Osnovy_biokhimii_Uayt_tom_3 (1123311), страница 6
Текст из файла (страница 6)
29.6 Схема образования поперечных связей в фибрииогене. Тромбии гидро.лизует по одной пептитной связи а каждой из аЛ- и ВВ-цепей фибриногена, в ре.зультате чего из Н-концевой части каждой цепи освобождаются фибрииопептиды А и В соответственно. У человека фибринопептид А содержит 16, а фнбринопептид  — 1ч аминокислот. Образующиеся мономеры фибринз агрегируют с образованием мягкого сгустка. Затем образуется платный сгусток в результате действия фактора Х1Н„ который катализирует образование а-(т-глутамил)лизиновых поперечных связей между остатками глутамина и лизина, сближаемых при обра.зовании мягкого сгустка.
Каждая т-цепь образует связь только с одной у-цепью, в то время как каждан а-цепь — по крайней мере с двумя другими а-цепями. Короткие жирные черточки обозначают места сшивок, пунктир — другие места потенциальных сшивок. ки между полипептндными цепями субъеднннц фибрини: НН С=О г рне'(а') )НС вЂ” (СНе),— С вЂ” НН, + НаН вЂ” (СНе)~ — СН ~С=О НН у-змилиая группа е.амнногруппа лизина глутамнна ~)е)Н О С=О .е 1 Н НС вЂ” (СН ) — С вЂ” Н вЂ” (СН )ч — СН + ВН,+ С= — О )с)Н поперечная сшивка, е-„'т.глутамил)- ливии 1163 Образующиеся и-(у-глутамил)лнзиновые поперечные сшнвки связывают боковые цепи глутамяна одной мономерной молекулы фнбрина с боковыми цепями лизина другой молекулы; в результате образуется сильно сшитая межмолекулярная сетка мономеров фибрина, образующая плотный нерастворимый сгусток, твердым сгусток.
у-Цепи образуют сшивкн быстрее, чем а-цепи, а р-цепи вообще не образуют сшивоя. После восстановления в сильно сшитом фибрнне всех дисульфидных связей можно выделить сильно полнмеризованиые а-цепи, мономерные р-цепи и димериые у-цепи. В димере у-у обнаружены две сшивии. Число сшивок в полимере а-цепей неизвестно. О СНз СНз ! (СН вЂ” СН С -СН) — Н О витамин Кз (в форме хинона) дикумарии 13, 3'-метнаен-бис-(4-оксикумарин)1 Дикумарин используется как лечебное средство при состояниях, сопровождающихся тромбозамн, для уменьшения склонности к образованию сгустков, а также как эффективный крысиный яд. Для предотвращения геморрагии, вызываемой введением дикумарина, следует принимать витамин К.
У животных, которым скармливали дикумарин, молекула протромбина оказывается несколько измененной; она медленнее превращается в тромбин и отличается подвижностью при электрофорезе, В то время как молекула «нормального» тромбнна связы- 3 — 1503 29.3,2. Протромбин и образование тромбнна Внутривенное введение тромбииа вызывает образование виутрисосудистых тромбов; следовательно, в норме кровь остается жидкой в сосудах вследствие отсутствия тромбина. Дефицит протромбина в плазме (гилопротромбинелмя) нередко наблюдается прн обтурацнонной желтухе п других заболеваниях печени.
Протромбин синтезируется в печени. Для его образования необходимо адекватное поступление с пищей витамина К (гл. 51), который необходим также для биосиитеза факторов свертывания Ъ'11, 1Х и Х. Синтез всех этих факторов нарушается у лиц, принимающих дикуларин — антагонист витамина К. Дикумарин был выделен из загнившего клеверного сена; оказалось, что именно это вещество является фактором, вызывающим геморрагическое заболевание у коров. пс жидкля сРеДА ОРглнизмх 1186 вает четыре атома Са'+ в условиях 1 мМ раствора, молекула сненормального» белка связывает менее одного атома (в тех же условиях).
Следовательно, витамин К ответствен за образование специфических участков связывания Са'+ у протромбина. Сильно связывающие Са»е участки образуются близко расположенными остатками у-карбоксиглутаминовой кислоты в К-концевой области молекулы протромбина; этп остатки находится в положениях 7, 8, 15, 17, 20, 21, 26, 27, 30 и ЗЗ.
В «ненормальном» протромбпие, имеющемся у животных с недостатком витамина К илп получавших дикумарин, в этих положениях находится глутаминовая кислота. До этого открытия у-карбоксиглутампновую кислоту в составе белков не обнаруживали; в настоящее время показано, что она входит в состав всех витамин-К-зависимых факторов свертывания (П, ЧН, 1Х и Х).
У всех этих зимогенов остатки у-карбоксиглутамнновой кислоты локализуются в И-концевой части последовательности, и именно эта часть пептидной цепи отщепляется от молекулы при ее активации протеиназами. Некоторые другие белки, не имеющие отношения к свертыванию крови, также содержат остатки у-карбоксиглутаминовой кислоты; в их число входят сериновая протеиназа с неизвестной функцией из крови быка, а также некоторые белки, экстрагнруемые из костной ткани. у-Карбокснглутаминовая кислота, как и другие производные малоновой кислоты, неустойчива при кислотном гпдролизе (из нее образуются глутаминовая кислота и СОз); этим объясняется то обстоятельство, что до недавнего времени оиа не была обнаружена в составе белков, Следует отметить, впрочем, что многие кальцийсвязывающпе белки не содержат у-карбокснглутаминовой кислоты.
