Автореферат (1140611), страница 3
Текст из файла (страница 3)
2). Пациентам с ХГПклиническое и молекулярно-генетическое исследование проводили еще дважды (всроки 30 и 90 дней после лечения, а ортопантомографию – через 90 дней послелечения.Таблица 2Общее количество проведенных исследований№ Методы исследованияп/п1.2.3.Материал исследования исрокиКлиническое стоматологическое обследованиепо стандартной схеме с определением индексагигиены Green–Vermillion, степеникровоточивости десны по Műhlemann-Cowell,средней глубины пародонтальных карманов,степени подвижности зубов по шкале Miller–FleszarЦифровая ортопантомография на аппаратеOrthophos XG 5 («Sirona», Германия)ПЦР исследование в реальном времени сопределением в содержимом десневойбороздки/ пародонтальных карманов общейбактериальной массы, 5 пародонтопатогенов(A. actinomycetemcomitans, P.
gingivalis,P.intermedia, T. denticola, T. forsythia) и двухпотенциальных пародонтопротекторов(V. parvula и S. sanguinis) (по 4 образца отодного участника при каждом исследовании и 8реакций для каждого образца) с применениемтест-систем и детектирующего амплификатора«ДТ–96» (ООО «НПО ДНК–Технология»,Россия)1450 лиц с интактнымпародонтом – однократнов начале исследования,100 пациентов с ХГП трижды: до лечения, через30 и 90 дней послелечения50 лиц с интактнымпародонтом – однократнов начале исследования,100 пациентов с ХГП дважды: до лечения ичерез 90 дней послелечения50 лиц с интактнымпародонтом – однократнов начале исследования,100 пациентов с ХГП трижды: до лечения, через30 и 90 дней послелеченияКоличествоисследований3502501400образцовмикрофлоры,11200исследованийметодомПЦР вреальномвремениДля исследования состава микрофлоры у каждого пациента с помощьюбумажных штифтов отбирали по четыре образца поддесневого содержимого: дваобразца с верхней челюсти и два – с нижней челюсти с каждой стороны.Из полученных образцов с помощью реактивов «Проба–ГС» (ООО «НПОДНК–Технология», Россия) выделяли суммарную ДНК, которую анализировалинасодержаниеобщейбактериальнойДНК,пятипародонтопатогенов(P.
gingivalis, A. actinomycetemcomitans, T. forsythia, T. denticola, P. intermedia) идвухкандидатныхпародонтопротекторов(V. parvulaиS. sanguinis)сприменением ПЦР в реальном времени в формате Taqman. Показатель пороговогоцикла, полученный при исследовании каждого конкретного бактериального вида,нормировали на сигнал общей бактериальной массы (16S рДНК), получаяпоказатель, характеризующий долю бактерии в составе исследуемого микробиома– относительный Ct.
Эти показатели использовали для усреднения по группам.В обеих основных группах (2 и 3) пациентов с ХГП комплексное лечениевключало обучение пациентов гигиеническому уходу за полостью рта ипрофессиональную гигиену. Дополнительно пациентам основной группы 2проводили антимикробную обработку пародонтальных карманов с применениемгеля «Метрогил-Дента» («Юник Фармасьютикал Лабораториз»), осуществляяэкспозицию препарата в течение 30 мин. Затем эту процедуру проводилиежедневно в течение 7 дней.В основной группе 3 проводили антимикробную фотодинамическую терапиюсиспользованиемгеля-фотосенсибилизатора«Гелеофор»исветодионогоисточника света АФС «Спектр» (ООО «Лазер-медцентр», Россия).
Обработанныеучастки десны с нанесенным фотосенсибилизатором облучали в течение 10 мин(рис. 1). Каждый пациент получал три сеанса фотодинамической терапии синтервалом 2 суток. Световая доза оставляла 6 Дж/см2.Статистическую обработку данных проводили с помощью пакета Statistica 8,0для Windows по стандартным методикам вариационной статистики. Длясравнения достоверности различий между группами по исследуемым параметрамиспользовали непараметрические критерии Краскела–Уоллиса и Манна–Уитни.15Рисунок 1. После удаления зубных отложений пациентам основной группы 3 проводилиобработку пародонтальных карманов гелем «Гелеофор» и облучали с помощьюсветодиодного аппарата АФС «Спектр».Результаты собственных исследований и их обсуждениеРезультаты исследования показали, что на фоне проводимого комплексноголечения с использованием геля «Метрогил-дента» пациенты основной группы 2отмечали улучшение как субъективных, так и объективных проявленийзаболевания: уменьшались болезненность и кровоточивость десен, галитоз.
Приобъективном обследовании через 30 дней после лечения отмечали уплотнениедесневогокраязасчетуменьшенияотека,существенноеулучшениегигиенического состояния полости рта, прекращение выделения экссудата изпародонтальных карманов (рис. 2).до лечениячерез 30 дней после леченияРисунок 2. Динамика состояния тканей пародонта у пациента с ХГП тяжелой степеничерез 30 дней после комплексного консервативного лечения с местным применениемпрепарата «Метрогил-Дента».В основной группе 3, где проводили фотодинамическую терапию, через 30днейпослекомплексноголечениявсепациентыотмечалиснижениекровоточивости десен при чистке зубов, исчезновение неприятного запаха изо16рта, гноетечения из ПК. Объективное обследование показало, что у пациентовотсутствовали признаки активного воспаления в тканях пародонта (рис.
