В.А. Голиченкова, М.Л. Семёнова - Практикум по эмбриологии (1121117), страница 2
Текст из файла (страница 2)
Пpимеpьr эМбpиoЛoГичrсKoгo pисyнKa:(нa8 блaстoмеpoв); 6- гaстpулa BЬIoнa; B - вьюнoснoвaние aнTеннЬI личинKи хиpoЕIoмусa; ! _ ли,lинкa aKсoЛoTЛяЛaтеpа,rьнaямезoДеpМa.{-дpoблениеуpьrб (вьюн,cТ aД|4И сoмитoген езa);Л_)KелтoчнaяпpoбкaMезoдеpй6(нaнинaя с paHнrй гaсTpyлЬI) ПpиняTo yКaзЬIBaTЬ paспoЛoЖеЕ{иr дopсfu'lЬнoй и BеI{TpaЛЬнoй стopoн зapo.цЬI-щих сTa.цияхЭкгoдеpмa)L lo,rlcpMapaЗBI4.ГИЯЭнтoдepмаfloздняя гaстpyлaшIa, a нa бoЛrе Пoз.цI{их cTaДv..ЯX paЗB74.I|1Я (нavинaя с нrйpуЛЬI)pисoBaTЬ ЭMбpиoЛoГичесКиr OбЪеKTЬI .цopсaЛЬнoЙ сTopoнoй BBеpХ(pис.
1' 6).Бyмary.цЛя pисyнКa л}.t{lIIе BсеГo BЬIбиpaTЬ МaKсиМaJIЬнo белyro,ПЛoTн),.Io, гЛa.цKylo и не МеЛoBaнH},Io. Haчинaть pисyнoК нy)Кнo сПpopисoBKи oбЩиx KotITуpoB oбЪеКTa, Пpи эToМ ЛИlF.ИИ ЗaМKн}тЬIхКoнTypoB.II.OЛ)KFIЬI бьrть сплоlпнЬIМи и нr oбpЬIBaTЬCЯ. Cледyет избегaть ПoBToptloгo oбBе.цения КoнTypa. Taк нaзьlвaеМaя <<oП},lшIrн-Пеpвиuнaя кишкa(сaгиттa.пьньIй cpез)БАПoпepеяньrй сprз нa ypoвнr сrp,ццaKapдинa,rьньtе BенЬICклоpoтoмAltrrиoтическaяпoлoсTьrнr ToЛЬКo ДеЛaоT pисyнoK неaККaK бЬI сoЗДaеT.цoПoЛнинoииHoгДaMrнеrToчнЬlМ'иКуpaTнЬIMTеЛЬнЬIе нrсyщrсTByloщие сTpyКTуpЬI.Пpи зapисoвке oбъекTa нa paнниХ cTaД|4Ях paЗBИТ|4Я (стaдиидpoблeния и .цo paнней гaстpyльr BКЛIoчиTеЛЬI]o), KoГДa эМбpиoнсoсToиT иЗ нrбoЛЬlxoгo чисЛa KpyПнЬIx KJIеTOK, ПpИняTo пpopисoBЬIBaTЬ Kaxцy}o КlIeTKy, oбpaщaЯ BниМaниr нa ее фopМу' paзMеp иl\МHИoH^нoсTЬ)>, иЛи <<BoЛoсaToсTЬ)>' ЛWtlИЙДrTaЛи Bн},TpикЛеToчнoгo сTpoе}Iия: paсПoЛo)KеI{ие я.цеp' BaKуoЛиЗaциIo' paсПpеДеЛениr гpaнул пигМенTa и T.д.
