Диссертация (Особенности изменений микроциркуляции при субкутанной имплантации скаффолдов на основе поликапролактона и гидроксиапатита), страница 3

При этом стойкоеповышение перфузии и снижение миогенного тонуса сосудов кожи такжеассоциировано с системными проявлениями воспалительного ответа, которыехарактеризуются значительным и пролонгированным увеличением концентрациив крови церрулоплазмина и С-реактивного белка. Это патогенетическиобосновывает выявление указанных изменений микроциркуляции кожи надобластьюсубкутаннойимплантациивкачествекритериевотсутствиябиосовместимости скаффолдов.Установлено, что имплантация скаффолдов на основе поликапролактона(ПКЛ) и гидроксиапатита (ГА) сопровождается умеренным транзиторнымповышением перфузии без выраженных изменений активных механизмовмодуляции локальной микроциркуляции кожи. Сочетание этих признаков сактивнойваскуляризацией,атакжеколонизациейматрицнаосновеполикапролактона и гидроксиапатита клетками соединительной ткани безинтенсивных локальных и системных проявлений воспалительного ответа14обосновывают использование данных микроциркуляторных изменений в качествекритериев биосовместимости скаффолдов.НаучнуюновизнуподтверждаетвыдачаФедеральнойслужбойпоинтеллектуальной собственности РФ патента на изобретение «Способ оценкибиосовместимости скаффолдов» № 2571232 от 19.11.2015 г.Теоретическая и практическая значимостьРезультаты исследования расширяют представления о реакциях организмапри имплантации скаффолдов на основе ПКЛ и ГА за счѐт получения новыхданных о патогенетических взаимосвязях биосовместимости матриц и процессовихколонизацииклеточнымиэлементами,васкуляризацииссостояниеммеханизмов регуляции ангиогенеза.При выполнении работы впервые проведена доклиническая апробацияотечественных скаффолдов на основе ПКЛ и ГА в условиях in vivo.

Выявленныемикроциркуляторные критерии биосовместимости в комплексе со способностью кзаселению клеточными элементами и васкуляризации на фоне отсутствиявыраженных проявлений системного воспалительного ответа при субкутаннойимплантации доказывают возможность применения оригинальных отечественныхскаффолдов на основе ПКЛ и ГА для стимуляции процесса регенерации ипозволяют рекомендовать клиническую апробацию данных матриц.Выявленные микроциркуляторные критерии могут быть оценены вдинамике при субкутанных имплантационных тестах с помощью неинвазивнойметодики – лазерной доплеровской флоуметрии (ЛДФ). Данный подходреализован в виде программного обеспечения («Программа для динамическойоценкибиосовместимостискаффолдов»,свидетельствоорегистрации№ 2015612745, приор.

от 26.12.2014 г., зарегистрирована в реестре 25.02.2015 г.).Разработанные программа и способ оценки биосовместимости скаффолдовметодом ЛДФ могут быть применены в экспериментальных исследованиях присоздании новых конструкций для тканевой инженерии.15Методология и методы диссертационного исследованияИсследование биосовместимости оригинальных скаффолдов на основе ПКЛи ГА было проведено на модели субкутанных имплантационных тестов у белыхкрыс. Дизайн исследования заключался в сопоставлении исследуемых параметровуживотныхопытнойгруппысрезультатамигруппсравнения(ложнооперированные животные) и отрицательного контроля (крысы, которымимплантировали скаффолд, содержащий чужеродный белок).

При выполненииработы использованы функциональное исследование микроциркуляции методомлазернойдопплеровскойфлоуметриивкомплексесморфологическойверификацией путем микроскопии и морфометрии гистологических препаратовзоны имплантации или еѐ имитации, а также биохимических исследований,реализованных методами иммуноферментного анализа и иммунотурбидиметрии.Внедрение результатов исследованияПолученные результаты используются в процессе преподавания на кафедрепатологической физиологии имени А.А. Богомольца и кафедре гистологии,цитологии и эмбриологии ФГБОУ ВО Саратовский ГМУ им.

В.И. РазумовскогоМинздрава России, курса патологической физиологии на кафедре медикобиологических дисциплин Филиала частного учреждения образовательнойорганизации высшего образования «Медицинский университет «Реавиз» в городеСаратове, научно-исследовательском процессе в ФГБУ «СарНИИТО» МинздраваРоссии.Положения, выносимые на защиту1.Изменениеперфузиииактивныхмеханизмовмодуляциимикроциркуляции кожи над областью размещения матриц, регистрируемыенеинвазивным методом лазерной допплеровской флоуметрии, взаимосвязаны слокальными и системными проявлениями воспалительной реакции, процессамизаселения клетками соединительной ткани и васкуляризацией скаффолдов.

