Диссертация (Способы коррекции ранних механизмов канцерогенеза в органах репродуктивной системы), страница 11

На клеткахрака простаты LNCaP было показано, что DIM ингибирует фосфорилированиебелка pRb киназами CDK4 и CDK2 [Vivar O.I., 2009]. Кроме того, Chinnakannu51др. регистрировали остановку клеточного цикла в культурах клеток ракапростаты LNCaP и C4-2B при воздействии на них DIM [Chinnakannu K., 2009].Было показано, что EGCG ингибирует клеточный рост и индуцируетапоптоз различных раковых клеток человека, оказывая лишь незначительныйэффект или вообще не оказывая эффекта на нормальные клетки; апоптозосуществляется за счет ингибирования фактора транскрипции NFκB [Chen Z.P.,1998]. Проапоптотические свойства EGCG реализуются, в том числе, иблагодаря его способности образовывать реактивные кислородные радикалы.Перекисное окисление липидов, входящих в состав клеточных мембран,вызывает гибель опухолевых клеток [Mukherjee S., 2014].Комбинированное использование EGCG с таксанами (т.е.

паклитакселом,доцетакселом) оказывает аддитивный эффект, приводя к ингибированиюпролиферации клеток рака простаты PC-3ML in vitro и in vivo [Stearns M.E.,2011]. Это происходит благодаря повышенной экспрессии таких апоптотическихгенов, как р53, p21, ген эффекторной каспазы-3. EGCG также повышаетчувствительностьклеточнойлиниимеланомычеловекакапоптозу,индуцированному химиопрепаратом вориностат. Аналогичное синергетическоедействие EGCG показано на модели нейробластомы in vitro при воздействии нараковые клетки SU5416 – ингибитора VEGFR2 [Nihal M., 2010; Mohan N., 2011].Механизм подобного воздействия реализуется за счет повышения экспрессиибелков семейства Bcl-2, каспазы-3, и подавления экспрессии VEGFR.1.5.5.

Противовоспалительные свойстваВ последние годы все чаще подтверждается противовоспалительныйтерапевтический потенциал полифенолов зеленого чая, прежде всего EGCG[Martin D.A., 2015; Murakami A., 2012; Fujiki H., 2015]. Подавлениепатологических воспалительных реакций осуществляется, в частности, врезультате ингибирования экспрессии фермента COX-2 [Hussain T., 2005; Fajardo52A.M., 2015], а также регулирования TNF-индуцируемой активации ядерногофактора транскрипции NF-kB [Jiang J., 2012].В исследованиях экспериментального аутоиммунного энцефаломиелитана мышах показано, что прием EGCG уменьшает тяжесть заболевания за счетподавления демиелинизации и воспаления головного мозга, снижает уровеньэнцефалитогенных Т-клеток и подавляет экспрессию провоспалительныхцитокинов и хемокинов.

Согласно полученным данным, EGCG являетсяперспективным противовоспалительным средством, которое может бытьиспользовано в дальнейшем для терапии рассеянного склероза и другихнейровоспалительных заболеваний [Sun Q., 2013].1.5.6. Ингибирование ОСКОпухолевые стволовые клетки являются источником формированияопухолевой массы, при этом значительная устойчивость к радио- ихимиотерапии со временем приводит к формированию усточивого фенотипавсех клеток опухолевого массива.

В частности, андроген-резистентный РПЖ(являющийсяпричинойвысокойсмертностиупациентовсРПЖ)непосредственно связывается с существованием ОСК [Sharifi N., 2007].Инициации и прогрессированию болезни способствует нерегулируемаяэкспрессия микроРНК, в частности семейства let-7, о котором мы упоминаливыше.

Предполагаемый механизм действия реализуется через белок EZH2,который контролирует функционирование ОСК, усиливая их самообновление иклоногенную активность [Kong D., 2012].Ингибированиеключевыхсигнальныхпутей,ответственныхзасамообновление клеток, может быть успешно использовано в таргетной терапиионкологических заболеваний.Недавно было показано, что DIM может ингибировать формирование сферклеток РПЖ, что свидетельствует о подавлении самообновления клеточнойпопуляции [Kong D., 2012]. DIM увеличивал экспрессию семейства микроРНК53let-7 и, следовательно, понижал экспрессию EZH2 не только на клеточныхлиниях РПЖ, но и в образцах ткани РПЖ человека, полученных в ходе II фазыклинических испытаний у пациентов, принимавших DIM до радикальнойпростатэктомии.

Исследователями предполагается, что DIM может служить вкачестве нового средства ингибирования развития РПЖ и последующихрецидивов.В работе 2012 г [Semov A., 2012] исследовалась специфичность DIM вотношении ОСК. Параллельно проводилось сравнение эффекта DIM итраниласта, антиаллергического препарата с установленной противоопухолевойактивностью, способного ингибировать рост стволовых клеток РМЖ.