(pИс. 2, А). [ля бoлееПoЗ.цHих cт aдиЙ paЗBИT|4Я сЛе.Ц'yrT ПpopисoBЬlBaTЬ paсПoЛo)(rl{иrКЛеToчнЬIх ПЛaсToB и зaчaTКoB' a не oT.цrЛьHЬIr КЛrTКи (pиc.2, Б).Пpи бoлее ,цеTaЛЬнoй ПpopисoвKе oбЪrKTa сЛrДyeT сpaЗу )Kr Диф6жeлToчнoгoМruJКa,1B3. Пpимеp стуДснчrсKoto pисунKa нa ПpaКTичеcKих зaHяTиЯх:ГaсТpуЛa ЛЯгуulки; 6- нейpyлa Лягу[lKи; B opгaнoгснез у ПTиц-КaМи (pис. 2, ,Ц).Ha те }Д{aсTKи' гДе pисyнoК ДoЛ)Kен бьIтЬ темнrе,С.ГaBИTсЯ MtloГo ToчеK KaК Mo)(Ho блиxе ДpyГ К Дpyгу, a TaM' г,П'0oбЪеКT иМееT бoлее сBеTЛЬIе oблaсTи, ToчrК CTaBИTсЯ МaЛo. нa сaМЬIе сBeTЛЬtе oблaсти pисyl{Ka ToчKи Booбщr не нaнoсяTcЯ. HaИ6oЛеe TrМнЬIе Bн}гТprнние KoнTypЬI pисyHKa Мo)(нo BЬIДеЛиTЬ ToчKaMи бoЛеr КpyПнoгo paЗMrpa.
Taкaя TсхниKa TpyДoеМКa' зaнИMaeTМнoгo BpeMеЕIи и нa сTyДенчесKoМ ПpaKTиK}ъ4е' KaK ПpaBиЛo' неПpиМеI{яеTсЯ, o.цнaKo rе ЭЛrМoнTЬI Мoг}rT бьtть испoлЬЗoBaнЬI B pa]\,{.Кaх lTpеДЛaгaeМoГo ПpaKTиKyМa Пpи ЗapисoBKr ToTaПЬнЬIх tlpеПapzr_ToB KypиЕ{ЬIx зaрoдьIrпеЙ.B зaключение ЭToГo paзДrЛa Дa.циМ F{есKoЛЬКo prKoМенДaциЙ ДJ,lясTyДенToB' KoTopьIr ПoМoг},Т иМ BьlпoЛниTЬ Bсr pисyнКи Зa Bpе]VlязaHЯTИЯ.1. oбъект, иметoщий aсиММeTpичHoе cTpoение (нaпpиМеp' сaгиTTaЛЬHЬIй сpез эмбpиoнa)' дoлxен бьtть ПpopисoBal{ ПoЛHoCTЬЮ(pис. З, А).2. Чaстo сpезЬI эмбpиoлoгичесKИx oбъектoв иМеIoT бoльшoеко-ЛичrсTвo paЗЛичHЬIх.цета,'rей сTpoения. B этoм сЛyчae Мo)Kнo сI{aчaЛa с.цеЛaTЬ сxeMaTичесKyIо ПpopисoBKy oбъектa пpи Мfu'Ioм },ъеЛи_Чении MиKpoсКoпa' a зaTеM пpи бoльrлrМ yBеЛичеfIии ПpopисoBaTЬнaибoлее ЗнaчиMЬrе oблaсти (pис.
3, Б).3. Пpи pисoвaнии билaтеpа-пьF{o-сиММеTpичнoгo oбъектa (напpиMеp' ПoпrpечнoГo сprЗa эмбpиoнa) Мo)Кнo ЗaПoЛниTЬ .цеTiLtяIМи сTpoения ToЛЬКo пoлoBиIтy pис},iHKa' a BTopyIo ПoЛoBинy oсTаBиTь B BиДr KoHTypHЬIх ЛиниЙ (pиc. з, А, Б, B).4. Ha пpепapaтax эмбpиoлoгичrсKих oбъектoB есTЬ oблaсти (нaпpиМrp' ;келтoк), г.цr КlIrToчнЬIr гpaHицЬI пpaKTиЧесKи Hr Bи.цнЬII,I,'Iи oTс),,ТсTв1тот. Taкие oблaсти Л)Д{шr oбoзнaчить ToчKаМи Пo пoЛ}o,a не Зa[ITpиxoвЬIBaTЬ.5.