3).до лечениячерез 30 дней после леченияРисунок 3. Динамика состояния тканей пародонта у пациента с ХГП тяжелой степеничерез 30 дней после комплексного консервативного лечения с применениемфотодинамической терапии.Необходимо отметить, что у пациентов группы 3, где в комплексноеконсервативное лечение включали фотодинамическую терапию, отмечалось болеевыраженное улучшение гигиенического состояния рта и снижение степеникровоточивости десны при зондовой пробе.Через 30 дней после лечения среднее значение индекса гигиены Green–Vermillion у пациентов группы 2 снизилось на 67,9%, а в группе 3 – на 75,9%.Через 90 дней после консервативного лечения у пациентов группы 2 среднеезначение индекса гигиены было ниже на 35,7% по сравнению с исходнымуровнем, а в группе 3 – на 55,1% (рис. 4).Рисунок 4.
Процент снижения средних показателей индекса гигиены Green–Vermillionчерез 30 и 90 дней после комплексного консервативного лечения у пациентов групп 2 и 3.17Через 30 дней после начала лечения средние значения индекса MűhlemannCowell снизились на 47,6% в группе 2 и на 69,5% – в группе 3. Через 90 днейзначения индекса Műhlemann-Cowell в группе 2 были ниже, чем до лечения, на28,6%, а в группе 3 – на 65,2% (рис.5).Рисунок 5. Процент снижения средних показателей индекса кровоточивости MűhlemannCowell через 30 и 90 дней после комплексного консервативного лечения у пациентовгрупп 2 и 3.В рамках исследования нами проанализировано при помощи ПЦР в реальномвремени влияние на микробиом пародонта стандартного консервативного леченияпародонтита и фотодинамической терапии.
Так, были установлены референсныезначенияпоказателейотносительногоCtнормы,длясоответствующиепародонтопатогеновмедианнымизначениямпотенциальныхпародонтопротекторов у лиц с интактным пародонтом: A. actinomycetemcomitans –14,1, P. gingivalis – 15,8, P. intermedia – 17,5, T. forsythia – 15,0, T. denticola – 17,0,V. parvula – 11,4, S. sanguinis – 12,9 (рис. 6).Также были установлены изменения состава поддесневой микрофлоры,характерныедляисследованнойгруппыпациентовсхроническимгенерализованным пародонтитом средней и тяжелой степеней. У пациентов сХГП по сравнению с группой лиц с интактным пародонтом отмечался болеевысокий показатель общей бакмассы (в 20 раз), а также существенноепревышениеотносительногосодержанияпародонтопатогеноввобразцахмикрофлоры ПК: P.
gingivalis – в 64 раза, T. forsythia – в 180 раз, T. denticola – в 45раз. Относительное содержание A. actinomycetemcomitans и18P. intermedia упациентов с ХГП было на уровне соответствующих показателей контрольнойгруппы.Рисунок 6. Содержание микроорганизмов в образцах поддесневой микрофлоры у лиц синтактным пародонтом (группа 1 – контрольная) и пациентов с ХГП до лечения (группы2 и 3). Указаны средние значения порогового цикла – Сt.При исследовании потенциальных пародонтопротекторов у пациентов с ХГПпо сравнению с группой лиц с интактным пародонтом было выявлено болеенизкое содержание V.
parvula (в 8 раз) и S. sanguinis (в 7 раз).Через 30 дней после окончания курса лечения у пациентов с ХГП группы 2общая бактериальная обсемененность пародонта снизилась в среднем в 7 раз.Однакоотносительноесодержаниепародонтопатогеновпрактическинеизменилось, за исключением A. actinomycetemcomitans, медианное значениеотносительного Ct которого увеличилось с 16,3 до 19,2, что соответствовалоснижению относительной доли этого вида в 7,5 раз в терминах к.о.е.
Негативнымрезультатом традиционного консервативного лечения, следует считать снижениев среднем в 2 раза относительного содержания представителей комменсальноймикрофлоры полости рта: V. parvula и S. sanguinis.19Сохранение основных пародонтопатогенов в микробном консорциуме ПКспособствовало кратковременному действию лечебного эффекта, так как втечениетрехмесяцевпослеокончаниялеченияоставшиесяпатогенывосстанавливали свою численность до исходного уровня.Использование ФДТ в составе комплексного лечения показало наличиеопределенных отличий по характеру воздействия на микробный консорциумпародонта по сравнению с традиционной антимикробной обработкой.
Через 30дней после окончания курса фотодинамической терапии у пациентов основнойгруппы 3 выявлено достоверное уменьшение доли в поддесневом микробиомеA. actinomycetemcomitans (в 14 раз), P. gingivalis (в 16 раз), T. forsythia (в 8 раз) иT. denticola (в 40 раз). Положительная динамика была выявлена в относительномсодержании потенциальных пародонтопротекторов: доля V. parvula увеличилась в2 раза, а доля S. sanguinis – в 11 раз.Эти данные позволяют говорить о более высокой эффективности ФДТ всравнении с традиционной антимикробной терапией ХГП.
Дополнительнымплюсом ФДТ в этом случае является и его более мягкое воздействие напотенциальныепародонтопротекторыпосравнениюстрадиционнойантимикробной терапией.Таким образом, перспективные методы элиминации пародонтопатогенов изподдесневого микробиома должны быть щадящими в отношении потенциальныхпародонтопротекторов V.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
