bifidobacterium spp.7,93±0,934,24±0,728,89±0,56хххПримечание: *- p<0,05 по сравнению с контрольной группой, ** - p<0,01 по сравнению сконтрольной группой, *** - p<0,001 по сравнению с контрольной группой; х- p<0,05 посравнению с группой «дисбиоз», хх- p<0,01 по сравнению с группой «дисбиоз»,ххх- p<0,001 посравнению с группой «дисбиоз».Количество кишечных палочек со сниженной ферментативной активностьюна фоне терапии пробиотиком и антиоксидантом снизилось в 3,6 раза, чтосоставило lg 1,93±0,51.Содержаниеусловно-патогенныхвEnterobacterповысилось3разамикроорганизмовпосравнениюсродагруппой«экспериментальныйдисбиоз» и составило lg 7,21±1,00.Важно отметить, чтополученные значения достигли значений группы интактных животных.Численность бактерий рода Proteus после коррекции составила lg1,07±0,30(снизилась в 3,7 раза), но полученные данные были выше контрольныхЗарегистрировано появление в составе микробиоценоза толстого кишечникапредставителей родов Citrobacter и Enterococcus, lg КОЕ которых составил4,02±0,89 и 4,95±0,65 соответственно, в результате чего содержание энтерококковдостигло значений животных контрольной группы.КоличественныйпоказательфакультативныхмикроорганизмовродаStreptococcus снизился в 1,9 раза в сравнении с группой «экспериментальныйдисбиоз» и составил lg 3,26±0,67, в результате чего эти показатели достиглизначений группы контроля.Количество грибов рода Candida после введения антиоксиданта ипробиотика уменьшилось в 3,8 раза, Lg КОЕ которых составил 1,29±0,40,нополученные данные не достигли контрольных.81Достоверных изменений содержания коагулазоотрицательных, золотистыхстафилококков и сальмонелл зарегистрировано не было.6.2 Изменение молекулярно-биохимических показателей крови иколоноцитов мышей при коррекции экспериментального дисбиозапробиотиком «РиоФлора Иммуно Нео» и антиоксидантом эмоксипиномПосле совместного применения антиоксиданта эмоксипина и пробиотика«РиоФлора Иммуно Нео» с целью коррекции экспериментального дисбиозаотмечено достоверное изменение состава всех изученных фосфолипидныхфракций мембран эритроцитов экспериментальных животных (таблица 28).Таблица28–Количественныехарактеристикифосфолипидовмембранэритроцитов крови мышей в условиях экспериментального дисбиоза и егокоррекциипробиотиком«РиоФлораИммуноНео»иантиоксидантомэмоксипиномГруппаКонтроль(интактныемыши)животныхФосфолипиды(M±m)ДисбиозКоррекция«Эмоксипин» и«РиоФлораИммуно Нео»Лизофосфатидилхолин2,92±0,735,97±0,78**3,50±0,62х**Сфингомиелин7,23±0,2711,52±1,097,30±0,93ххФосфатидилинозитол/серин16,93±1,1911,35±0,95***15,04±0,88хх*Фосфатидилхолин14,75±1,0111,57±1,1015,41±0,85хКардиолипин2,51±0,231,41±0,17***2,89±0,28хххФосфатидилэтаноламин15,82±0,9611,28±1,17**15,11±0,86х***Примечание: - p<0,05 по сравнению с контрольной группой, - p<0,01 по сравнению сконтрольной группой, *** - p<0,001 по сравнению с контрольной группой; х- p<0,05 посравнению с группой «дисбиоз», хх- p<0,01 по сравнению с группой «дисбиоз», ххх- p<0,001 посравнению с группой «дисбиоз».КоличествоЛФХиСМснизилосьотносительногруппы«экспериментальный дисбиоз»в 1,7 раза и 1,6 раза соответственно.

Характеристики

Список файлов диссертации