Автореферат (1139553), страница 7
Текст из файла (страница 7)
Уровень стресс-индуцированных молекул MICA (лигандов рецептора NKG2D) в сыворотке крови онкологических больных превышает контрольные значения в 3-8 разпри раке тела или шейки матки, предстательной железы, меланоме, раке языка илигортани, молочной железы, толстой кишки или желудка (р<0,002).2. Дисбаланс в субпопуляционном составе лимфоцитов у большинства больных колоректальным раком и меланомой проявляется в повышении относительного и абсолютного содержания Тreg и экспрессии CD25; повышении содержания NK-клеток, засчет активированных NKG2D+ и CD69+NK-клеток у больных колоректальным ракоми повышении количества HLA-DR+ лимфоцитов и CD38+Т-лимфоцитов у больных меланомой кожи.3. В модельной системе показано, что рекомбинантный человеческий белок MICA может взаимодействовать in vitro с рецептором NKG2D на NK-клетках и снижать их цитотоксическую активность, что предполагает участие сывороточных молекул MICA всупрессии противоопухолевого иммунного ответа.4.
При длительном культивировании in vitro мононуклеарных клеток, в присутствиикомбинации цитокинов IL-2 и IL-15 в низких концентрациях, формируется пул цитотоксических лимфоцитов, который характеризуется увеличенной экспрессией активирующих рецепторов, повышенной пролиферативной и цитотоксической активностьюи сохранением высокой жизнеспособности.5. Персонифицированная адоптивная иммунотерапия с использованием активированныхin vitro цитотоксических лимфоцитов является безопасной, не вызывает серьезных побочных эффектов и позволяет улучшить качество жизни онкологических больных засчет значимого снижения показателей состояния больных, оцененных по шкале ECOG.6.
Системный эффект адоптивной иммунотерапии на организм онкологического больногопроявляется в изменении доли NK-клеток, минорных популяций (NKT-, Treg) и экспрессии маркеров активации лимфоцитов, а также концентрации цитокинов (IFN-α, IL-10) исывороточного уровня молекул MICA.7. Увеличение концентрации молекул MICA в сыворотке крови онкологических больных на фоне адоптивной иммунотерапии может свидетельствовать о прогрессии заболевания, а снижение данного параметра - о стабилизации болезни или об объективномответе на терапию.34ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ1. Для выявления иммуносупрессии и улучшения иммунодиагностики рекомендуетсяопределять уровень растворимых форм молекул MICA в сыворотке крови онкологических больных. Перед началом и после каждого курса АИТ целесообразно проводитьмониторинг молекул MICA. Изменение концентрации сывороточных лигандовNKG2D может быть использовано в качестве прогностического фактора, что позволитпроследить эффективность проводимой терапии.2.
При оценке иммунофенотипа лимфоцитов периферической крови у онкологическихбольных кроме основных популяций В-, Т- и NK-клеток целесообразно дополнительно определять NKT-клетки, Treg, экспрессию Fas (CD95) и маркеров активации лимфоцитов CD25, CD38 и CD69.3. Для активации МНК, увеличения пролиферативной и функциональной активностиNK-клеток человека рекомендуется использовать комбинацию цитокинов IL-2 (250МЕ/мл) и IL-15 (50 нг/мл).4.
Разработанный метод длительного культивирования и активации цитотоксическихлимфоцитов можно применять в клинической практике для АИТ онкологическихбольных, а также для изучения биологии и эффекторных функций NK-клеток в фундаментальных научных исследованиях.5. Целесообразно включать АИТ активированными цитотоксическими лимфоцитами вкачестве безопасного метода персонифицированной иммунотерапии в схемы комплексного лечения онкологических больных с солидными опухолями.
Достоинствомметода является возможность проведения АИТ в амбулаторных условиях.6. Адоптивную ИТ рекомендуется проводить онкологическим больным у кого ожидаемая продолжительность жизни не менее 3-х месяцев. Курсы АИТ следует повторятькаждые 2-3 месяца в течение длительного периода времени параллельно с основнымлечением или в самостоятельном режиме.7. Для уменьшения побочных эффектов и снижения миелотоксичности химиотерапиицелесообразно проводить АИТ в адъювантном режиме.
В данном случае забор периферической крови для активации лимфоцитов рекомендуется производить непосредственно перед очередным курсом ХТ.8. Для оценки клинической эффективности проводимой АИТ и иммунологической реактивности организма больного кроме критериев irRC необходимо оценивать степеньместной провоспалительной кожной реакции на введение биопродукта, концентрациюлигандов рецептора NKG2D, количество популяций Treg, NKT-, T-лимфоцитов и NK35клеток с маркерами активации (CD25, HLA-DR, CD38, CD69, NKG2D и CD95) и цитокиновый профиль (IFN-α, TNF-α, IL-10).9. Рекомбинантный человеческий белок MICA можно использовать для изучения влияния растворимых форм молекул на NK-клетки человека, а также для получения антиMICA антител и разработки методов таргетной и радиоиммунотерапии злокачественных опухолей.36Список работ, опубликованных по теме диссертационной работы1.Kovalenko, E.I.