Данноесвойство сильно зависит от активации AhR, нокдаун которых полностьюотменяет антипролиферативную активность траниласта и его способностьингибировать формирование маммосфер. На линиях клеток некоторых карцином(легких, МЖ, головы и шеи), а также меланомы подтверждено, что DIM являетсяселективным и мощным ингибитором ОСК. Было обнаружено, что обработкаDIM позволяет преодолеть химическую резистентность ОСК не только in vitro.В результате предварительной обработки ОСК перед имплантацией субстанциейDIM наблюдается ингибирование роста первичных опухолей у мышей.1.5.7. Влияние на гормон-зависимые сигнальные путиГормональная терапия является основным видом лечения таких гормонзависимых раков, как РМЖ и РПЖ, тем не менее, почти во всех случаях впроцесселеченияразвиваетсянечувствительностьктрадиционнойгормонотерапии.

Гормон-резистентный рак менее восприимчив к лечению,более агрессивен и имеет худший прогноз. Было предположено, что EGCGвзаимодействует с эстрогеновыми рецепторами, задерживая развитие гормонрезистентных опухолей и вызывая хемосенсибилизацию на всех стадияхразвития РМЖ и РПЖ in vitro и in vivo. Как было показано в случае РМЖ, EGCGвзаимодействует с ER и ингибирует клеточную пролиферацию, вызванную54эстрогенами, сенсибилизирует гормонально-активную опухоль к препаратам,которые таргетно воздействуют на рецепторы стероидных гормонов (например,тамоксифен) [Tu S.H., 2011; Farabegoli F., 2007].

Кроме того, в качестве важногомеханизма, оправдывающего потенциальное использование EGCG в качествеусилителя химиотерапии при РМЖ, является восстановление числа ER.Хемосенсибилизация и противоопухолевые синергетические эффекты былипродемонстрированы при совместном приеме EGCG и трихостатина A (TSA) –ингибитора HDAC. TSA в комбинации с EGCG воздействует на ER-негативныеклетки рака молочной железы. EGCG восстановливал ER путем регулированияэпигенетических механизмов, с помощью модификации гистонов.

EGCGсинергическиувеличиваетсяпротивораковыеэффектыпрепаратаичувствительным ER-отрицательной клеток рака молочной железы в TSA [Li Y.,2010]. При раке предстательной железы EGCG может усилить эффектандрогенов на основе процедур, улучшающих исход гормонотерапии.DIM – уникальный, бифункциональный модулятор рецепторов гормонов.DIM тормозит экспрессию эндогенного ПСА и ослабляет повышение уровнявнутриклеточного и секретируемого белка ПСА, вызываемое тестостероном вклетках LNCaP.

Кроме того, DIM дозозависимо тормозит стимулируемую ДГТэкспрессию гена-репортера, регулируемого промотором гена ПСА, привременной трансфекции этой генной конструкции в клетки LNCaP. Аналогичныеэффекты DIM в клетках РС-3 наблюдаются только после трансфекции этихклеток плазмидой экспрессии рецептора андрогенов дикого типа. Также былопоказано, что DIM тормозит вызываемое андрогенами перемещение AR в ядро.Анализ связывания с рецептором дополнительно показал, что DIM являетсясильным конкурентным ингибитором связывания ДГТ с AR. Моделированиеструктуры молекул показало значительное сходство структуры и конформацииDIM, а также поверхностного распределения заряда, с соответствующимихарактеристиками известного синтетического антагониста AR касодекса, хотяатомный состав этих двух молекул совершенно разный [Le H.T., 2003].55Кроме того, как уже было сказано выше, C16-гидроксилирование эстронаприводит к образованию 16α-гидроксиэстрона (16α-OHE1), эндогенногоканцерогена, который является стимулятором пролиферации.

DIM направленноизменяет метаболизм эстрадиола в пользу C2-гидроксилирования [DalessandriK.M., 2004].1.5.8. Противовирусный потенциал в отношении ВПЧDIMблокируетрядэтаповклеточнойпролиферацииВПЧ-инфицированных клеток. Показано, что DIM специфически ингибируетэкспрессию транскриптов вируса E6 и E7 в человеческих кератиноцитов и вклеточной линии человеческой карциномы шейки матки CaSki [Carter T.H.,2002]. Кроме того, DIM предотвращает потерю PTEN in vivo в K14HPV16трансгенной мышиной модели и у человека [Sepkovic D.W., 2013]. ЭкспрессияPTEN уменьшается при повышении дисплазии шейки матки и отсутствует прираке шейки матки.

ДИМ способствует экспрессии PTEN в модели мышей илюдей с дисплазией шейки матки [Sepkovic D.W., 2013; Castañon A., 2012].Доказано, что 16α-OHE1 фактически способствует экспрессии ВПЧ[Auborn K.J., 1991]. Поскольку DIM изменяет метаболизм эстрадиола в сторонупутей С-2 гидроксилирования, он также негативно влияет на прогрессию ВПЧинфекции [Castañon A., 2012].На моделях in vivo было продеменстрировано, что дииндолилметанобладаетиммуностимулирующимисвойствами[КузнецовИ.Н.,2013;Пчелинцева О. И., 2014]. В клинических исследованиях также было показано,что DIM оказывает противорецидивный эффект у детей с рецидивирующимреспираторным папилломатозом [Auborn K., 1998].Более того, в исследовании [Sepkovic D.W., 2009] на трансгенной моделимышей K14HPV16 получены данные, свидетельствующие о том, чтовакцинация, предварительно дополненная введением ДИМ, обеспечиваетзащиту не менее четырех недель.