Структурно-функциональные закономерности воздействия амфифильных блок-сополимеров на раковые клетки (1105748)
Текст из файла
2СОДЕРЖАНИЕСтр.Список сокращений.................................................................................................................4Введение...................................................................................................................................51. О Б З О Р Л И Т Е Р А Т У Р Ы........................................................................................91.1. Синтез и физико-химические свойства амфифильныхблок-сополимеров....................................................................................................................91.1.1. Плюроники ................................................................................................................91.1.2. Полиглицерины........
.......................................................................………..…......141.1.3. Сополимеры на основе полидиметилсилоксана...................................................171.1.4. Взаимодействие амфифильных блок-сополимеров с модельными липиднымимембранами и особенности структуры клеточных мембран ........................................................181.2.
Множественная лекарственная устойчивость раковых клеток и ее преодоление спомощью плюроников ......................................................................................................................221.2.1. Влияние плюроников на устойчивость раковых клеток клекарствам..........................................................................................................................................231.2.2. Предполагаемые механизмы подавления активности P-гликопротеинаплюрониками ………………………………………………………………………………..……..271.3.
Токсичность плюроников .............................................................................................341.4. Защитная роль плюроников ..........................................................................................382. Э К С П Е Р И М Е Н Т А Л Ь Н А Я Ч А С Т Ь ……………………………………...422.1.Материалы........................................................................................................................422.2.Методы исследования......................................................................................................432.2.1. Определение молекулярно-массовых характеристик полимеров........................432.2.2.
Определение ККМ с помощью флюоресцентного зонда......................................432.2.3. Определение ККМ методом статического светорассеяния …………….............442.2.4. Культивирование клеток ........................................................................................452.2.5. Определение цитотоксичности доксорубицина и полимеров.............................472.2.6. Влияние полимеров на цитотоксичность доксорубицина...................................482.2.7.
Анализ накопления DOX в клетках .......................................................................482.2.8. Получение меченных тритием полимеров ...........................................................492.2.9. Радиоавтография .....................................................................................................492.2.10. Получение конъюгата плюроника L61 с флуоресцеинизотиоцианатом …….5233. Р Е З У Л Ь Т А Т Ы И И Х О Б С У Ж Д Е Н И Е.....................................................543.1 Характеристика исследованных соединений ................................................................543.1.1.
Структура………………………………....................................................................543.1.2. Расчет гидрофильно-липофильного баланса ……………..…................................573.1.3. Критическая концентрация мицеллообразования………………...........................583.2. Цитотоксичность исследованных соединений……………………………...………...653.2.1. Определение цитотоксичности: обоснование метода…........................................653.2.2.
Токсичность доксорубицина для клеток MCF7/R ..................................................663.2.3. Цитотоксичность исследованных соединений........................................................673.2.4. Сопоставление цитотоксичности и мицеллообразования исследованныхсоединений..........................................................................................................................................733.3. Увеличение жизнеспособности клеток под действием ПЭО-содержащих блоксополимеров .......................................................................................................................................763.4.
Влияние исследованных соединений на устойчивость раковых клеток кдоксорубицину ...................................................................................................................................863.4.1. Влияние плюроника L61 на чувствительность раковых клеток кдоксорубицину…………………………………………………………………………....................863.4.2.
Определение минимальной концентрации соединения, достаточной дляподавления лекарственной устойчивости........................................................................................883.4.3. Зависимость степени подавления лекарственной устойчивости от концентрацииисследованного соединения…………………………………………………..................................893.4.4.Особенностидействиянекоторыхблок-сополимеровналекарственнуюустойчивость раковых клеток............................................................................................................933.4.5.Предполагаемый механизм подавления лекарственной устойчивости раковыхклеток.........................…………………………………………...........................................................983.5. Исследование локализации рассматриваемых соединений при их взаимодействии склетками.............................................................................................................................................1003.5.1.
