Диссертация (1139934), страница 2
Текст из файла (страница 2)
Подобные конструкции нашли своеприменение при хирургическом лечении абдоминальных и диафрагмальныхгрыж (Zheng M.H., Chen J., 2005; Kaleya R.N., 2005; Novi J.M., Mulvihill B.K.,2005; Morini F., Bagolan P., 2012; Разумовский А.Ю., Мокрушина О.Г, 2016),однако сведения о применении данных конструкций в хирургии тазового днаносят единичный характер (Jensen K.K., Rashid L., 2014; Хубезов Д.А., ТрушинС.Н., 2016) и является преимущественно зарубежным опытом 79, 46, 65, 63, 105,44, 110.Цель исследованияРазработка новых подходов к хирургическому лечению тазового пролапсапутем создания тканеинженерной конструкции на основе используемыхимплантатов и аутологичного клеточного материала.Для достижения указанной цели нами были поставлены следующие задачи:61.Разработать технологии получения культур мезенхимальных стромальныхклетоккостногомозгаидермальныхфибробластовкрысиихиммобилизации на образцах эндопротезов, применяемых в хирургии.2.Создать тканеинженерные конструкции и на основе бионедеградируемых,биодеградируемых и композиционных материалов, с использованиемклеточного компонента, представленного мезенхимальными стромальнымиклетками костного мозга и дермальными фибробластами крыс.3.Провестиэкспериментальныеимплантациилабораторнымживотнымтканеинженерных конструкций и бесклеточных образцов материалов длясравнительной оценки тканевых реакций.4.Провести оценку результатов гистологического и иммуногистохимическогоисследований для сравнительной оценки тканевой реакции на имплантациютканеинженерных конструкций у лабораторных животных.5.Создать тканеинженерную конструкцию с использованием аутологичныхдермальных фибробластов человека.Новизна исследований1.ВпервыевРоссиибылиразработанытехнологическиеприемыиммобилизации адгезивных клеток на хирургических материалах длясоздания тканеинженерных конструкций на основе разрешенных вмедицинскойпрактикебионедеградируемыхдецеллюляризированныегинекологическихимплантатов(полипропилен),биодеградируемыхнативныеиматрицы)из(викрил,композиционныхматериалов и аутологичного клеточного компонента, представленногомезенхимальными стромальными клетками костного мозга и дермальнымифибробластами крыс.72.Впервые подтверждена эффективность применения ТИК по сравнению сбесклеточными гинекологическими материалами при имплантации крысамна основе их биосовместимости.3.Впервые проведен сравнительный анализ эффективности мезенхимальныхстромальных клеток из костного мозга и дермальных фибробластов прииспользовании данных культур клеток в качестве клеточного компонентаТИК, имплантируемой крысам.Практическая значимостьРазработан способ иммобилизации адгезивных клеток на хирургическихматериалах для создания тканеинженерных конструкций, на основе разрешенныхдля использования в медицинской практике гинекологических имплантатов.Определены критерии возможности применения ТИК для имплантации наоснове данных о полноте клеточного покрытия и жизнеспособности клеток всоставе ТИК.Полученныепредпосылкирезультатыиспользованиясоздаюттеоретическиетканеинженерныхиконструкцийбиомедицинских клеточных продуктов (в соответствии с ФЗпрактическиевкачестве180) длявосстановления фасциальных дефектов тазового дна у пациенток с различнымивидами пролапса, что позволит снизить количество ранних и позднихпослеоперационных осложнений.Положения, выносимые на защиту1.Хирургические имплантаты, применяемые в гинекологической практике,можно использовать без дополнительной модификации поверхности вкачестве каркаса для адгезионных культур клеток в составе тканеинженернойконструкции.2.Аутологичные дермальные фибробласты и мезенхимальные стромальныеклетки костного мозга при создании тканеинженерной конструкции8способны к формированию многослойного клеточного покрытия на всейповерхности используемых имплантатов.3.Тканеинженерные конструкции с аутологичным клеточным компонентомобеспечиваютболеесоединительнотканныхтканеинженернуюбыстроеструктурфасцию,вформированиеобластикотораяможетизрелостьимплантации,бытьформируяпримененаприреконструкции тазового дна.Достоверность научных положений и выводовГлубокое изучение и анализ отечественных и зарубежных источниковлитературы позволили получить объективное представление о проблемах,возникающих во время хирургического лечения тазового пролапса, определитьцели, задачи и методы исследования.
