Диссертация (Особенности изменений микроциркуляции при субкутанной имплантации скаффолдов на основе поликапролактона и гидроксиапатита), страница 10

3 В). Абсолютные (табл. 2) и нормированные (табл. 3) амплитудыэндотелиальных, нейрогенных и миогенных колебаний через 14 суток послеоперативного воздействия находятся в пределах вариабельности группы контроля.В ходе проведенных исследований установлено, что на 21-е суткиэксперимента перфузионный показатель (рис. 3 Г), а также активные механизмырегуляции микроциркуляции у ложнооперированных животных статистическизначимо не отличаются от исходного уровня (табл. 2, 3).53Результатыпроведенногоисследованияпозволяютзаключить,чтотравматизация тканей при оперативном вмешательстве в объеме имплантациискаффолдов вызывает сдвиги показателя перфузии, которые выражены слабо,носят транзиторный характер, достигая своего максимума на 7-е суткиэксперимента и полностью исчезая к 21-м суткам.

Активными механизмами,определяющими выявленные изменения перфузии, являются слабовыраженныеизменения нейрогенного и миогенного тонуса, транзиторное снижение которыхвыявляется только на 7-е сутки эксперимента.3.2. Локальные тканевые реакции области травматизации мягких тканейпри оперативном вмешательстве в объеме, соответствующем подкожнойимплантации скаффолда (Иванов А.Н. и др., 2015)С целью оценки локальных тканевых реакций, возникающих приоперативном воздействии, проводили исследование препаратов мягких тканейобласти имитации имплантации у животных группы сравнения на 7, 14 и 21-есуткиэксперимента,оцениваяструктуру,клеточныйсостав,состояниемикроциркуляторного русла кожи.Данные проведенных исследований свидетельствуют о том, что у животныхгруппы сравнения через 7 суток после хирургического вмешательства отмечаетсяумеренно выраженные полнокровие сосудов микроциркуляторного русла иэкссудация, которая проявляется отеками подкожной жировой клетчатки.

Приэтом в отдельных сосудах обнаруживается десквамация эндотелиальных клеток.Вподкожнойжировойклетчаткевыявленонезначительноенейтрофильных лейкоцитов, а также единичные лимфоциты (рис. 4).количество54Рис. 4. Мягкие ткани области оперативного вмешательства у животного группысравнения на 7-е сутки эксперимента. Г-Э. Об. 40хПри оценке морфологических препаратов на 14-е сутки экспериментавыявленопреимущественноумеренноекровенаполнениесосудовмикроциркуляторного русла в зоне оперативного вмешательства (рис.

5).Рис. 5. Мягкие ткани области оперативного вмешательства у животногогруппы сравнения на 14-е сутки эксперимента. Г-Э. Об. 20х55В подкожной жировой клетчатке определяется незначительное количествонейтрофильных лейкоцитов и единичные лимфоциты.На 21-е сутки эксперимента патологических изменений тканей в областиоперативного вмешательства не выявлено (рис. 6).Рис. 6. Мягкие ткани области оперативного вмешательства у животного группысравнения на 21-е сутки эксперимента.

Г-Э. 20хТаким образом, при имитации имплантации скаффолдов возникаютлокальные транзиторные сосудистые и тканевые реакции, характерные дляпроцесса асептического воспаления. Воспалительные изменения в областихирургического вмешательства, в частности лейкоцитарная инфильтрация, так же,как и сдвиги перфузии кожи над областью имплантации, наиболее выражены на7-е сутки эксперимента и полностью исчезают полностью к 21-м суткам.3.3. Изменение концентрации маркеров острой фазы воспалительнойреакции при оперативном вмешательстве в объеме, соответствующемподкожной имплантации скаффолда (Иванов А.Н. и др., 2016)Для оценки роли воспалительной реакции в развитии микроциркуляторныхизменений при имитации имплантации скаффолдов были проанализированыизмененияконцентрациибелковостройфазывоспаления–56СРБ и ЦП, в сыворотке крови у животных группы сравнения на 7, 14, 21-е суткиэксперимента (табл.

