Диссертация (Клиническое значение эндотелиальной дисфункции в развитии акушерских и перинатальных осложнений), страница 34

Таким образом,при анализе показателей плазменного и клеточногодостоверных отличийзвеньев коагуляциив стандартных лабораторных показателях выявлено небыло.Подсчет циркулирующих ДЭК по методике J. Hladovec с соавт. (1978)прдемонстрировал следующие результаты. В основной группе среднее количествоДЭК составило 7,9×104±2,75 клеток/100 мл. В контрольной группе среднееколичество ДЭК было почти в 1,5 раза выше аналогичного показателя основнойгруппы и составило 9,9×104±5,05 клеток/100мл (р<0,05). Средний эквивалентныйдиаметр ДЭК составил в основной группе 37,3±4,54 мкм, в контрольной группеэтот показатель составил 32,7±7,61 мкм (р<0,001). По данным литературы,ангиопротекторныйфосфодиэстеразыэффектидипиридамоланакоплениицАМФзаключаетсяицГМФ,вподавлениичтопотенцируетвазодилатирующий эффект NO и простациклина, а также усиливает секрециюактиватора плазминогена (tPA), обладающего ангиопротекторным свойством[117].

По данным литературных источников, дипиридамол блокирует адгезиютромбоцитовксубэндотелиюиколлагену,стимулируетобразованиеэндотелиоцитами простациклина, ингибирует экспрессию провоспалительныхцитокинов, потенцирующих развитие эндотелиальной дисфункции [88; 132].Комбинация антиагрегантного и вазодилатирующего эффекта дипиридамолаулучшает условия для адекватной перфузии тканей, профилактируя гипоксию[117].217Исследуемые группы были статистически сопоставимы не только поанамнезу, вредным привычкам, соматической патологии (с учетом факторовриска развития эндотелиальной дисфункции), но и по лабораторным показателямсвертывающейсистемы.Темнеменее,проведенноеисследованиеморфометрических маркеров поражения эндотелия продемонстрировало отличиев сравниваемых группах: количество ДЭК в группе приема дипиридамола почти вполтораразапревысилопоказательконтрольнойгруппы(р<0,05),аразработанный нами метод витальной компьютерной морфоденситометриидесквамированных эндотелиоцитов показал наиболее достоверное отличие висследуемых группах (р<0,001).

Таким образом, в работе продемонстрированыангиопротективные свойства антиагрегантной терапии за счет благоприятноговоздействия на эндотелий сосудов. Применениеу беременных дипиридамолапатогенетически обосновано с точки зрения коррекции состояния эндотелия, чтоможет профилактировать развитие акушерских и перинатальных осложнений.К наиболее безопасным и эффективным препаратам, вляющим на гемостази успешно применяемым у беременных, относят также низкомолекулярныегепарины (НМГ) [14; 26].

Спектр возможностей НМГ не ограничиваетсяантикоагулянтными свойствами. НМГ оказывают противовоспалительный эффектза счет повышения сывороточного α-TNF-связывающего протеина, подавляясистемное воспаление [14]. По данным литературы, гепарины уменьшают апоптозэндотелиоцитов и число циркулирующих ДЭК через активацию NO-синтазы,которая обладает антиапоптическим эффектом [48]. Терапия антикоагулянтамиспособствует улучшению состояния интимы сосудов и тем самым оптимизациимикроциркуляции как в системном, так и в маточно-плацентарном кровотоке [43].В исследование было включено 30 беременных.

Основным критериемотбора было наличие при лабораторном исследовании маркеров наследственныхили приобретенных форм тромбофилии. Изучение повреждений сосудистойстенки при тромбофилиях во время беременности – интереснейший аспектисследования эндотелиальной дисфункции. В основную группу вошли 11пациенток, у которых проводилась терапия препаратами НМГ. Контрольную218группу составили 19 беременных.

По анамнезу, вредным привычкам исоматической патологиигруппыбылистатистическисопоставимы.Приисследовании лабораторных маркеров тромбофилий получены следующиерезультаты. В основной группе мутации выявлены у 9 пациенток (81,8%): PAI I у4 человек (36,4%), F2 у 1 беременной (9,1%), F5 у 1 женщины (9,1%), мутациифолатногоцикла выявленыу 7(63,6%)пациентокосновнойгруппы,диагностические титры антител к кардиолипинам выявлены у 5 беременных(45,5%), волчаночные антитела обнаружены у 3 пациенток (27,2%). Вконтрольной группе маркеры наследственных тромбофилий выявлены у 11пациенток (57,9%): мутация PAII выявлена у 10 человек (52,6%), F2 у 1беременной (5.3%), F5 у 2 беременных (10,5%), мутации фолатного рядаобнаружены у8 беременных (42,1%), антикардиолипиновые антитела вдиагностических титрах выявлены у 5 беременных (26,3%), волчаночныеантитела обнаружены у 2 пациенток (10,5%).

У всех беременных изученосостояние гуморального и клеточного гемостаза.При оценке основныхпоказателей свертывающей системы достоверных отличий выявлено не было.Средний показатель АЧТВ составил 28,2±1,53 сек. в основной группе и 31,2±8,32сек. в контрольной группе (р>0,05). Протромбиновый индекс составил101,1±15,1% в основной группе, и 97,0±8,31% - в контрольной группе (р>0,05).Средний уровень фибриногена был 4,1±0,73 г/л в основной группе и 3,6±0,62 г/лв контрольной группе (р>0,05).