Kpoме KЛетoчнЬIx сTp}T(Tуp Ha ПpепapaTaХ BсTprчaIoTся и BF{rKЛeToчI{ЬIе oбpaзoвaния (нaпpимеp, oбoлovкa oпЛo.цoTBopения) иПoЛoсTи (нaпpимеp, цrлoм). B этoм сЛyraе нa pисyнKr Л)Д{lxе BЬIдцс_ЛяTЬ lllTpихoвкoй ToЛщиF{y KЛrToчнЬIх и BнrкJIеToЧнЬIx сЛoеB' аПoЛoсTи oсTaBЛяTЬ нrЗaKpalIIенF{ЬIМи.Эмбpиoлoгичeскиe пpeпapaтЬIB нalпrм yтебнoм пoсoбииMЬI Hе будем KaсaTЬсЯ МеToДoB ПpиГo_ToBJIrния ГисToЛoгиtIrсKих ПpеПaрaToB ДЛя .цaнHoГo ПpaKТИКyMa' TaKКaК ЭTиМ BoПpoсaМ пoсBящrнo Е{еMzUIo сПеЦиаЛЬнЬlx пoсoбий И MеTo-дIичесIо{x pyKoBo,цсTB.Пpи пpoведrнии пpaKTиKуМa по эмбpиoлoгииМoГ},T пpиМeняTЬся ГисToЛoГичrсKиr ПpепapaTЬI paзЛи чF{ЬIх TиПoB:7. Хfuвoй npепаpam.
I{ельtй эмбpиoн ПoМеrцalоT B Bo.цу иЛи сtIе-циaльньlй физиoлoгический paсTBop и исПoЛЬзyЮT .цЛя ПpЮКиЗ_FIеHHoгo нaблтo.цения Зa ПpoцессaМи paзBиTия.RMазoк. Ha пpедметнor сTеКJIo нaнoсяT КaIIлIo клетoннoй сyсчегo КЛrTКи paвнoМrpнo paсПpr.цеЛяIoT Пo егo Пot(' l) х I oсTи с ПoMorцьIо сПrЦиzulЬнoгo сTеI.TЬIIIIKa.З. Оmnечаmoк. [дя ПpигoToBЛrHия пpеПapaTa нy)кнo ПpиKoснyгЬ(.'I li хOpolПo oбезxиpенIloмy Пре.цMеTIloМy сTеKЛy КyсoчКoм TKаF{и.)..||(.||,}иИ' ПoсЛеIIll 1lсllyльтaте чaсTЬ KJIеToК ПpиЛиПнеT К сTеКщ/' KoTopьIе пoсле фик(';lIlИИ и oKpaсКи Мo)GIo иссЛеДoBaTЬ Пo.ц MиKpoсKoпoм. Этoт тип||lсT.oЛoГичесKoгo ПprпaрaTa чaсTo исПoЛЬЗ),ToT Для из}Дrения Пpol (.ссO l] спеpМaToгеF{езa.4. Tomальньtй пpеnаpаm (вpеменньtti uлu noсmoянньtй).
Эмбpиoнl ) |](L]Л'IЮT oT )КеЛTКа, фиксиpуrот и МoнTиp},1oT нa ПprДМrTтIoМ сTrKJIr.lltlслr oKpaсKи и ЗaКllloчения ЭToT пpеПapaT Мo;кнo иссЛе.цoBaTЬ|Il('( МИKpoсКoПoМ, нo ToЛЬKo Пpи МаJIoМ yBrЛшlении (oбъекгив x 8)'Iill( KztK rгo ToЛщиIla Мo)(еTДoсTигaTЬ llесКoлЬКиx МиЛЛиМеTpoB.5.
Гuсmoлozuчeскuй сpез эмбpuoлozuчесKozo oбъекmа, Ha стyден'|ссKИХ ПpaKTиKyМax' KaK ПpaBилo' ПprДЛaгaloT ПprIIapaTьI с нa|i с c H HЬlMи е.циничI{ЬIМи среЗaМи' нaибoлее ПoЛF{o иЛлIoсTpиpylolIHo в эмбpиoлoгичrсKих иссЛе/|()ltllниях oбьtчнo исПoЛЬз}.Ют сеpийньrе сpезЬI' KpГДa нa пpе.цМrTt|()с с,геKJIo в четкoй пoсЛrДoBaTеЛЬtloсTи нaКЛеиBaIoT Bсr гисToЛo||ltlссКиl сprзЬI' ПoЛ)rl{еннЬIr с oДнoгo эмбpиoнa. Пpи гистoлoги.tt.сKoй pезке oбъеKT opиeF{Tиp}.ЮT TaK, чтoбьr МиКpoToМF{ьtй нox||l'lIMИ иЗyчaеMyЮ сTa.циIо paЗBИTИЯ./lt|l4Г:LПся BсTpoгo yсTaнoBленнoй плoскoсти. B ЗaвисиМoсTи oT Toгo'tlllK ПpofiIeЛ сprЗ' paзЛичaloT сpезЬI фpoнmальньIе' nonеpецllt,lеt'(liuInmальHьtе (cм.