4).Таблица 4Уровень белков острой фазы крови у животных группы сравненияГруппаУровень белков острой фазы кровиЦП, усл.ед.СРБ, мг/л16,5 (15,8; 18,1)37,1 (37,0; 38,2)7-е сутки21,6 (20,4; 22,1)41,0 (39,0; 43,1)(n = 8)р1 = 0,002647p1 = 0,00866114-е сутки18,1 (16,6; 18,9)39,0 (37,5; 41,3)(n = 8)р1 = 0,159406p1 = 0,084860p2 = 0,004844p2 = 0,40520021-е сутки17,3 (16,0; 18,0)36,8 (36,0; 40,1)(n = 8)p1 = 0,608887p1 = 0,471581p2 = 0,002647p2 = 0,040693p3 = 0,276382p3 = 0,096332вмешательстваПосле оперативногоКонтроль (n = 8)Примечания:1 в каждом случае приведены медиана, верхний и нижний квартили (25%; 75)2 p1 – по сравнению с контролем3 p2, p3– по сравнению с 7-ми и 14-ми сутками в данной группе.В результате проведенных исследований обнаружено, что оперативноевмешательство в объеме имплантации скаффолдов вызывает увеличениеконцентрации в сыворотке крови СРБ и ЦП на 7-е сутки эксперимента.

Через14 суток показатели острофазных белков полностью нормализуются.Такимобразом,оперативноевмешательствовызываетумеренныетранзиторные изменения кровотока мягких тканей, наиболее выраженные на7-есуткипоказателя,экспериментакоторыйипроявляющиесяполностьюувеличениемнормализуетсяк21-мперфузионногосуткам.Приморфологическом исследовании у ложнооперированных животных только на577-е сутки эксперимента обнаружены отек и слабая лейкоцитарная инфильтрацияподкожной жировой клетчатки. Локальные сосудистые и тканевые реакциисоответствуют динамике показателей системного воспалительного ответа,проявляющегося на 7-е сутки эксперимента увеличением в сыворотке крови острофазных белков, концентрация которых полностью нормализуется к 14-м суткамэксперимента.58Глава 4ИЗМЕНЕНИЯ ПЕРФУЗИИ КОЖИ И СТРУКТУРЫ МЯГКИХ ТКАНЕЙПРИ СУБКУТАННОЙ ИМПЛАНТАЦИИ СКАФФОЛДА,НЕ ОБЛАДАЮЩЕГО БИОСОВМЕСТИМОСТЬЮДля выявления местных и системных патологических реакций, характерныхдля скаффолдов, не обладающих биосовместимостью, проводили изучениеперфузионного показателя кожи и активных механизмов его модуляции,морфологической картины, а также биохимических сдвигов в крови у животных,которым выполнялась подкожная имплантация скаффолда на основе ПКЛ садсорбированным на нем чужеродным белком.4.1.

Изменения перфузионного показателя и активных механизмовмодуляции микроциркуляции кожи при имплантации скаффолда, необладающего биосовместимостью (Иванов А.Н. и др., 2015; Иванов А.Н. и др.,2016, Козадаев М.Н., 2016)В результате исследований установлено, что после имплантации ПКЛскаффолдов, содержащих чужеродный белок, на 7-е сутки экспериментапроисходитзначительное(на80%контрольнойвеличины)увеличениеперфузионного показателя (рис. 7 А, Б).В ходе амплитудно-частотного анализа ЛДФ-грамм установлено, что уживотных группы отрицательного контроля на 7-е сутки и на протяжении всегоэксперимента не происходит статистически значимого изменения пиковых частотэндотелиальных, нейрогенных и миогенных колебаний (табл.

5).59АБВГРис. 7. Динамика изменения перфузии кожи при имплантации скаффолдов сабсорбированным чужеродным белком на его поверхности. А – интактноеживотное (показатель перфузии – 9,8 перф. ед.); Б – 7-е сутки после имплантации(показатель перфузии – 19,2 перф. ед.); В – 14-е сутки после имплантации (показательперфузии – 20,9 перф. ед.); Г – 21-е сутки после имплантации (показатель перфузии –22,9 перф.