у-Карбоксиглутамат образуется в белке посттраисляционно в результате реакции, зависящей от витамина К. У крыс с недостатком витамина К белок, находящийся во фракции частиц гомогената печени, включает "С из НыСОз при добавлении витамина К. Это включение ингибируется дикумарином, но происходит в присутствии ингибиторов белкового синтеза.
Как выяснилось, большая часть "С-меченого белка, экстрагируемого из этой фрак- гк кровь про1промбин Са с ~/ р с ОЕ о а О 5-5 — г мн, ноос -нн, СООН п1роыбин + нан СООН И-концевой пепл|ив Рис. 20.7. Схема активации протромбина. Фосфоглицсридные 1РП) везикулы связывают факторы Х, н Ч' при участии Саз+. Протромбин взаимодействует с комплексом РС вЂ” Х,— Ч' своим йрконцевым участком, который содержит 'остаток т-карбоксиглутамата.
Это взаимодействие также зависит от присутствия Саз+. Затем фантор Х, гидролизует две пептидные связи в протроыбине (стадия 1), что приводит к образованию каталитичесни неактивного пептнда 1)И 33 300), содержащего остаток т-карбоксилглутамата, а нз стадии 2 гидролизует молекулу по связи дгя — Ие, что приводит к ее активации, т. е. появлению протеолитнческой активности. Расщепление на первой стадии позволяет молекуле диссоцнировать из комплекса, ции частиц, является протромбпном, содержащим остатки Ч-карбоксиглутамата в М-концевой части. Детали реакции карбоксилирования пока неясны, но известно, что она зависит от присутствия кислорода и что )и у)1го активной явчяется гндрохиноновая форма витамина К. Хиноновая форма витамина может быть превращена в гидрохпноновую ферментативным путем прн участии МАРН или МАРРН.
Известно также, что лгенодиыон (гл. 61), синтетическое соединение, проявляющее активность витамина К при пероральном введении, неактивно в системе )п ч)1го. ъм. жидкАя сРедА ОРГАнизмА Механизм активации протромбина показан на рис. 29.7. Накболе эффективно протромбин активируется, будучи связанным с содержащими фосфоглицериды (РО) везикулами, которые поставляются тромбоцитами; при этом необходимы факторы Х„и Ч'. Связывание каждого из этих факторов с фосфоглицеридом проксходит в присутствии Са'+.
Образование фактора ХА описано ниже (равд. 29.4). Фактор У', активная форма фактора Ч, образуется в результате ограниченного протеолиза Ч, осуществляемого либо фактором Х„либо самим тромбином (после активации слсдовых количеств протромбина). Фактор Ч был открыт при изучении генетической болезни, врожденной парпгеиофилии, которая характеризуется продолжительными кровотечениями; было установлено, что это заболевание связано с отсутствием в плазме белка, обозначаемого как фактор Ч (табл. 29.5), с неизвестной ферментативной активностью. Роль фактора Ч' неясна; предполагается, что в комплексе с фосфоглицеридом он может являться субстратсвязывающнм белком, способствующим благоприятной взаимной ориентации фактора ХА н протромбина и ускоряющим тем самым образование тром- бина (рис.
29.7). Образовавшяйся тромбин диссоциирует из комплекса с фосфоглицеридом, поскольку он больше не удерживается участком молекулы, содержащим т-карбоксиглутаматные Са'+-связывающие участки. Освобождающиеся у-карбоксиглутаматсодержащие фрагменты могут также являться регуляторамн превращения протромбина, поскольку (при накоплении) они тормозят образование тромбина. 29,4.
Внутренний механизм свертывания крови Активация протромбина и образование поперечно связанного фибрина в результате совместного действии тромбнна н фактора ХП1 происходит одинаково при внутреннем и внешнем путях свертывания (рис. 29.5). Однако факторы ч'П1, 1Х, Х1 и ХП действуют только на внутреннем пути, приводя в конечном счете к превращению фактора Х в фактор Х„что достаточно для протекания всего каскада реакций. Первая стадия внутреннего пути, называемая контактной фазой,— активация фактора ХП (фактора Хагемана). Механизм активации не выяснен полностью; известно, однако, что фактор ХП должен войти в контакт с поверхностью. Это взаимодействие чзапускает» превращение фактора ХП в активную форму — ХП,.
1п у((го фактор ХП взаимодействует со стеклом нли каолниом, а в организме он может связываться коллагеном или каллиногеиом (гл. 38). Связывание с этими веществами илп просто контакт с ними может, как полагают, переводить фактор ХП в такое кон- 9К КРОВЬ !!вэ формационное состояние, в котором он является протеолитически активным.
Комплекс фактора ХП с каллиногеиом превращает далее пргкалликреин в калликреин путем протеолиза (гл. 38). Затем уже калликреин активирует фактор ХП. В результате этой серии реакций значительно ускоряется образование фактора ХП9, который на следующей стадии внутреннего пути активирует фактор Х1. Оказалось, что сильным активатором фактора Х1 является также комплекс фактора ХП9 с каллнногеном. Следует отметить, что роль фактора ХП точно не установлена, поскольку Отсутствие его не приводит к серьезным нарушениям механизма свертывания. О важности внутреннего пути свертывания свидетельствует то обстоятельство, что у пациентов, у которых отсутствует любой из факторов (Х1, 1Х или ЧП1), наблюдается выраженная геморрагическая болезнь.
На следующей стадии фактор ХП, гндролизует внутренние пептидные связи в молекуле фактора Х1, в результате чего образуется фактор Х1„также являющийся протеолитическим ферментом. Третья стадия — активация фактором Х1, фактора 1Х с образованием фактора 1Х,; для этой реакции абсолютно необходим Сат+.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
