Автореферат (1140060), страница 3
Текст из файла (страница 3)
Активность супероксиддисмутазыи каталазы оценивали методом прямого/конкурентного твердофазного иммуноферментного анализа. Антиокислительную активность оценивали способом ингибирования аскорбат- и ферроиндуцированного окисления твина-80 до МДА. Уровень стабильных метаболитов оксида азота определяли спектрофотометрическим методом при помощи реактива Грисса и детекцией образовавшихся продуктов при спектре волны 540 нм. Фиксация всех полученных данных производилась при помощи микропланшетного фотометра «Sunrise», Tecan (Австрия).Статистическая обработка полученных результатовСтатистическую обработку полученных результатов исследования проводили пообщепринятым критериям вариационно-статистического анализа с вычислением средних величин (M), ошибки средней арифметической (m) с помощью пакета компьютерных программ Microsoft Excel (2010).
При сравнении количественных данных использовали U-тест Манна-Уитни. Корреляционный анализ проводили, используя коэффициентранговой корреляции Спирмена. Статистически значимыми считали различия с p≤0,05.По всем исследуемым показателям рассчитывали коэффициент диагностической ценности.РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯИммунные и оксидантные нарушения на системном и локальном уровняхпри остром серозном и гнойном пиелонефритеПроводя анализ изменений в стандартных лабораторных показателях до началабазисного лечения у пациентов с серозной формой пиелонефрита, нами выявлено повышение уровня лейкоцитов с увеличением палочкоядерных нейтрофилов в лейкоцитарной формуле, повышение лейкоцитарного индекса, индекса сдвига лейкоцитов иСОЭ.
В биохимическом анализе крови увеличивался уровень креатинина крови, уровеньСРБ. В моче было повышенным количество лейкоцитов, эритроцитов, эпителиальныхклеток, высоким было и содержание микроальбумина. Во второй группе эти изменениябыли более выраженными в своих значениях в сравнении с первой группой, что соответствовало стадии гнойного воспаления.У больных ОСП перед началом базисного лечения в плазме крови выявлено повышение концентрации провоспалительных цитокинов: IFNα, TNF, IL-2, IL-8, IL-1RA, и10разнонаправленное изменение противовоспалительных цитокинов. У больных ОГП выявлено увеличение уровня провоспалительных, IFNα, IL-2 и снижение противовоспалительных цитокинов. Изучая состояние системы комплемента у больных ОСП перед лечением, в плазме крови установлено повышение концентрации компонентов системыкомплемента (С4, С5а, С5), но понижение С3 и С3а, ингибиторов системы комплемента(С1-инг.
и фактора Н). Повышались все классы исследуемых нами иммуноглобулинов(A, M и G), однако уровень ЦИК понижался. При изучении показателей больных ОГПперед базисным лечением определены схожие по направленности с ОСП изменения показателей иммуноглобулинов и системы комплемента, за исключением нормальногоуровня ЦИК и повышенного уровня фактора Н (табл.
1)Таблица 1Цитокиновый спектр, иммуноглобулины и компоненты системы комплемента у больных острым пиелонефритом (M±m)ЕдиниПоказа- цытелиизмере-1Здоровыепкг/345Больные острым пиелонефритомсерозныйгнойныйдолеченияпослелечениядолеченияпослелечения5,8±0,736,8±1,9*132,0±2,7*123,6±1,6*1,222,2±1,2*13,8±0,320,4±1,1*118,75±1,4*114,3±1,0*1,213,1±1,0*1нияТNFα2млIL -1βпкг/млIL-8пкг/мл24,7±1,952,6±2,3*147,8±2,5*155,2±3,6*1290,5±17,1*1,4IFNαпкг/мл6,2±0,827,3±1,7*123,9±1,8*1167,3±5,1*1,2162,4±4,8*1IL -2пкг/мл0,2±0,03182,5±8,4*1191,6±8,1*133,9±1,4*1,221,2±1,2*1,4IL -10пкг/мл2,9±0,0511,9±1,1*112,9±1,3*11,3±0,09*1,26,5±0,7*1,4123,4±2,1*1122,7±2,2*1326,4±13,3*1,2437,2±14,5*4IL-1RAпкг/ 450,4±12,7мл11ПродолжениеС3мг/дл58,3±4,140,2±3,1*139,4±2,8*129,5±2,5*1,225,8±3,1*1,5С3aнг/мл45,4±3,322,4±1,1*122,8±0,9*113,2±1,1*1,27,0±0,4*1,4,5C4мг/24,8±2,148,1±3,9*140,4±4,0*136,1±3,3*1,240,2±4,6*1,58,3±0,617,8±1,2*115,7±1,7*112,5±0,9*1,211,8±0,7*1,53,8±0,075,1±0,05*15,0±0,05*114,8±0,4*1,211,4±0,8*1,4,5203,5±11*1224,2±12,5107,5±8,7*1,2168,7±13,9*1,4,5длнг/C5млС5аС1-инг.нг/млмкг/ 250,1±15,5млФакторНмкг/мл142,3±8,4107,7±7,3*1113,5±2,7*1239,7±7,2*1,2165,1±4,2*1,4,5IgMмг/3,7±0,25,1±0,7*16,4±0,8*14,5±0,4*15,7±0,9*1млIgGмг/мл7,9±0,626,6±1,2*126,1±1,1*125,1±0,8*125,5±1,0*1IgAмг/мл1,6±0,082,6±0,05*12,8±0,04*14,4±0,3*1,24,0±0,2*1ЦИК%92,6±2,472,7±3,9*182,1±2,3*1,289,5±5,3*262,1±5,0*1,4Примечание.
