Автореферат (1140768), страница 2

Просмтор этого файла доступен только зарегистрированным пользователям. Но у нас супер быстрая регистрация: достаточно только электронной почты!

Текст из файла (страница 2)

Также результаты данной работы являются одним из этаповвнедрения в клиническую практику гибридной матрицы и позволят минимизироватьморбидность в донорской зоне, избежать технических ограничений при проведенииреконструктивных операций на уретре.5Положения, выносимые на защитуМатрица на основе децеллюризированной артериальной стенки является безопасной,имеет низкую биореактивность, однако, обладает неодинаковыми сроками биодеградации.Матрицанаосноведецеллюризированнойартериальнойстенкиобладаетудовлетворительными структурно-функциональными свойствами.Матрица на основе децеллюризированной артериальной стенки обладает низкойцитотоксичностью, имеет удовлетворительную клеточную адгезию.Гибридная матрица на основе сетки из полилактогликолида и реконструированногоколлагена является безопасной, обладает низкой биореактивностью, имеет строгоопределенные сроки биодеградации.Гибридная матрица на основе сетки из полилактогликолида и реконструированногоколлагена обладает лучшими структурно-функциональными свойствами, чем матрица наоснове децеллюризированной артериальной стенки.Гибридная матрица на основе сетки из полилактогликолида и реконструированногоколлагена обладает низкой цитотоксичностью и удовлетворительной клеточной адгезией.Гибридная матрица на основе сетки из полилактогликолида и реконструированногоколлагена является безопасной и более эффективной в эксперименте.Наиболее оптимальной матрицей для заместительной уретропластики являетсягибридная матрица на основе сетки из полилактогликолида и реконструированногоколлагена.Личный вкладАвтору принадлежит ведущая роль в планировании, детальном описании и проведенииэкспериментов.

В работах, выполненных в соавторстве, автором лично проведеныэксперименты на животных, рассчитаны дозировки наркотических средств, оперативнаятехника изменена учитывая технические моменты проведения операции на животных,учтены анатомические особенности. Вклад автора является определяющим и заключается внепосредственном участии на всех этапах исследования: от постановки задач, ихтеоретической и экспериментальной реализации до обсуждения результатов в научныхпубликациях и докладах и непосредственного влияния на дальнейшие клиническиеисследования.Апробация результатов исследованияVII Всероссийской научно-практической конференции с МУ «Актуальные вопросыонкоурологии. Заболевания предстательной железы.

Новые технологии в урологии»Республика Башкортостан, г. Абзаково, 2015 г.6Конкурс молодых ученых в рамках V конгресса урологов Сибири, ГБОУ ВПО«Красноярскийгосударственныймедицинскийуниверситетим. проф.В.Ф.Войно-Ясенецкого» МЗ РФ, Красноярск, 2016г.Тезисы и постерный доклад на ежегодном съезде урологов США (AUA), San-Diego,2016.Диссертация апробирована на заседании кафедры урологии лечебного факультетаФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова (Сеченовский университет) 25 января 2018года.Внедрение результатов работы в практикуПроведенная оценка различных матриц для создания тканеинженерной конструкциипозволит выбрать лучшую матрицы и начать клинические исследования.Соответствие диссертации паспорту научной специальностиДиссертация соответствует шифру специальности 14.01.23 – Урология.

Урология –область науки, занимающаяся методами диагностики, лечения и профилактики заболеваниймочеполовой системы (почек, мочеточников, мочевого пузыря, мочеиспускательного канала,предстательной железы, органов мошонки, полового члена), за исключением заболеваний,передающихся половым путем (ЗППП). Совершенствование методов профилактики, раннейдиагностики и лечения заболеваний органов мочеполовой системы будет способствоватьсокращению сроков временной нетрудоспособности и восстановлению трудоспособности.Результаты проведенного исследования соответствуют области исследования специальности,конкретно пункту 3 – экспериментальная и клиническая разработка методов леченияурологических заболеваний и внедрение их в клиническую практику.Публикации:Основные положения диссертации опубликованы в 6 научных работах, в том числе 4публикации в журналах, рекомендованных ВАК.Объем и структура диссертацииДиссертация изложена на 82 страницах машинописного текста и включает введение,обзор литературы, материалы и методы исследования, главу, в которых изложенырезультаты собственных исследований, анализ результатов, выводы, предложения, списоклитературы.

