Диссертация (1091824), страница 4
Текст из файла (страница 4)
Что касается метокси групп, то изменениерасположения данной группы (орто- или пара-) в кольце не оказалосущественного влияния, однако, введение самой метокси группы увеличилоиндекс ICR.Таким образом, введения донора электронов в бензольное кольцооказывает положительное влияние на ICR, в то время как акцепторыэлектронов в бензольном кольце (например, кетоновая группа) являетсянегативным фактором инкорпорирования вещества в волосы.В результате всех проведенных исследований авторы [61] сделалиследующие выводы:чем длиннее алкильная цепь, тем выше ICR;тройные связи алкильной цепи снижают ICR;19бензольные кольца при азоте увеличивают ICR;введение в аминогруппу заместителей, снижающих основностьгруппы, практически не влияет на ICR.В зарубежной литературе также встречаются исследования по изучениюинкорпорирования и других веществ в структуру волос [73, 76, 82],например, таких как фенциклидин, кодеин, фенобарбитал, кокаин, метадон,никотин и др.
Результаты всех этих исследований показали, что веществаосновной природы лучше переходят в пигментированные волосы, нежели внепигментированные.1.3 Метаболизм и содержание экзогенных веществ в волосахПроцесс метаболизма экзогенных веществ непосредственно в волосах непроисходит. Однако из п. 1.2 следует, что в основном ксенобитики попадаютв волосы из крови в процессе их формирования. Таким образом, в волосахследует искать либо вещества в нативном виде, либо их метаболиты,присутствующие в крови.
Информация по таким метаболитам для каждогосоединения представлена в соответствующей литературе [55, 88].Вследствие того, что механизм инкорпорирования ксенобиотиков в волосывесьма сложен и зависит от многих факторов, предсказать каково будетсодержания ФАВ в волосах в зависимости от количества потребляемыхвеществ практически невозможно.
В мире проведено большое количествоисследований, посвященных количественной оценки содержания различныхксенобиотиков в волосах. В таблице 1.3.1 представлены данные поопределяемым в волосах аналитам и их содержаниям.Таблица 1.3.1 Данные по определяемым в волосах аналитам и ихсодержаниямВеществоМетадонБупренорфинКокаинКаннабиноидыСодержаниеаналита,нг/мг10.9-21.01.2-2.60.3-12.40.5-151.810.0-100.00.01-1.000.03-3.000.02-0.39Аналит вволосахМетадонEDDPБупренорфинНорбупренорфинКокаинКаннабинолКаннабидиолТКГ-кислота20Литературныйисточник[87][43][88][40, 88]МетамфетаминГероинМорфинФенциклидинМетамфетамин6-МАММорфинКодеинФенциклидин2.1-27.40.05-53.11.0-1.30.260.33-14.00[88][40][36][55]Следует отметить, что количественная оценка содержания веществ вволосах сложная задача, т.к.
не существует калибровочных образцов волоснатурального происхождения с заранее известным содержанием аналита. Какправило, такие образцы получают путем добавления к бланковым волосаманализируемых веществ в различных концентрациях.Еще одним важным вопросом в количественном анализе волос являетсяинтерпретация полученных результатов. Всемирным обществом по анализуволос (SOHT) на основании многолетнего опыта в 2011 году былиразработаны Рекомендации по анализу наркотических средств ипсихотропных веществ в волосах [23].
В данной рекомендации представленытак называемые ―CutOff‖ (минимальное количество вещества, определяемоев волосах, по которому можно сделать вывод о его употреблении человеком)для анализа наркотических средств и психотропных веществ в волосах поскриннинговым и подтверждающим методикам (см. табл.
1.3.2).Таблица 1.3.2 ―CutOff‖ для анализа наркотических средств и психотропныхвеществ в волосах по скриннинговым и подтверждающим методикам [23]Скрининговая методикаCutOff,Группы веществнг/мгАмфетамины0.2Каннабиноиды0.1Кокаин0.5Опиаты0.2Подтверждающая методикаЦелевыеCutOff,аналитынг/мгАмфетамин0.2Метамфетамин0.2МДА0.2МДМА0.2ТГК0.05ТГК-кислота0.0002Кокаин0.5Бензоилэкгонин0.05Морфин0.2Кодеин0.26-МАМ0.221Метадон0.2Бупренорфин0.01МетадонEDDPБупренорфинНорбупренорфин0.20.050.010.011.4 Химико-токсикологический анализ волосИсследование волос актуально для многих областей, таких как судебнаямедицина, клиническая фармакология, клиническая токсикология и химияокружающей среды.