CD15 and related oligosaccharides upregulate NK-cell-mediated cytotoxicity /E.I. Kovalenko, E.V. Khirova (Abakushina), S.V. Khaidukov, T.V. Ovchinnikova, M.A. Sablina, N.V. Bovine // Leucocyte typing VII (Edited by D. Mason et al.). Proceedings of VII International Workshop on Human Leucocyte Differentiation Antigens. – Oxford: Oxford Universitypress.
– 2002. – p. 183-185.2.Kovalenko, E.I. The modification of cell surface with lipophilic glycoconjugates and the interaction of modified cells with natural killer cells / E.I. Kovalenko, E.V. Khirova (Abakushina),I.M. Molotkovskaya, T.V. Ovchinnikova, M.A. Sablina, A.M. Sapozhnikov, S.V. Khaidukov,N.V. Bovin // Russ J Bioorganic Chem. – 2004. – V.30. – p.250-260 (translated from Bioorganicheskaya Khimiya (Russian) – 2004. – V.30. – p.281-292).3.Abakushina, E.V. The modulation of NK cell – mediated cytotoxicity using synthetic glycoconjugates containing various carbohydrate ligands / E.V. Abakushina, E.I.
Kovalenko, M.A. Sablina, S.V. Khaidukov, N.V. Bovin // In book of abstracts FEBS advanced course: "Chemistrymeets biology". – Greece, Island of Spetses. – 2005. - July 17-29. – p. 5.4.Kovalenko, E.I. Clustered carbohydrates as a target for natural killer cells: a model system / E.I.Kovalenko, E.V. Abakushina, V. Kapoor, E. Korchagina, S. Khaidukov, I.M. Molotkovskaya,A.M. Sapozhnikov, P.A. Vlaskin, N.V. Bovin, W.G. Telford // In book of abstracts: The ISACXXIII International congress "The International society of analytical cytology". – Quebec City,Canada – 2006.
– May 20-24.5.Kovalenko, E.I. Clustered carbohydrates as a target for natural killer cells: A model system / E.I.Kovalenko, E.V. Abakushina, W. Telford, V. Kapoor, E.Yu. Korchagina, S.V. Khaidukov, I.M.Molotkovskaya, A. Sapozhnikov, P.A. Vlaskin, N.V. Bovin. // Histochem Cell Biol. – 2007. –V.127. – №3. – p. 313-326.6.Коваленко, Е.И. Влияние стресс-индуцируемой молекулы MICA на активность NK-клетокчеловека / Е.И. Коваленко, Ю.И. Стрельникова, Л.М. Коневский, Е.В. Абакушина // Омский научный вестник.
– 2007. –T.61. – №3. – С. 29-31.7.Каневский, Л.М. Влияние циркулирующих молекул MICA на активность натуральных киллеров человека / Л.М. Каневский, Ю.И. Стрельникова, Е.В. Абакушина, А.В. Орлов, Е.И.Коваленко // Российский иммунологический журнал. – 2008. – T.2(11). – №2-3. – С. 121.8.Кузьмина, Е.Г. Определение опухолеассоциированной молекулы MICA в сыворотке кровибольных гемобластозами / Е.Г. Кузьмина, Е.И.
Коваленко, Е.В. Абакушина // МатериалыXIV Российского онкологического конгресса. – Москва. – 2010. – 23-25 ноября. – С. 222.9.Абакушина, Е.В. Определение функциональной активности естественных киллеров человека методом проточной цитометрии / Е.В. Абакушина // Клинико-лабораторный консилиум. – 2011. – Т.39. – №3.
– С. 17-25.3710.Абакушина, Е.В. Стресс-индуцированные молекулы MICA/B и их роль в развитии онкологических заболеваний / Е.В. Абакушина, Е.Г. Кузьмина // Молекулярная медицина. –2012. – №2. – С. 16-20.11.Абакушина, Е.В. Основные свойства и функции NK-клеток человека / Е.В. Абакушина,Е.Г. Кузьмина, Е.И. Коваленко // Иммунология. – 2012. – Т.33. – №4.
– С. 220-225.12.Абакушина, Е.В. Роль стресс-индуцированных молекул MICA/В в противоопухолевомиммунном ответе / Е.В. Абакушина // Злокачественные опухоли. – 2012. – Т.2. – №2. –С. 103-105.13.Клинкова, А.В. Стресс-индуцированные молекулы MICA в сыворотке крови больныхлимфопролиферативными заболеваниями / А.В. Клинкова, Е.И. Коваленко, Е.В. Абакушина, Е.Г. Кузьмина, Г.С. Неприна // Злокачественные опухоли. – 2012. – Т.2. – №2.– С.
165-166.14.Коваленко, Е.И. Иммунорегуляторные молекулы MICA в сыворотке крови онкологических больных / Е.И. Коваленко, Е.В. Абакушина, А.В. Клинкова, Е.Г. Кузьмина, Л.М. Каневский // Злокачественные опухоли. – 2012. – Т.2. – №2. – С. 167.15.Цыб, А.Ф. Новые иммунобиотехнологические подходы к ранней диагностике онкологических заболеваний / А.Ф. Цыб, Е.В. Абакушина, Ю.С. Романко // Сборник статей IV международной научно-практической конференции "Высокие технологии, фундаментальные иприкладные исследования в физиологии и медицине". Под ред. А.П.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