Работа иллюстрирована 36 рисунками и 4 таблицами. Список литературывключает в себя 81 источник, из них 6 отечественных и 75 иностранных.7СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫМатериалы и методы исследованияВ работе оценивались свойства двух матриц для тканеинженерных конструкций:матрицы на основе децеллюляризированной трупной артерии человека (ДМТАС) игибридной матрицы на основе сетки из полилактогликолида и реконструированногоколлагена.Изъятие трупного материала производили в соответствии с приказами № 483 МЗСССР от 14.06.1972 и № 189 от 19.08.1993 в условиях морга в течение 24 ч послеконстатации смерти. Механически удаляли периартериальную клетчатку и фасциальныйфутляр, выделяли отходящие сосудистые ветви. Промывали водой (в течение 4 ч),физиологическим раствором (в течение 18 ч со сменой раствора каждые 6 ч), 1/15 Мраствором двухзамещенного фосфата натрия (в течение 8 ч).

Проводили ферментнуюобработку раствором террилитина при 40°С в течение 4 ч в фосфатном буфере с рН 7,5–8,0 ирасходе фермента 15–25 ПЕ/г влажной ткани. Промывали водой в течение 1 ч иобрабатывали 1 % раствором лимонной кислоты в течение 1 ч; обрабатывали фосфатнымбуфером с рН 7,0–7,5 в течение 4 ч и промывали водой 4 ч.

Контроль децеллюляризацииосуществлялиморфологически поотсутствию клеток. Промытые сосуды подвергалиотжиму салфетками для удаления избыточной влаги и упаковывали в двойной полимерныйпакет: первый из полиэтилена, второй из дублированной пленки полиэтилен–фольга.Проводили радиационную стерилизацию (доза 2,5 Мрад).Созданиегибриднойматрицыпозволяетсовместитьвсебепреимуществаискусственных и натуральных матриц.Для получения раствора коллагена последний извлекали из дермы крупного рогатогоскота.

Кусочки дермы обрабатывали раствором пепсина, тщательно отмывали, измельчали ирастворяли в растворе уксусной кислоты. Полученный таким образом раствор коллагенаразливаливкюветы.Междудвумяслоямиколлагенапомещалисеткуизполилактогликолида (VICRYL® (polyglactin 910) WovenMesh, Ethicon, Johnson&Johnson).Полученный гибридный материал замораживали, высушивали сублимационно до остаточнойвлажности 30% и прессовали до получения необходимой толщины.

Для увеличениямеханической прочности путем поперечного сшивания коллагена гибридный материалпомещали в пары формалина, после чего проветривали и отмывали от остатков формалинадо отрицательной реакции на присутствие альдегидов и проводили повторную сублимацию,а затем разрезали на фрагменты размером 1×1 см (для эксперимента на крысах) и 1×2 см (для8эксперимента на кроликах), упаковывали в индивидуальные полиэтиленовые пакеты истерилизовали гамма-излучением (доза 2,5 Мрад).Рисунок 1 и 2 – Внешний вид матриц на основе децеллюризированной артериальной стенки(слева) и гибридной (справа – видна )Для оценки биосовместимости и биодеградации образцы матрицы указанными вышеразмерами под внутримышечным наркозом имплантировали подкожно в межлопаточнуюобласть и фиксировали за четыре угла нерассасывающимся шовным материалом (пролен 4-0)белым лабораторным крысам (средняя масса тела 350 г) по 4 животных на каждуювременнуюточку(7-10,30,60и90дней).Рисунок 3 – Матрицы имплантированы в межлопаточную область крысы: а) ДМТАС б)гибридная матрица на основе сетки из полилактогликолида и реконструированногоколлагенаС целью оценки структурно-функционального результата проводили эксперимент на12 самцах кроликов 2-летнего возраста, средняя масса которых составила 3,5 кг для каждойматрицы.

Перед операцией выполнялась ретроградная уретрография по стандартнойметодике. Дренирование мочевого пузыря осуществляли силиконовым уретральнымкатетером Фолея № 6Сh в течение 7–10 дней после операции, на время дренированияуретральнымкатетеромпроводиласьантибактериальнаятерапияветеринарнымифторхинолонами. Животных выводили из эксперимента на 7, 30, 60, 90-е сутки после9операции (по 3 кролика на каждую временную точку) путем передозировки средств длянаркоза. В день выведения животных из эксперимента выполнялась ретрограднаяуретрография.

Характеристики

Список файлов диссертации