Диссертация (1139701), страница 31
Текст из файла (страница 31)
Динамика изменения толщины периневрия, имела ту жетенденцию и толщина его к окончанию эксперимента статистически значимо(р≤0,05) уменьшилась в 2 раза.Рисунок 83 – Тотальный препарат нервных волокон нервов сгибателейв области средней трети плеча при гипокинезии. Микрофотографиямиелиновых и безмиелиновых нервных волокон с тонкими прослойкамиэндоневрия.
Окрашено пикросириус красным. Ув.х 200.223Морфометрический анализ структур нерва разгибателей выявилстатистически значимое (р≤0,05) снижение площади поперечного сеченияСНП в 2 раза на левой конечности и в 1,8 раза на правой, также,преимущественнозасчетуменьшенияплощадиокружающейсоединительной ткани в 2 раза (таблица 32).Таблица 32 - Динамика изменения площади поперечного сечениясосудисто-нервногопучка(Sснп),нервнойткани(Sнп),окружающейсоединительной ткани (Sст) и толщины периневрия (dП) нерва разгибателей вусловиях гипокинезии* - р≤0,05 при сравнении с данными в контроле, # - р≤0,05 при сравнении сданными предыдущих суток224Толщина периневрия к окончанию эксперимента уменьшилась в 1,7раза на левой конечности и в 1,8 раза на правой конечности. Следуетотметить, что площадь поперечного сечения нервной ткани, также, имелатенденцию к снижению значений, однако, даже, к 90-м суткам достоверныхотличий, в сравнении с контролем, не наблюдалось.
При этом, максимальноеснижение (в 1,3 раза на левой конечности и в 2 раза на правой конечности)площади поперечного сечения нервных пучков происходило в промежуткемежду 21-ми и 30-ми сутками эксперимента.Вокружающемнервныепучкиэпиневрииипараневральнойсоединительной ткани, наблюдалось уменьшение количества белой жировойткани,уплотнениерасположенияколлагеновыхволокон,увеличениеколичества клеток в единице площади среза. Общий фасциальный футляр,окружающийвсекомпонентыфасциально-клетчаточныеСНПбылпространства,хорошозаполненныевизуализирован,долькамибелойжировой ткани, уменьшались в объеме, при этом количество мелкихкровеносных сосудов на единицу площади среза возрастало (рисунок 84).В клеточном компоненте преобладали фибробласты, фиброциты итучныеклетки.Необходимоотметить,чтонафонеабсолютногопреобладания в поле зрения клеток резидентов на всех сроках эксперимента,динамика изменения количественного состава была различной.
Так, впараневральной соединительной ткани количество фибробластов имелотенденцию на увеличение до 30-х сток эксперимента, затем происходило ихпостепенноеснижение,чтовполнеобъяснимоснижениемихпролиферативной активности при ограничении двигательной активности.Количество фиброцитов увеличивалось в 1,2 раза к 30 суткам эксперимента,а затем происходило их уменьшение от общего количества клеток.
При этом,в поле зрения визуализировалось большее количество макрофагов и тучныхклеток,значениякоторыхна21суткиявлялисьдиаметральнопротивоположными, затем происходило снижение количества макрофагов,на фоне полуторакратного преобладания тучных клеток (рисунок 85).225Рисунок 84 – Микрофотография нерва разгибателей и параневральныхсоединительнотканных структур в области средней трети плеча в условияхгипокинезии на 14 сутки.
Окрашено гематоксилином и эозином. Ув. х200.Рисунок85Динамикаизмененияколичестваклетокфибробластического ряда, макрофагов и тучных клеток волокнистойсоединительной ткани параневрия нерва разгибателей в области среднейтрети плеча в условиях гипокинезии.226В волокнистойсоединительнойтканиэпиневрия, наблюдаемоеувеличение клеток фибробластического ряда было статистически незначимым, при этом, их относительное количество на всех срокахэксперимента было значимо меньше, чем в параневральной соединительнойткани (рисунок 86).
