Диссертация (Прогнозирование и дифференциальная диагностика различных вариантов преэклампсии), страница 8

Нами были изучены особенности течения настоящейбеременности по триместрам, где особый интерес представляли такиеосложнения беременности, как чрезмерная рвота беременных, угрозапрерывания,гестационныйсахарныйдиабет,заболеваниямочевыделительной системы, чрезмерное увеличение веса при беременности.43Данные объективного исследования включали в себя: общий осмотр,оценку типа телосложения, антропометрию.

Антропометрические измеренияпроводились согласно нормативным документам. При помощи полученныхрезультатов антропометрических исследований по формуле Кетле (1865) былвычислен индекс массы тела (ИМТ): отношение массы тела (кг) к квадратуроста (м2). Согласно рекомендациям ВОЗ 1999 года массу считалинормальной при значениях ИМТ в пределах 18,5–24,9 кг/м2, недостаточной(дефицит) - менее 18,5 кг/м2, избыточной - 25–29,9 кг/м2, ожирение - 30 кг/м2и более.Гестационное увеличение массы тела оценивалось как по триместрам,так и в целом за беременность (разница между показателями веса наканунеродов и исходной массы).

Согласно «Руководству по прибавкам массы вовремя беременности» в зависимости от исходного индекса массы тела (IOM,2009) рекомендуемой прибавкой для нормально весящих женщин считается11,5-16 кг, для пациенток с дефицитом массы – 12,5-18 кг, при избыткемассы – 7-11,5 кг, при ожирении – 5-9 кг. Прибавки веса в 1 триместребеременности проводились по перцентильным таблицам.Нами было определено состояние дыхательной, сердечно-сосудистой,нервной, пищеварительной и мочевыделительной систем.При наружном акушерском исследовании определяли положение ипредлежание плода, его позицию и вид с помощью классических приемовЛеопольда, измеряли высоту стояния дна матки, окружности живота, а такжепроизводили аускультацию сердцебиения плода при помощи акушерскогостетоскопа и фетального допплера Angelsounds JPD-100B.Всемпациенткамбылипроведеныстандартныелабораторныеисследования, предусмотренные нормативными документами, а именноклинические и биохимические анализы крови, определение группы крови ирезус принадлежности, гемостазиограмма, общий анализ мочи, анализ мочипо Нечипоренко, определение суточной протеинурии и бактериологическоеисследование влагалищного отделяемого.44Измерение систолического и диастолического артериального давленияпроводилось методом Короткова Н.С.

с помощью ртутного сфигмоманометрас точностью до 2 мм рт. ст. в положении пациентки сидя в удобной позе всостоянии покоя 2 раза с интервалом не менее одной минуты на обеих руках,ориентируясь на более высокие значения при разнице показаний на правой илевой руке. Беременным, страдающим сахарным диабетом, АД измерялоськак сидя, так и в положении лежа. Степень повышения уровня артериальногодавления оценивалась по принятой классификации, где нормальные значенияСАД≤140, ДАД≤90 мм рт. ст., умеренная артериальная гипертензиядиагносцируется при фиксации САД и ДАД 140-159 и 90-109 мм рт. ст.соответственно, а тяжелая АГ при уровне САД выше 160 и ДАД более 110мм рт. ст.Состояние ребенка при рождении оценивали по шкале Апгар на 1 и 5минуте жизни, а также по наличию у новорожденного признаков родовыхтравм, морфофункциональной незрелости или переношенности, стигм ианомалий развития.Иммуноферментный метод.Спомощьюмикропланшетногоспектрофотометравертикальногосканирования «Tecan Sunrise» в сыворотке исследуемых беременных былиопределены следующие показатели:-неоптеринопределения(иммуноферментнаянеоптеринавтест-системасыворотке,плазмедляиколичественногомоче,компания-производитель: IBL international Germany);- гаптоглобин (иммуноферментная тест-система для количественногоопределения гаптоглобина в сыворотке и плазме, компания-производитель:Assaypro (USA);- адипонектин (иммуноферментная тест-система для количественногоопределения адипонектина, компания-производитель: Mediagnost Germany);45-S-эндоглин(иммуноферментнаятест-системадляколичественногоопределения эндоглина в сыворотке и плазме, компания-производитель:R&D systems a bio-techne brand USA);- плацентарный фактор роста PIGF (иммуноферментная тест-система дляколичественногоопределенияплацентарного фактора ростаPIGFвсыворотке, компания-производитель: IBL international Germany).Для проведения анализа кровь забирали из локтевой вены припоступлении в стационар/обращении в женскую консультацию или натощакс 7 до 9 утра (в день поступления в стационар или на следующее утро).

Кровьв объеме 5 мл центрифугировали в течение 10 мин со скоростью 2000 об/мини полученную сыворотку хранили при температуре минус 200С. Определениеосновано на методе количественного твердофазного иммуноферментногоанализа типа «сэндвич». Образцы сыворотки крови инкубировали в лункахпланшета с адсорбированными моноклональными антителами к конкретномубиомаркеру, в результате чего определяемое вещество связывалось сантителами покрытия.

После промывки все несвязавшиеся компонентыудалялись, и в лунки добавляли конъюгат поликлональных антител копределяемому гормону с ферментом. После второй промывки и удалениянесвязавшегосяконъюгатафермент-антителадобавлялисубстратныйраствор, который взаимодействовал с ферментом с образованием цветногокомплекса. Интенсивность развития окраски была прямо пропорциональнаконцентрации биомаркеров, связавшихся на первом этапе.