Звездочкой отмечены достоверные отличия средних арифметических(p < 0,05); цифры рядом со звездочкой – по отношению к показателям какой группы даны эти различия.При изучении функционально-метаболической активности нейтрофильных гранулоцитов, исследуемых в периферической крови у больных ОСП, на момент поступления в стационар было выявлено уменьшение интенсивности и активности фагоцитоза.Повышалась и кислородзависимая активность полиморфноядерных лейкоцитов. ТестыНСТ-ст. и НСТ-сп. были значительно выше показателей контрольной группы. В группеОГП показатели интенсивности и активности фагоцитоза в сравнении с контрольнойгруппой и группой ОСП были снижены.
Что касается кислородзависимых систем у пациентов с ОГП, их активность отличалась от показателей группы контроля, а именноНСТ-ст. выше в 3,2 раза, а НСТ-сп. в 8,7 раза, показатели ИСН и ФРН были равномерно12снижены. Сравнивая показатели пациентов с ОГП и пациентов с ОСП, отмечали, чтопоказатели ИСН и ФРН были еще более снижены, а показатели НСТ-ст. и НСТ-сп. выше.При изучении оксидантных показателей первой группы (больные ОСП) до проведения базисной терапии выявлена активация процессов ПОЛ, в плазме крови были повышены концентрации АГП и МДА, но снижены СМNO и ОАА. Повышенными такжеоказались активность каталазы и содержание СРБ.
Без изменений остались уровни СОДи неоптерина. В группе больных острым гнойным пиелонефритом показатели оксидантного статуса менялись однонаправленно с показателями при серозном пиелонефрите,исключение составила повышенная активность СОД. В сравнении с пациентами с ОГПимелось значительное повышение таких показателей, как: АГП, МДА, а также СМNO,который вообще был снижен в группе с серозной формой пиелонефрита. Сниженнымиже были показатели СОД, ОАА, каталазы и неоптерина. Что касается выявленных изменений оксидантного статуса мочи, то у пациентов с ОСП были повышены уровниМДА, АГП, каталазы и стабильные метаболиты азота, при этом сохранялись нормальные показатели неоптерина и СОД.
У пациентов с ОГП изменения были более выражены.В моче пациентов с ОСП была повышенной концентрация всех исследуемых нами цитокинов. Исключение составил IL-4, который имел нормальное значение, и IL1RA, значение которого было снижено относительно нормы. Также установлены повышенные концентрации содержания С5- и С3-компонентов комплемента, при этом нормальными остались остальные показатели системы комплемента.Клинико-лабораторная эффективность базисного леченияострого гнойного и серозного пиелонефритаПосле лечения практически все стандартные показатели нормализовались илиприближались к нормальным значениям.
Анализируя эффективность лечения по показателям иммунного статуса пациентов с ОСП, нами не выявлено достоверных отличий вуровне цитокинов. У пациентов с ОГП, после оперативного пособия, в сравнении с показателями на момент поступления, выявлено продолжающееся повышение уровня IL8. На момент выписки установлена нормализация уровня IL-1RA, снижение концентрации IL-2, но не до уровня здоровых пациентов из контрольной группы, увеличение кон-13центрации IL-10 и IL-8, в сравнении с данными, полученными при поступлении. Показатели IFNα, IL-1β и TNF плазмы крови не менялись в сравнении с данными, полученными при госпитализации в урологическое отделение.При изучении динамики показателей системы комплемента у пациентов с серозной формой пиелонефрита при выписке было выявлено повышенное содержание С1-инг.Кроме того, остаются повышенными концентрации ЦИК и исследуемых иммуноглобулинов (A, G и M).
Показатели пациентов с гнойной формой пиелонефрита изменялисьпосле оперативного пособия: повышались уровни С4- и С5-компонентов комплемента,снижались концентрации ЦИК и фактора Н. При выписке этих пациентов в контрольных анализах отмечалось стойкое снижение концентрации ЦИК, С3а- и С5а-компонентовкомплемента, увеличение содержания ингибиторов системы комплемента.Активность кислородзависимых систем была повышенной по сравнению с группой здоровых доноров.
После базисного лечения нормализовался лишь только ИСН. Упациентов второй группы отмечалось уменьшение показателей фагоцитоза. Значениякислородзависимых систем нейтрофилов после лечения отличались в группах донорови пациентов с серозной и гнойной формой пиелонефрита. Нормализовались показателисистемы комплемента, ФРН, ИСН и НСТ-тесты (табл .2).Таблица 2Функционально-метаболическая активность нейтрофилов периферическойкрови больных острым пиелонефритом (M±m)Еди-123ни-серозныйизмездоро-ре-выеность иинтен-ФИ%ФЧабс.гнойныйдопоследопослелечениялечениялечениялечения79,1±3,146,8±3,2*143,9±3,1*157,8±4,2*1,258,6±3, 1*1,37,1±0,35,6±0,22*15,6±0,32*15,1±0,31*15,5±0,22*1нияАктив-5Больные острым пиелонефритомцыПоказатели414Продолжениесивностьфагоци-ИАФ-5,6±0,12,6±0,12*12,5±0,17*12,9±0,11*1,23,2±0,14*1,3%7,9±0,425,7±2,4*122,1±2,5*168,7±2,4*1,255,4±2,7*1,3,4%23,3±3,464,2±2,1*162,1±2,0*174,6±2,1*1,269,4±1,1*1,3,4тозаАктив-НСТ-ностьсп.кисло-НСТ-род-стим.зависи-ФРН%15,4±1,138,5±2,7*140,0±2,6*15,9±0,2*1,214,0±1,3*3,4ИСН-3,0±0,072,5±0,1*12,8±0,21,1±0,02*1,21,3±0,06*1,3,4мыхсистемПосле базисного лечения у пациентов с серозной формой пиелонефрита нормализовался показатель ОАА, но снизилась концентрация МДА, повысилась активностьСОД.