Средний показатель МНО: 1,0±0,10 в основнойгруппе и 1,0±0,06 в контрольной (р>0,05). D-димер у пациенток в основнойгруппе составил 0,2±0,16 и 0,4±0,19 – в контрольной (р>0,05). Следует отметить,что в основной группе у 2 человек D-димер был выше референсного значения(18,2%). В контрольной группе превышение показателя D-димера зафиксированоу3пациенток(15,8%).Среднееколичествотромбоцитовсоставило251,5±50,61×109/л в основной группе и 245,2±52,82×109/л – в контрольной группе,и также не имело достоверных отличий в исследуемых группах (р>0,05).

Среднийобъем тромбоцита составил 10,0±1,21 fl в основной группе и 9,9±1,63 fl вконтрольной группе (р>0,05). Средний показатель тромбокрита составил2190,3±0,06% в основной группе и 0,2±0,05% в контрольной группе беременных(р>0,05). Ширина распределения тромбоцитов по объему составила 11,9±2,11 fl упациенток основной группы, и 12,6±1,93 fl у пациенток контрольной группы(р>0,05) .При цитологическом исследовании эндотелиальной дисфункции полученыследующие результаты. Среднее количество ДЭК в основной группе составило11,4±9,27×104 клеток/100мл.

В контрольной группе этот показатель был выше исоставил 15,7±9,61×104 клеток/100 мл (р>0,05). Средний эквивалентный диаметрДЭК в основной группе составил 34,9±11,74 мкм. В контрольной группе среднийдиаметр ДЭК был меньше и составил 27,8±8,94 мкм. Таким образом, в группеприема препаратов НМГ средний диаметр ДЭК был в 1,5 раза больше, чем вконтрольной группе (р<0,001)У всех беременных проведено исследование концентрации маркера апоптозабелка р53. В литературе убедительно доказано участие апоптоза в патогенезеразличныхвидовтромбофилий.АФАсвязываютсясповерхностьюэндотелиоцитов, повергшихся апоптозу, а также сами инициируют апоптозэндотелиальных клеток [14].Доказано повышение активности апоптозаэндотелиоцитов при гипергомоцистеинемии [194]. Дефицит протеина С илипротеина S снижает цитопротективное воздействие путем усиления апоптоза, чтотакже приводит к дефекту имплантации [26].

Концентрация белка р53 всыворотке крови у женщин основной группы в нашем исследовании составила0,01±0,009 Ед/мл.в контрольной группе этот показатель выше, и составил0,02±0,010 Ед/мл (р>0,05).Таким образом, прием препаратов НМГ во время беременности вызывализменениявморфометрическихпараметрахэндотелиальныхклеток.Сравниваемые группы были статистически сопоставимы по основным факторамриска развития дисфункции эндотелия. Традиционные показатели свертывающейсистемы – как маркеры плазменного, так и клеточного звена гемостаза непродемонстрировали достоверных отличий в исследуемых группах.

КоличествоДЭК и концентрация белка апоптоза р53имели некоторое отличие в нашем220исследовании. Так, традиционный маркер эндотелиальной дисфункции –количество ДЭК – был ниже в группе приема препаратов НМГ, также в группепациенток, получавших антикоагулянтную терапию, показатель концентрациибелка апоптоза р53 был в 2 раза меньше, чем аналогичный показательконтрольнойгруппы,однакоэтиразличиянеимелистатистическойдостоверности (р>0,05). Вероятно, для окончательных выводов требуетсяпроведение мультицентрового исследования с участием большего числапациенток. Тем не менее, показатель СДДЭК имел статистическое отличие висследуемых группах: морфометрический показатель был достоверно выше вгруппе беременных, в терапию лечения которых были включены препараты НМГ(р<0,001).

Введенный метод диагностики эндотелиальной дисфункции оказалсянаиболееинформативнымзарегистрированныедесквамированныхнамикритериемоценкиизмененияморфометрическихэндотелиоцитовобъективносостоянияотражаютэндотелия,показателейпроисходящиенарушения в сосудистой системе у беременных, что позволяет утверждать, чтовитальная компьютерная морфоденситометрия ДЭК может служить одним изметодов диагностики патологии беременности на клеточном уровне и найтиуспешное применение в клинической практике для ранней диагностикивозникающих нарушений в микроциркуляторном русле, а также мониторированияэффективности проводимого лечения.Задачи раннего выявления дезадаптации биологических объектов приинициациипатологическихактуальнейшимидиагностикивпроцессовсовременнойпатологииостаютсямедицине.фетоплацентарногонаСозданиекомплекса,сегодняшнийновыхденьтехнологийсовершенствованиеметодов раннего обнаружения нарушений сосудистого гомеостаза представляютважнейшую задачу в акушерстве. Витальная компьютерная морфоденситометриядесквамированных эндотелиоцитов у беременных имеет равную эффективность стакими классическими методами диагностики эндотелиальной дисфункции, какисследование биохимических маркеров поражения эндотелиальной системы(фактор фон Виллебранда, С-реактивный белок, микроальбуминурия), а также221подсчетциркулирующихДЭКвпериферическойкрови.Разработанныйморфоденситометрический анализ основан на принципиально новом объектеисследования,относящемсякразделуэксфолиантнойцитологии–десквамированным эндотелиоцитами периферической крови.