Цветная реакцияостанавливалась стоп-реагентом, и интенсивность окраски измерялась напланшетном фотометре, после чего строилась калибровочная кривая. Наоснованиикалибровочногографикарассчитываласьконцентрацияопределяемых биомаркеров в анализируемых образцах.Иммунофлуоресцентный метод.В сыворотке исследуемых беременных определяли уровни ADAMTS-13сиспользованиемтест-системTECHNOZYM®ADAMTS-13Activity«БиоХимМак» (Москва). Для проведения анализа кровь забирали из46локтевой вены при поступлении в стационар/обращении в женскуюконсультацию или натощак с 7 до 9 утра (в день поступления в стационарили на следующее утро). Кровь в объеме 5 мл центрифугировали в течение10 мин со скоростью 2000 об/мин и полученную сыворотку хранили притемпературе минус 200С.

Активность ADAMTS13 определяли методом FRET(fluorescence resonance energy transfer) с использованием флюорогенногосубстрата FRETS-VWF73 и выражали в процентах (%). Методикапроведения: подготовленные 100 μl стандарта и тестируемую плазмураскапывали в лунки белых пластин при комнатной температуре; добавляли100 μl субстрата раствора в приготовленный раствор в каждую лунку(концентрациясубстратав20μM);устанавливалипластинувфлюоресцентный спектрометр Syntrqy 4 (PerkinElmer, Япония) с λex = 340 нми λem = 450 нм на 30 секунд; проводили измерения флуоресценции каждойлунки каждые пять минут от 0 до 60 мин и вычисляли скорость реакции(наклон) путем линейной регрессии флуоресценции.Ультразвуковое исследование было проведено на аппаратах «Мedison»(США), «Voluson E8» (Производитель: GE Healthcare, США) и «SiemensACUSONAntares»(Производитель:допплерометрическойприставкой,Siemens-Acuson,использованиемГермания)сконвексногоитрансвагинального датчиков с частотой 5-7 МГц.

Проводилась расширеннаябиометрия плода, что позволяло не только рассчитать предполагаемую массуплода, но и определить соответствие сроку гестации. Тщательным образомоценивался плацентарный комплекс, обращая внимание на количествооколоплодных вод, наличие ультразвуковых маркеров внутриутробногоинфицированияисследованиеисостояниекровотокавплаценты.сосудахУЗ-допплерометрическоесистемы«мать-плацента-плод»проводилось всем пациенткам во втором и третьем триместре беременности.Кривая скоростей кровотока определялась в артерии пуповины, в дуговыхматочныхартерияхисреднеймозговойвычислением индекса резистентности.артерииспоследующим47Кардиотокографическое исследование. Всем беременным пациентками роженицам была проведена оценка состояния плода и сократительнойактивности матки с помощью кардиотокографического исследования нафетальном мониторе «G6B» с автоматическим анализом данных по тремнезависимым между собой критериям: Доуза-Редмана, Фишера и директивамФиго.

Анализ кардиотокограмм включал в себя параметры базального ритма,акцелераций, децелераций, осцилляций, показателя STV, шевелений плода, атакже характеристики маточных сокращений. Исследование длилось неменее 40 минут.Статистическая обработка результатов проводилась при помощипрограммы STATISTICA ver.10. С целью анализа качественных признаковприменялся критерий хи-квадрат Пирсона (χ²). В случае, если при анализечетырехпольных таблиц число ожидаемого признака было менее 10,использовался критерий хи-квадрат (χ²) с поправкой Йейтса; при частотахменьше 5 был применен двусторонний точный критерий Фишера (p).

Принормальномраспределенииколичественныхданныхрезультатыпредставлялись в виде средней арифметической и среднеквадратичногоотклонения (M ± σ), а достоверность рассчитывалась при помощи критерияСтьюдента (t). При отсутствии же нормального распределения былииспользованы медиана с указанием межквартильного интервала (Мe (L – H))и критерий Манна-Уитни (U). Для оценки связи конкретного фактора риска сразвитием преэклампсии была вычислена величина отношения шансов (ОШ)с доверительным интервалом 95%. Для всех видов анализа статистическидостоверным считали значения p <0,05.48ГЛАВА 3.

РЕТРОСПЕКТИВНЫЙ АНАЛИЗ ФАКТОРОВ РИСКАРАЗВИТИЯ РАЗЛИЧНЫХ ВАРИАНТОВ ПРЕЭКЛАМПСИИ(РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ)На этапе ретроспективного исследования нами была поставлена задачавыяснить значимые анамнестические, антропометрические, социальнобиологические, клинические и лабораторные показатели, на основаниикоторыхможнобылобысформироватьгруппырискаразвитияпреэклампсии. Для решения данной задачи было проанализировано 236историй родов пациенток, родоразрешенных в ГБУЗ НО «Дзержинскийперинатальный центр» в период 2015-16 гг. Основную группу составили 86историй родов женщин с преэклампсией,реализованнойв разныегестационные сроки, а в контрольную группу вошли 150 карт пациенток безПЭ. Выбор историй родов проводился сплошным слепым методом.В процессе работы мы сочли целесообразным разделить основнуюгруппу в зависимости от сроков реализации ПЭ на 2 подгруппы:• 1 подгруппу составили 31 история родов женщин с ранней ПЭ(манифестация до 34 недель гестации);• 2 подгруппа была представлена картами 55 пациенток с позднейПЭ (проявление после 34 недель беременности).Полученные нами данные свидетельствуют о том, что средний возрастбеременных в основной и контрольной группах был примерно одинаковым исоставил 29,45,6 и 28,04,1 года соответственно (p>0,05).