Автореферат (1140768), страница 4
Текст из файла (страница 4)
Всроки 1 и 3 мес уретрограммы значимо не отличались друг от друга (б). Через 6 мес послеоперации просвет уретры также сохранен, однако отмечалось формирование дивертикула взоне имплантации ДМТАС у одного кролика из 12 (в).Рисунок 8 – Ретроградные уретро(цисто)граммы кроликаа — до операции, уретра выделена фигурной стрелкой; б — через 1 мес после операции,зоны анастомозов указаны стрелками; в — через 6 мес после операции, дивертикул (указанстрелкой).15Сходнаярентгенологическаякартинанаблюдаласьпослезаместительнойуретропластики с использованием гибридной матрицы: признаков сужения просвета уретрынет, область имлпнатации матрицы рентгенологически не определяется, дивертикулов исвищей отмечено не было.Рисунок 9 – Уретрограммы кроликов после операции в соответствии со сроками выведенияиз экспериментаа – через 10 дней после уретропластики. б – через 30 дней после уретрограммы.
в - через 60дней после уретропластики. г – через 90 дней после уретропластики. на всех уретрограммахотсутствуют признаки сужения или облитерации уретры.Мочеиспускание восстановилось у всех животных в обоих случаях, как прииспользовании ДМТАС, так и гибридной матрицы, после удаления катетера и сохранялосьдо конца наблюдения. Признаков облитерации просвета уретры не обнаружено.Таким образом, матрицы на основе ДМТАС и сетки из полилактогликолида иреконструированного коллагена обладает хорошими функциональными свойствами.Морфологическое исследование показало, что биодеградация ДМТАС к 10–30-мсуткам после операции незначительна и отмечалась только на торцах протеза. К 30-м суткамвокруг имплантата формировалась соединительнотканная капсула, чаще всего отделеннаянебольшой щелью от его наружной поверхности.
Начиная с 10-х суток после операции состоронырезидентных(нативных)тканей16уретрынаблюдалсяпостепенныйростэпителиального пласта, который по своим характеристикам соответствует уроэпителию .Рост уроэпителия продолжался до полной эндотелизации к 60-90 суткам. Только к 60-мсуткам ДМТАС подвергалась деструкции и клеточной инфильтрации, а капсула протезаприобретала некоторые морфологические черты слизистой оболочки уретры.Таким образом, как и при подкожной имплантации матрица биодеградирует в срокидо 60 дней. Рост уроэпителия происходит с концов стенки уретры путем пролиферациинативного эпителия, находящегося на торцах протеза и продолжается под матрицей, а не поее поверхности – в щель между матрицей и капсулой.При гистологическом изучении на 10 сутки после заместительной уретропластики сиспользованием гибридной матрицы стенка интактной уретры (вне протеза) имеет обычнуюструктуру.
В области операции на стороне, обращенной к просвету уретры, обнаруживаютсянити сетки из полилактогликолида. Внутри сетки из полилактогликолида видны отложенияфибрина, скопления нейтрофилов, большей частью разрушенных, и макрофагов. К этомусроку губка (реконструированный коллаген) почти полностью резорбирована, кромеотдельных элементов на внутренней стороне протеза. Следует отметить, что нитиполилактогликолида также инфильтрированы фибрином и нейтрофилами с проникновениемих между филаментами. Однако, резорбции филаментов на этот срок не обнаруживается.На 30 сутки имплантированный материал не обнаружен. Большая часть внутреннейповерхности (за исключением середины) бывшего протеза к этому сроку выстланапереходнымнедифференцированным уроэпителием.
Эпителий располагается на рыхлойсоединительной ткани, богатой сосудами, с очагами инфильтрации лимфоцитами имакрофагами. Новообразованная соединительная ткань близка к структуре собственнойпластинки слизистой оболочки в интактной уретре. На 60 сутки эпителий, выстилающийвнутреннюю поверхность новообразованной на месте ТИК уретры, более дифференцирован,чем на 30-е сутки: он имеет типичную для уротелия многорядную структуру, но базальнаямембрана местами еще недостаточно дифференцирована. На 90 сутки уротелий имеетнативную структуру с полностью восстановленной базальной мембраной, четко виднысосочки регенерировавшей слизистой оболочки. Новообразованная слизистая оболочкапрактически не отличается от слизистой оболочки интактной уретры, причем она прочносоединена с мышечной оболочкой и кавернозным телом.