Значения КИ были в 1,3 раза меньше, в сравнении созначениями в параневральном фасциально-клетчаточном пространстве.Интересно отметить, что количество макрофагов, в сравнении спараневральной тканью, на фоне меньшего их количества, имело тенденциюроста до 21-х суток эксперимента, а затем происходило резкое снижение ихколичества к окончанию эксперимента. Количество тучных клеток, уже наначальных сроках эксперимента, было в 2 раза больше в эпиневральнойсоединительной ткани, сохраняя такое преобладание до 90 суток.Рисунок86-Динамикаизмененияколичестваклетокфибробластического ряда, макрофагов и тучных клеток волокнистойсоединительной ткани эпиневрия нерва разгибателей в области средней третиплеча в условиях гипокинезии.227Сцельюподтвержденияразличнойфункциональнойролиэпиневральной соединительной ткани и параневральных структур, былопроведено изучение пролиферативной активности клеток эпиневрия ипараневрия в динамике при гипокинезии в сравнительном аспекте.
Учитываянаилучшую степень выраженности структурной организации параневрия внерве разгибателей, в эпи- и параневральных оболочках этого нерваанализировали количество Ki-67 положительных клеток.Степень пролиферативной активности клеток, находящихся в G1, G2, Sи M- фазах клеточного цикла, начиная с 21-х суток эксперимента, имеластатистически значимые отличия между эпиневрием и параневрием (рисунок87). Оценивая пролиферативную активность клеток соединительнотканныхневральныхоболочек,следуетотметить,чтовпараневральнойсоединительной ткани на всех сроках эксперимента, в условиях гипокинезии,была выше, чем в эпиневрии в 1,3 раза. Динамика изменения индексапролиферативнойактивностиклетоквэпи-ипараневральнойсоединительной ткани нерва разгибателей в области средней трети плечапредставлена на рисунке 88.На представленной диаграмме хорошо выражена динамика измененийиндексаэпиневрияпролиферативнойипараневрия.активностиклетокСтатистическисоединительнойзначимыхотличий,тканимеждуконечностями в пролиферативной активности клеток соединительной тканине выявлено.
При этом, более активно процессы пролиферации протекают впараневрии, о чем свидетельствуют значимо большие индексы пролиферациив сравнении с эпиневрием. Следует отметить, что скорость пролиферацииклеток соединительной ткани, как параневрия, так и эпиневрия имелаобратно пропорциональную направленность длительности эксперимента. Кзавершению эксперимента (на 90 сутки) индекс пролиферации статистическизначимо снизился в параневрии в 1,5 раза, а в эпиневрии в 1,9 раза, что можетсвидетельствовать о более высокой степени адаптационных возможностейпараневральных соединительнотканных структур.228Рисунок 87 – Экспрессия Ki-67 в клетках эпиневральной (А) ипараневральной (Б) соединительной ткани нерва разгибателей в условияхгипокинезии.
Иммуногистохимическая реакция, DAB. Ув. х400.Рисунок 88 - Динамика изменения индекса пролиферативнойактивности клеток в эпи- и параневральной соединительной ткани нерваразгибателей в области средней трети плеча в условиях гипокинезии.229Учитывая роль тучных клеток в адаптации организма к действиюэкстремальных факторов (в данном случае «гипокинезии») (Арташян О.С.,2006), был проведен качественно-количественный анализ этих клеток.
Формаэтих клеток варьировала от пирамидальной до овальной, располагались онипреимущественно паравазально, вокруг мелких кровеносных сосудов(рисунок 89).Рисунок 89 – Микрофотография тучных клеток эпиневральнойсоединительнойткани(А)ипараневральныхсоединительнотканныхструктур (Б) нерва разгибателей в области средней трети плеча при«гипокинезии». Окрашено ШИК-реакция+ альциановый синий с доокраскойядер гематоксилином. Ув.
х400.Количественный анализ выявил их статистически значимое увеличение(р≤0,05) в 1,6 раза в параневрии и в 1,8 раза в эпиневрии к окончанию срокаэксперимента.Изучениефункциональнойактивноститучныхклеток(подсчет типов тучных клеток, находящихся в стадии накопления иливыделениясекрета,натотальныхпрепаратахпараневральнойсоединительной ткани и на поперечных срезах СНП, окрашенных реактивомШиффа с альциановым синим) и разделение их на 4 типа по классификации230Д.П. Линдера (1980), выявило тотальную дегрануляцию мастоцитов в началеэксперимента в эпиневрии.По истечении месяца, массивная дегрануляция наблюдалась впараневральной соединительной ткани.