ед.)60Таблица 5Частотные характеристики ЛДФ-грамм у животныхгруппы отрицательного контроляГруппаЧастота колебаний, Гцэндотелиальныхнейрогенныхмиогенных0,02 (0,02; 0,02)0,14 (0,13; 0,16)0,35 (0,28; 0,44)7-е сутки0,02 (0,02; 0,02)0,13 (0,13; 0,16)0,37 (0,28; 0,56)(n = 8)p1 = 0,561276p1 = 0,760302p1 = 0,67739214-е сутки0,02 (0,02; 0,02)0,14 (0,12; 0,16)0,31 (0,27; 0,46)(n = 8)p1 = 0,561276p1 = 0,561276p1 = 0,539730p2 = 0,656854p2 = 0,593955p2 = 0,39861621-е сутки0,02 (0,02; 0,02)0,15 (0,13; 0,18)0,35 (0,25; 0,47)(n = 8)p1 = 0,561276p1 = 0,760302p1 = 0,677392p2 = 0,705457p2 = 0,570751p2 = 0,520523p3 = 1,000000p3 = 0,423902p3 = 1,000000вмешательстваПосле оперативногоКонтроль (n = 10)Примечания:1 в каждом случае приведены медиана, верхний и нижний квартили (25%; 75)2 p1 – по сравнению с контролем3 p2, p3– по сравнению с 7-ми и 14-ми сутками в данной группе.Значения абсолютных и нормированных амплитуд нейрогенных и вбольшейстепенимиогенныхколебанийкровотокакожинадобластьюимплантации скаффолда, содержащего чужеродный белок, через 7 дней послеоперативного вмешательства статистически значимо увеличены по сравнению сконтролем (табл.

6, 7). Вместе с тем у животных данной группы отмечаетсятенденция к уменьшению нормированной амплитуды эндотелиальных колебаний,которая, однако, не достигает статистической значимости.61Таблица 6Абсолютные амплитуды колебаний микроциркуляции в эндотелиальном,нейрогенном и миогенном частотных диапазонах у животных группыотрицательного контроляГруппаАбсолютная амплитуда колебаний, перф.

ед.эндотелиальныхнейрогенныхмиогенных0,59 (0,34; 0,76)0,18 (0,13; 0,19)0,18 (0,14; 0,22)7-е сутки0,65(0,39; 0,70)0,29 (0,22; 0,43)0,40(0,32; 0,51)(n = 8)p1 = 0,470842p1 = 0,000965p1 = 0,00004614-е сутки0,63 (0,18; 0,96)0,25 (0,19; 0,32)0,29 (0,23; 0,43)(n = 8)p1 = 0,796254p1 = 0,028187p1 = 0,006707p2 = 0,824212p2 = 0,248058p2 = 0,10974621-е сутки0,48 (0,42; 0,71)0,27 (0,24; 0,29)0,28 (0,26; 0,32)(n = 8)p1 = 0,739270p1 = 0,000428p1 = 0,000181p2 = 0,449692p2 = 0,405680p2 = 0,017258p3 = 0,824212p3 = 0,656854p3 = 0,789810вмешательстваПосле оперативногоКонтроль (n = 10)Примечания:1 в каждом случае приведены медиана, верхний и нижний квартили (25%; 75)2 p1 – по сравнению с контролем3 p2, p3– по сравнению с 7-ми и 14-ми сутками в данной группе.Увеличениеамплитудмиогенныхколебанийотражаетснижениемышечного тонуса прекапилляров, что обусловливает увеличение притока кровив нутритивное русло.

В то же время известно, что увеличение амплитудосцилляцийвнейрогенномдиапазонеявляетсяиндикаторомснижениясопротивления артериол. Повышение перфузии в сочетании со снижением тонусаартериол и прекапилляров отражают гиперемический тип микроциркуляции вобластиимплантациискаффолда,(Крупаткин А.И. и соавт., 2005).необладающегобиосовместимостью62Таблица 7Изменения нормированных амплитуд колебаний микроциркуляции кожиу животных группы отрицательного контроляГруппаэндотелиальныхнейрогенныхмиогенных18,16 (14,65; 22,45)5,94 (5,15; 6,69)6,25 (5,89; 6,88)7-е сутки15,49 (13,37; 19,16)7,86 (7,28; 8,77)9,56(8,98; 14,28)(n = 8)p1 = 0,085512p1 = 0,003283p1 = 0,00058414-е сутки18,31 (9,83; 21,44)7,41 (5,35; 10,89)9,34(7,57; 12,89)(n = 8)p1 = 0,366157p1 = 0,137639p1 = 0,000789p2 = 0,423902p2 = 1,000000p2 = 0,65685421-е сутки17,70 (16,91; 18,70)9,52 (7,67; 10,20)9,93 (9,20; 10,73)(n = 8)p1 = 0,437407p1 = 0,000162p1 = 0,000040p2 = 0,226477p2 = 0,173618p2 = 0,879829p3 = 0,722283p3 = 0,593955p3 = 0,656854вмешательстваКонтроль (n = 30)После оперативногоНормированная амплитуда колебаний, отн.