При гистологической оценкепроведенной уретропластики, определяются существенные различия, как и предполагалось взамещении трансплантата. В частности, происходило замещение сначала коллагена, а затеми полилактогликолида собственной соединительной тканью. Стоит отметить выраженный17ангиогенез в этой ткани и хорошо сформированную базальную мембрану регенерирующегоэпителия, что свидетельствует о его зрелости к 90-м суткам.МТТ-тестирование показало отсутствие токсичности исследуемых образцов обеихматрицы при использовании культур линейных фибробластов 3Т3 и С3Н.СучетомобнадеживающихрезультатовэкспериментовпоимплантацииДМТАСпосле проведения этической экспертизы и получения разрешения локальногоэтического комитета Первого МГМУ им.
И.М. Сеченова проведена заместительнаяуретропластика с использованием данной матрицы у человека.Ниже описано клиническое наблюдение уретропластики человека с применениемтканеинженерной конструкции на основе децеллюляризированной матрицы из трупнойартериальной стенки и клеток слизистой оболочки щеки.Больной Б., 1951 года рождения, с 2003 г. стал отмечать ухудшение мочеиспускания.В 2005г. диагностирована доброкачественнаявыполненапозадилоннаяаденомэктомия.гиперплазия предстательной железы,Послеудаленияуретральногокатетерамочеиспускание восстановилось. Спустя 1 мес. стал отмечать прогрессивное ухудшениемочеиспускания. При обследовании диагностирована стриктура уретры. С 2005 по 2013 г.выполнялись многократные бужирования уретры, оптические уретротомии с временнымположительнымэффектом.Поданнымрентгенологическихметодовобследования(ретроградная уретрография, микционная цистоуретрография) протяженность стриктурыпроксимальной части луковичного отдела уретры составила 2,5 см.Рисунок 10 – Данные ретроградной (а) и микционной цистоуретрографии (б).
Зоныстриктуры указаны стрелкойВ качестве матрицы использовалась описанная выше ДМТАС. В качестве клетокиспользовались эпителиоциты слизистой оболочки щеки для этого фрагмент слизистой18оболочки щеки размерами 5×5 мм иссекали под местной анестезией 2 % растворомлидокаина. Рана донорской зоны зажила первичным натяжением (без наложения швов). Изданногофрагментавыделялиикультивировалиэпителиоциты.Тканеинженернаяконструкция была доставлена в урологическую клинику в специальном термоконтейнере.Полученную тканеинженерную конструкцию имплантировали пациенту в проксимальнуючасть луковичного отдела уретры по технике Asopa (dorsalinlay).Рисунок 11 – Этапы операцииа – доступ к луковичному отделу уретры (буольспонгиозные мышцы сохранены); б –выполнена вентральная уретротомия;в -выполнена дорсальная уретротомия; г –тканеинженерная конструкция фиксирована к уретральной площадке по дорсальнойповерхности уретры.На 28-й день после операции уретральный катетер удален, выполнены ретроградная имикционная цистоуретрография, урофлоуметрия, проведена оценка объема остаточной мочи.Полученные в ходе адаптации формы и размеров тканеинженерной конструкции под форму19и размеры уретральной площадки фрагменты тканеинженерной конструкции былиподвергнуты гистологическому исследованию.Результаты.
Гистологическое исследование срезов эпителизированной матрицыпоказало,чтоклеткиэпителиальногостроенияформируютслойнавнутренней(интимальной) поверхности матрицы.Рисунок 12 – Фрагмент тканеинженерной конструкции: клетки эпителиального строенияформируют слой на внутренней (интимальной) поверхности матрицыТечение послеоперационного периода без особенностей. Через 4 нед. после операцииуретральный катетер был удален.
По данным ретроградной уретрографии и микционнойцистоуретрографии стриктур и затеков контрастного вещества в зоне операции не выявлено.Максимальная скорость мочеиспускания составила 24,6 мл/с, средняя — 16,3 мл/с, приобъеме 132 мл без остаточной мочи. Спустя 4 мес. после операции у пациента былдиагностированрецидивстриктурыуретры.Выполненыуретроскопия,оптическаяуретротомия. При уретроскопии выявлено, что рецидив стриктуры возник вне зонырасположениятканеинженернойконструкции(награницедистальнойчаститканеинженерной конструкции и нативной уретры). В течение последующих 8 мес. пациентудважды выполнялось бужирование уретры в связи со снижением интенсивности струи мочи.Спустя год после тканеинженерной уретропластики при обследовании был выявлен рецидивстриктуры луковичного отдела уретры.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