pис. |, Б).ИMeтoдьl paбoтЬl с микpoскoпoмtlелoвечeскиЙ rлaз пpе.цсTaBЛяет сoбoй eсTесTBеtII{}rЮ oпTиче(. l( y lo сисTrМу, хapaKTеpиЗyЮщ}TосЯ oITpеДелrннЬIМ pаЗp е Iuеuе,Ml И M r HЬIIIиM paссToяниrМ Mе)KДy эЛeМeнTaМи нaблю.цaемoгo oбъекIil, Ilpи KoTopoМ гЛaз ещr Мo>ttеT ИXpaЗЛИЧИть. [ля I{opМzl,Ilьнoгol llllЗa Пpи удaлeЙии oт oбъектa нa TaK F{aзЬIBaеMoе paссToЯниr HaиllVlItJJегo вИДeНИЯ (D = 250 мм) минимuulЬtloе paЗpe[Iение сoсTaB||'IсT ПpиМrpно 0'0B мм (a у Мнoгих лrо.цrй- oКoЛo 0,20 мм). Paз11|| lшlt:1lьtбoЛьt-шинсTвa paсTиTелЬнЬIх и >l<ивoTньIх KJIеToK, B ToМ чисЛеlьlflpиoнальнЬIх' знaчиTrЛЬнo MенЬlпе этoй величиньт.
[ля иЗ}^{rIlll'l TaKих oбъектoв исПoЛЬзyloT МиKpoсКoпьI (oт <.MиКрoD и гpеч.:litlрёoсмoтpto) paЗЛичtlЬIx TипoB. B течение ПoсЛrДI{иx 200 лет- л4цKpoсКonuя('l|(lпoвaяЯв.ЛЯeTcЯ o.цt{иМ иЗ oснoBнЬlх МrToДoB в биo.]|()l.иl,{. C пoмoщьto сBrToBoгo МиKpoсKoITa Мo)Кнo oпpеделить фop|\lV' paЗМrpЬI' сTporниr и MI{oгие ДpyГиr ХapaKTrpисTиKи МиKpol l[J,t,cктoB. Светoвoй МикpoсKoп .цaеT BoзMo)KHoсTЬрaЗЛичaTЬ сTp}t(IV|)I,| с paссToЯF{иеМ Мr)(дy эЛеМенTaМи .цo 0'20 мкм. Бoлее Kpyпrrl,lс эмбpиoЛoгичесКиr oбЪеKTЬI, иMеIoЩие paЗМеpЬI ПopядKa нr-сKoЛЬKиx MиЛЛиМrTpoB' нaПpиМеp ToTzuIЬнЬIе ПpеПapaTЬI' Мoxt{oизучaTЬ с ПoмorцЬIo бoлее пpoстой oптическoй систrМЬI - сПециa,rьнoй бuнoкуляpнoЙлуnы.
Это оптическoе yстpoйсTвo чaсTo Е{aзЬIв,aI{JT сmеpеo]|4utсpocКonoj4, TaК КaК oнo пprДнaзнaчеF{o .цЛя иЗг{rния oбъемньIх oбъектoB и ПoзBoЛяeT paссМaTpиBaTЬ их' сoХpaняяПpиBЬIч}Ioе .цЛя чеЛoBекa бинoкуляpнor зpениe (видение oбъектaoбoими глaзaми). Cxемa Пpoxo)qцеI{ия oIТTичrских лyrей B сTеproМиКpoсКoпе Пpr.цсTaBлrнa нa pиc.4, А. o6щee }ъеличеHие сTrpеoМиKpoсКoПa paBнo ITpoизBеДеъ{иIo yBеЛиЧенияЛ)rIIЬIнa }TЛoBoе yBе-И ДЛЯ Мo.цеЛи МБС-10 сoсTaBЛяеT oт 3,6 дo 84 взaBисиМoсTи oT Toгo, кaкoЙ КoМПЛеKT oКyЛяpoB исПoЛЬзуеTся.o.цнa из TипичнЬIх onmuчесlсuх схеJ|4 .t|4uldpoскona ПpИBе.ценa нapиc.4,6.