Это16является основанием для использования микроциркуляторных изменений вкачестве критериев динамической оценки биосовместимости при субкутанныхимплантационных тестах.2.Васкуляризация скаффолдов и состояние механизмов регуляцииангиогенезазависятотстепениихбиосовместимости.Отсутствиебиосовместимости скаффолдов за счет интенсивной воспалительной реакциивызывает длительную активацию ангиогенеза, но не сопровождается ихваскуляризацией. Имплантация скаффолдов на основе ПКЛ и ГА вызывает слабовыраженные воспалительные изменения, которые стимулируют ангиогенез и витоге обеспечивают их полноценную васкуляризацию.3.Комплексмикроциркуляторныхкритериевбиосовместимости,способность к заселению клетками и васкуляризации на фоне отсутствиявыраженных локальных и системных проявлений воспаления обосновываютвозможность применения оригинального скаффолда на основе ПКЛ и ГА втканевой инженерии для стимуляции регенерации поврежденных тканей.Степень достоверностиДостоверностьрезультатовисследованияопределяетсядостаточнымобъемом выборки экспериментальных животных (90 белых нелинейных крыс),применениемсовременныхинформативныхметодик,выполненныхсиспользованием сертифицированного оборудования и реактивов и включающихкомплексфункциональныхибиохимическихметодоввсочетаниисморфологической верификацией процесса заселения клеточными элементамиоригинальныхотечественныхнепараметрическиеметодыскаффолдов.статистическойВработеобработкивиспользованысоответствиисхарактеристиками вариационных рядов изучаемых показателей.Апробация результатов работыОсновные положения работы доложены и обсуждены на научнопрактической конференции молодых учѐных, посвящѐнной 75-летию профессора17В.Г.

Нинеля «Вклад молодых учѐных в развитие травматологии, ортопедии инейрохирургии»г.Саратов,2014г.;XМеждународнойконференции«Микроциркуляция и гемореология. Клиника и эксперимент: из лаборатории кпостели больного» г. Ярославль, 2015 г.; на заседании регионального обществатравматологов-ортопедов г. Саратов, 2015 г.; на Всероссийской научнопрактической конференции, посвященной 70-летию СарНИИТО «Травматологияи ортопедия в России: традиции и инновации», г. Саратов, 2015 г.; наVIII Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых смеждународным участием «Цивьяновские чтения» г. Новосибирск, 2015 г.; наВсероссийской научно-практической конференции «Классика и инновации втравматологии и ортопедии» г.

Саратов, 2016 г.Публикации результатов исследованияПо теме диссертации опубликовано 12 научных работ, из них 5 в журналах,включенных в перечень периодических научных и научно-практических изданий,рекомендованныхВАКМинобрнаукиРФдляпубликациирезультатовдиссертационного исследования на соискание ученой степени кандидатамедицинских наук; получен 1 патент РФ на изобретение, а также свидетельствогосударственной регистрации программы для ЭВМ.Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 127 страницахмашинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, главыматериалов и методов, 3 глав результатов собственных исследований, обсужденияполученных результатов, заключения и выводов.

Работа иллюстрирована14 рисунками и 22 таблицами. Библиографический список содержит 201литературный источник, из них 50 – отечественных и 151 – зарубежных.18Глава 1ПЕРСПЕКТИВЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ СКАФФОЛДОВДЛЯ СТИМУЛЯЦИИ РЕПАРАТИВНОЙ РЕГЕНЕРАЦИИКОСТНОЙ ТКАНИ(обзор литературы)1.1Структурно-функциональные особенности костной тканиСкелет взрослого человека состоит из 206–213 костей, с небольшимивариациями и индивидуальными особенностями.

Условно скелет принято делитьна две части: осевой и аппендикулярный (Clarke B., 2008; Naghieh S. et al., 2016).Кости, которые составляют основу костной системы человека, сгруппированы впять различных форм: длинные кости, короткие кости, плоские кости,нерегулярные кости и сесамовидные кости. Как правило, длинные и короткиекости встречаются в аппендикулярном скелете, в то время как плоские инерегулярные кости находятся в осевом скелете.

Кость состоит из гетерогеннойкомбинации жесткого кортикального (сплошного) и губчатого (трабекулярного)вещества, каждый из компонентов обладает определенной трехмерной структуройи, как следствие, различными механическими свойствами. Эта уникальнаяархитектура обеспечивает костям высокие показатели прочности и вязкостиразрушения (Stevens M.M., 2008).Костная ткань является одной из самых механически прочных структурорганизма,гистологическивключающаянесколькотиповклетокивысокоминерализованного межклеточного вещества.