На основании результатов проведенногоэкспериментальногоисследованиясприменениемморфологического,микроскопического, иммуногистохимического методов диагностики, а так жеоценки степени тканевой реакции удалось усовершенствовать хирургическуюкоррекцию пролапса гениталий путем создания тканеинженерных конструкцийнаосновехирургическихэндопротезов,применяемыхвпрактикеиаутологического клеточного компонента (мезенхимальных стромальных клетоккостного мозга и дермальных фибробластов). Результаты диссертационногоисследования основаны на достаточном для получения количестве результатов ивыводов материала.Научные результаты исследованиявнедрены в практическую работуКлиники акушерства и гинекологии им. В.Ф.
Снегирева и отдела передовыхклеточных технологий Института регенеративной медицины ФГАОУ ВО ПервыйМГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет).9Личный вклад автораВклад автора является определяющим на всех этапах исследования исостоит в выборе направления исследования, постановке цели и задач, разработкеплана исследования, выборе методов для его реализации. Лично авторомпроизводились заборы биологического материала для получения клеточнойкультуры (пункция эпифиза бедренной кости и забор участка дермы улабораторных животных), разработка экспериментальной модели фасциальногодефектаналабораторныхживотных,отработкатехникиимплантациихирургических матриц в подапоневротическое пространство на переднейбрюшнойстенкеивмежлопаточнуюобласть,проведениеанестезиилабораторным животным во время проведения хирургических вмешательств,проведениеимплантациитканеинженерныхконструкцийиконтрольныххирургических сеток лабораторным животным, забор образцов тканеинженерныхконструкцийсокружающимитканяминагистологическоеииммуногистохимическое исследование, подготовка срезов из парафиновыхблоков для дальнейшего проведения патоморфологического исследованияматериаловэксперимента.Наоснованиипроведенияхирургическихманипуляций проводилось протоколирование этапов исследования.Автором проведена большая работа по доклиническому исследованию на 55лабораторных животных (крысы породы Вистар), отработаны экспериментальнаямодельнесостоятельноститканеинженерныхфасциальныхконструкцийнадефектов,основеметодикаполучениябионедеградируемых,биодеградируемых и композитных матриксов с применением аутологичногоклеточного компонента (мезенхимальные стромальные клетки костного мозга идермальныефибробластыэскпериментальногокожиисследованиякрысы).служилоЗаключительнымсозданиеэтапомтканеинженернойконструкции на биодеградируемом сетчатом имплантате с применениемдермальныхфибробластовкожичеловека(использовалиськлеткикожиисследователя).
Выводы и практические рекомендации автора диссертации10основаны на результате проведенных лабораторных исследований в условиях invitro и in vivo.Таким образом, вклад автора является определяющим и заключается внепосредственном участии во всех этапах исследования: от постановки задач дообсуждения результатов и формулировки аргументированных выводов.Апробация результатов исследованияАпробация диссертации состоялась 21.03.2018 г. на совместной научнойконференции кафедры акушерства и гинекологиифизиологиилечебногофакультетаФГАОУ1 и кафедры патологическойВОПервыйМГМУимениИ.М.
Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет).Материалы и основные положения работы доложены и обсуждены:на Российской научно-практической конференции с международным участием«Снегиревские чтения» (г. Москва, 26 февраля 2016 г.); на Общероссийскомсеминаре«РепродуктивныйпотенциалРоссии:версияиконтраверсия»Московские чтения (г. Москва, 15 апреля 2016 г.); на Международнойконференции «Репродуктивная медицина: взгляд молодых -2016» (г.
СанктПетербург, 22 апреля 2016г.) За лучший устный доклад награждена Премиейимени Д.О. Отто; на XVII Всероссийском научно-образовательном форуме“Мать и дитя» (г. Москва, 27-30 сентября 2016 г.) Награждена Дипломом IIIстепени в конкурсе молодых ученых; на XVIII Международном конгрессе«Здоровье и образование в XXI веке» (г.
Москва, 14-17 декабря 2016 г.); наРоссийской научно-практической конференции с международным участием«Снегиревские чтения» (г. Москва, 27 февраля-1 марта 2017г.); на IIIВсероссийской 14 межрегиональной с международным участием научной сессиимолодых ученых и студентов «Современное решение актуальных научныхпроблем медицины» (г. Нижний Новгород, 15-16 март 2017 г.) НагражденаДипломом за 1 место в конкурсе молодых ученых; на X Общероссийскомсеминаре «Репродуктивный потенциал России: версии и контраверсии», (г. Сочи,119–12 сентября 2017 г.); на XVIII Всероссийском научно-образовательном форуме«Мать и Дитя – 2017» (г.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