В поле зрения, в параневрии, наначальных сроках эксперимента преобладали тучные клетки в стадиинакопления секрета – 0 тип. Затем, начиная с 30-х суток эксперимента,преобладали тучные клетки в стадии дегрануляции (I, II и III типы).В эпиневрии картина была противоположной и в поле зрения до 30-хсуток преобладали дегранулирующие клетки, при этом индекс дегрануляции(ИД) был статистически значимо (р≤0,05) больше в 2,3 раза, чем впараневральной соединительной ткани.В условиях повышенной двигательной активности грудной конечности– «гиперкинезии» реактивные изменения были ярко выражены, как впроводниковом, так и стромальном аппаратах периферических нервов ветвейплечевого сплетения, иннервирующих мышцы сгибатели и разгибатели.
Нафоне динамичного двукратного увеличения (с преобладанием значений налевой конечности) площади поперечного сечения СНП нервов сгибателей(таблица 33), наблюдалось достоверное (р≤0,05), в сравнении с контролемувеличение площади поперечного сечения нервных пучков в 1,23 на левой и1,33 на правой конечности.При этом, наблюдалось увеличение толщины прослоек эндоневрия идиаметранервныхволокон.Впрослойкахэндоневрияколичествокровеносных сосудов увеличилось до 5-6 в поле зрения (в контроле 2-3 вполе зрения).
Площадь поперечного сечения окружающей соединительнойткани достоверно (р≤0,05) увеличивалась в 2-3 раза на левой и правойконечности соответственно, в сравнении с контролем.Значениятолщиныпериневральнойоболочкиимелисхожуютенденцию и к окончанию эксперимента достоверно увеличились в 1,5 разапо сравнению с контролем.231Таблица 33 - Динамика изменения площади поперечного сечениясосудисто-нервногопучка(Sснп),нервнойткани(Sнп),окружающейсоединительной ткани (Sст) и толщины периневрия (dП) нервов сгибателейпри «гиперкинезии»* - р≤0,05 при сравнении с данными в контроле, # - р≤0,05 при сравнении сданными предыдущих сутокНапоперечныхсрезахСНПхорошовизуализируетсяобщийфасциальный футляр, образованный параллельно расположенными в одномнаправлении, коллагеновыми волокнами. Параневральные фасциальноклетчаточныепространстварасширены,содержатструктурированные дольки белой жировой ткани (рисунок 90).хорошо232Рисунок90–Микрофотографияпараневрально-фасциальноклетчаточных пространств нервов сгибателей в области средней трети плеча,заполненных дольками белой жировой ткани в условиях «гиперкинезии».В клеточном компоненте преобладали клетки фибробластического рядаи тучные клетки, имеющие овальную форму и находящиеся в стадиинакопления секрета на начальных сроках эксперимента и преимущественно встадии дегрануляции после 21-х суток эксперимента.
В сравнении сусловиями «гипокинезии», количество фибробластов увеличивается в 2-3раза в эпиневрии и в 1,5 -2 раза в параневральной соединительной ткани.Следует отметить, что количество тучных клеток и макрофагов вэпиневрии имеет тенденцию на уменьшение значений, а в параневриинаблюдается рост количества макрофагов на фоне снижения в 2 разаколичества тучных клеток. Динамика выявленных изменений в клеточномсоставе эпи- и параневральной соединительной ткани нервов сгибателейпредставлена на диаграмме (рисунок 91 А,Б).233А.Б.Рисунок91-Динамикаизмененияколичестваклетокфибробластического ряда, макрофагов и тучных клеток волокнистойсоединительной ткани эпиневрия (А) и параневрия (Б) нервов сгибателей вобласти средней трети плеча в условиях «гиперкинезии».В результате проведенного морфометрического анализа компонентовСНП нерва разгибателей, была выявлена похожая динамика в изменении234показателей, с асимметричным преобладанием значений на одной изконечностей (таблица 34).Таблица 34 - Динамика изменения площади поперечного сечениясосудисто-нервногопучка(Sснп),нервнойткани(Sнп),окружающейсоединительной ткани (Sст) и толщины периневрия (dП) нерва разгибателейпри «гиперкинезии»* - р≤0,05 при сравнении с данными в контроле, # - р≤0,05 при сравнении сданными предыдущих суток235Так, площадь поперечного сечения СНП на правой конечностиувеличилась в 1,5 раза, на левой конечности в 2,3 раза.