Получение FITC-меченых блок-сополимеров ......................................................1003.5.2. Влияние присоединенного FITC на свойства блок-сополимеров.......................1013.5.3. Исследование локализации блок-сополимеров флуоресцентным методом …..1013.5.4. Исследование локализации методом радиоавтографии ......................................105 Заключение.............................................................................................................................111Выводы...................................................................................................................................116Список цитированной литературы......................................................................................1174СПИСОК СОКРАЩЕНИЙГЛБ – гидрофильно-липофильный балансГПХ – гель-проникающая хроматографияДМС - диметилсилоксанДМСО – диметилсульфоксидДФГТ – дифенилгексатриенККМ – критическая концентрация мицеллообразованияКМП - минимальная концентрация полимера, при которой прирост клеток максималенННК – наибольшая нетоксичная концентрацияПАВ – поверхностно-активное веществоПДМС - полидиметилсилоксанПО – пропиленоксидППО – полипропиленоксидПЭГ - полиэтиленгликольПЭО – полиэтиленоксидТГФ – тетрагидрофуранТНБС - тринитробензолсульфокислотаЭО – этиленоксидЭКМЛУ – минимальная концентрация полимера, достаточная для максимальногоподавления множественной лекарственной устойчивости раковых клетокDAPI – флуоресцентный краситель, 4',6-diamidino-2-phenylindole dihydrochlorideDMEM – Dulbecco's Modified Eagle's Medium - среда для культивирования клетокDOX – доксорубицинFITC – изотиоцианат флуоресцеинаG - глицеринМЛУ – множественная лекарственная устойчивостьMRA - micoplasma removing agent, препарат от микоплазмыМТТ – 3-(4,5-диметилтиазолил-2)-2,5-дифенилтетразолий бромидPBS – phosphate-buffered saline – буфер (10 мМ фосфата и 145 мМ NaCl, pH 7,4)PG – полиглицеринP-gp – Р-гликопротеинREP - (Radical, Ethylene oxide, Propylene oxide) двублочный сополимер ЭО и ПОIC50 -концентрация полимера, вызывающая гибель 50% клетокIC 50DOX ‐ концентрация доксорубицина, вызывающая гибель 50% клеток5ВВЕДЕНИЕАктуальность темы.
Синтетические амфифильные блок-сополимеры привлекливнимание биохимиков, когда 25 лет назад было обнаружено, что трехблочные сополимерыстроенияполиэтиленоксид(ПЭО)-полипропиленоксид(ППО)–полиэтиленоксид(плюроники) способны снижать устойчивость раковых клеток к лекарствам (множественнуюлекарственную устойчивость, МЛУ), подавляя выброс лекарства из клетки и тем самымповышая эффективность химиотерапии [1]. Разработана лекарственная форма SP1049C,представляющаясобойсмесьплюрониковcпротивоопухолевымантибиотикомдоксорубицином, которая успешно прошла вторую фазу клинических испытаний по лечениюпациентов с раком пищевода [2].Позднее были обнаружены два других биологических эффекта плюроников.
Наиболеегидрофильные представители этого класса с массовой долей ПЭО 70 - 80% способнызащищать живые клетки от механических повреждений, увеличивая модуль упругостиклеточной мембраны, и в случае таких повреждений – способствуют восстановлению еецелостности. В то же время плюроники могут вызывать прямо противоположный эффект гибель клеток.В связи с этим возникает вопрос, какие особенности структуры и физико-химическихсвойств плюроников обусловливают проявление столь различных биологических эффектов.Степень разработанности темы.
Характеристики
Тип файла PDF
PDF-формат наиболее широко используется для просмотра любого типа файлов на любом устройстве. В него можно сохранить документ, таблицы, презентацию, текст, чертежи, вычисления, графики и всё остальное, что можно показать на экране любого устройства. Именно его лучше всего использовать для печати.
Например, если Вам нужно распечатать чертёж из автокада, Вы сохраните чертёж на флешку, но будет ли автокад в пункте печати? А если будет, то нужная версия с нужными библиотеками? Именно для этого и нужен формат PDF - в нём точно будет показано верно вне зависимости от того, в какой программе создали PDF-файл и есть ли нужная программа для его просмотра.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