В рамках химико-токсикологической экспертизыисследование волос позволяет решать особую задачу – устанавливать фактналичия таких экзогенных веществ, как наркотические средства,психотропные вещества или лекарственные препараты в организме человекаспустя продолжительное время после их употребления.Химико-токсикологический анализ волос состоит из нескольких этапов:отбор проб волос, внешний смыв, отмывка от внешних загрязнений,пробоподготовка и инструментальный анализ.1.4.1 Отбор проб волосДля отбора на химико-токсикологический анализ волосы должны бытьчистыми и сухими.
Для более показательного анализа волосы не должныбыть окрашены, осветлены или подвержены химической завивке.Отбор проб лучше проводить с теменной области головы [46]. Такжеподойдут волосы с лобной и затылочной зон. В случае отсутствия волос наголове могут быть использованы волосы с подмышечной, пазушной илобковой области тела.
При этом волосы, отобранные с головы и другихобластях тела, не должны быть смешаны.Для отбора проб волос необходимо использовать стальные острыеножницы, предварительно хорошо протертые спиртовой салфеткой.Пучок волос толщиной примерно 0,5-0,7 см в районе теменной областиголовы фиксируют нитью яркого цвета. Волосы обрезают максимальноблизко к коже головы и помещают в бумажный конверт, помечая какойконец пучка был максимально близок к голове (см.
рис. 1.4.1.1). На конвертевыполняется соответствующая маркировка.Отобранные волосы необходимо хранить в сухом помещении прикомнатной температуре в бумажном конверте или в фольге с цельюизбегания контаминации [23]. Срок годности волос не ограничен.22Рисунок 1.4.1.1 Фото отбора проб волос согласно рекомендациям [46].1.4.2 Внешний смывВнешний смыв с волос проводится в случае необходимости установленияфакта контакта с целевыми экзогенными веществами. Например, присудебном делопроизводстве для доказательства контакта с наркотическимисредствами и психотропными веществами.Обычно для проведения внешнего смыва используют органическиерастворители: метанол, этанол или изопропанол. Данная процедура − непродолжительная по времени и достаточно простая.Волосы взвешивают и помещают в полимерную пробирку, затемдобавляют органический растворитель объемом 3-5 мл и выдерживают 1530 мин в ультразвуковой бане. После чего растворитель отбирают в чистуютару и концентрируют для последующего проведения инструментальногоанализа [46].1.4.3 Отмывка волос от внешних и пото-жировыхзагрязненийВ мире не существует стандартного общепринятого метода отмывки волосот внешних и пото-жировых загрязнений (деконтаминация).
Процессдеконтаминацииоченьважен,т.к.онпомогаетизбежатьложноположительных результатов при анализе волос на наличие различныхэкзогенных веществ.Обычно многие исследователи используют для этих целей метанол [46].Некоторые исследователи используют водные растворы, например,фосфатный буфер. Schaffer M.I. с сотрудниками [74] сравнили свой способотмывки от внешних загрязнений с помощью фосфатного буфера сдеконтаминацией метанолом .
Они установили, что метанол хорошо смывает23липофильные вещества, например ТГК-кислоту. В среднем промывкаметанолом удалила 48% кокаина с внешней поверхности волос. В то времякак за 3 промывки фосфатным буфером удалось смыть 88% кокаина [48, 74].Дополнительные промывки фосфатным буфером увеличили процент смытогококаина до 92%. Авторы отмечают, что ни один способ не дает 100%отмывки.Исследователями [45, 46] был поставлен следующий эксперимент. Пробыбланковых волос выдерживали в растворе кокаина с концентрацией 1 мкг/млв течение часа. Затем проводили внешнюю отмывку двумя различнымиспособами.
Согласно первому способу пробы волос с нанесенным кокаиномотмывали сначала изопропанолом в течение 30 мин, а затем триждыфосфатным буфером в течение 30 мин каждый. В данном случаеиспользовали именно изопропанол, т.к. использование этанола можетприводить в процессе отмывки к образованию метаболита кокаина –кокаэтилена. Согласно второму способу зараженные кокаином волосы такжекак и по первому, а затем дополнительно дважды промывали фосфатнымбуфером в течение часа каждый. В результате было установлено, что попервому способу отмывка составила 76-93%, а по второму – 83-97%. Авторытакже отмечают, что в процессе отмывки в пробах образовывался метаболиткокаина – бензоилэкгонин.В литературе встречается несколько различных способов отмывки волос отвнешних загрязнений, и каждая лаборатория придерживается своего способа.В таблице 1.4.3.1 представлен краткий обзор методов деконтаминации.Таблица 1.4.3.1 Краткий обзор методов деконтаминации согласнолитературе№п.п.1.2.Описание процедуры10 мин промывка шампунем,затем 10 промывок водой15 мин промывка этанолом,затем 2 раза по 30 минфосфатным буферомПримечаниеИспользуют 1 мл10ммолярногофосфатного буфера срН 7 при 37°С на 510 мг волос.
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