Paссмaтpивaемьrй oбъект (пpепapaт - oKpaшIенньrЙ гис_ToЛoгичrсKий сpез oбЪектa, ле>кaщий rra Пpе.цМrTнoМ сTеKЛe и Лo-ЛичеIII,Iе oKyЛяpa-\1ll,ll l ,t t.l,l й ПoКpoBнЬIМ) пoмещaroT нa сToЛиК МиKpoсKoП a.Koнdенсop|.()||lloltTpиpyеТ F{a oбъекте пyчoК с]]еTa' oTpaЖalоЩегoся oT ЗеpКa'rlt, Ис.гoчHиКoМ сBеTa B МИКpoсKoПr чaЩе BсrГo сл},)КиТ спrциzL'IЬ||l'| ii OсBеTиTеЛЬ' сoсToяЩиЙ.
иЗ ЛaMПЬI и ЛиI{ЗЬI-Кoллектopa. Инo_t..1|/li|с ПoмoщЬIoЗеpКzLIIaMиКpoсKoпa нa oбъrкт нaПpaBЛяIoт oбьrч-(диaфpaгмa oсBrTиTr_71нсвнoй свс'г. {ведиафрaгМЬI- |1oJ.Iевaя oГpaI{иLIиBaтo.Гtt',t) v| сr|lеРmУРная (диaфpaгМa Koнденсopa)сBrToIl()|| llyLIoK и yМеHЬшIaIoT ]] HеМ ДoЛIo paссеЯнI{oгo сBеTa, ПoПaДalo|||(.l.() Ha ПpеПapaT <(сo сTopoнЬI)> и Hе yчaсTByЮЩсгo вфopмиpoBal t t t l t изoбpa>KeкИЯ. Линзьt oбъекm uв а И o ldуля pa Мl,{КpoсKoП aу tsrЛИtlt,r it.|||l}llIoT BиДиМoeизoбpaxение oбъектa.Общее увеЛuчеlluе л4uKpaсIdona patsнo ПpoиЗBrДениrо линейнoгo\'lt(]JIиЧeния oбъективa I{a уTЛoBoe yBеЛичение oKyЛяpa.
oбьtчнo.)()|'сKTиBЬI МиКpoсKolТa иМеIoT уBеЛиЧrниЯ oт 6,3 дo l00, a oKyЛя|)|,I- oT 7 дo |5 (их знa.тенИЯ ГpaBИpУIoTся нa oпpaвaх), пoэToМy()()Illсе yвеЛичrHиr МиKpoсKoпa Ле)KиT B ПpеДеЛaх oт 44дo l500.l(poме уBrЛичrния бoльпryо poЛЬ иГpaеT p(lЗpеluаЮщая сnocoбIl|)('ltlь 'MuкpoсKono. Ее кpитеpиеМ явЛяеTся ПpеДел, Дo КoTopoГo.цBr|(}'IKи нa пpеПapaTе paЗЛиЧиМЬI KaК oTДrЛЬнЬIe oбъектьr. Этo paс( l()'| Hиe du мo>кет бьtть paссvИTaнo пoфopмyле (пpиведенa B уПpo_t||(lIIHoМ виде):do=|,22х/2N.^.,lttсN.A.- чttсЛoBaя aпrpTypa' yKaЗaнт{aяпoлoвИlнaУГЛa paсKpЬITия oбъек||||\,,|' t1кoэффиЦиенT пpеЛoМЛrния иММеpсиoннoй сprДЬI Ме)K_llV tlбъектиBoМ и ol(yляpoМ; .цЛя BoЗ.цУxa ,? paвнo 7, для иММеpси}"-дIЛиFIa BoЛнЬI сBеTa;tl;t tlбЪеKTиве:N.A.= и Sino (o()|IIloГo МaсЛa и сTеКЛa.I.аким!/1ltlйке МИKpoсKoПa.lIoлуиенuе uзoбpаltсенuя npепopаma в .л,Iuкpoскone B oснoBнЬIх (хoтяrt ltltибoлеr пpoстьrх) ЧеpTaХ Mo)с{o oПисaTЬ B paМKaх ГеoMеTpичссl'rlii OПтики (pис. 5).