Диссертация (1154858), страница 13
Текст из файла (страница 13)
Выраженностьэтих изменений не превышает таковую у животных группы сравнения.Следовательно, указанные изменения миогенного и нейрогенного тонусау животных опытной группы могут являться следствием травматизации тканейпри оперативном вмешательстве.80Таблица 15Нормированные амплитуды колебаний микроциркуляции кожина 7-е сутки эксперимента у животных при подкожной имплантациискаффолда на основе ПКЛ и ГАГруппаНормированная амплитуда колебаний, отн. ед.эндотелиальныхнейрогенныхмиогенных18,74 (15,5; 10,08)6,02 (5,49; 7,68)6,21 (5,02; 7,82)15,5 (13,37; 19,16)7,86 (7,28; 8,77)9,56 (8,98; 14,28)p1 = 0,173618p1 = 0,112412p1 = 0,00650217,58 (15,67;18,56)7,51 (6,08; 8,24)7,84 (6,48; 8,54)скаффолда ПКЛ и ГАp1 = 0,650148p1 = 0,364347p1 = 0,130571(n = 10)p2 = 0,289919p2 = 0,496292p2 = 0,010166Группа сравнения(n = 10)Отрицательныйконтроль (n = 10)ИмплантацияПримечания:1 в каждом случае приведены медиана, верхний и нижний квартили (25%; 75)2 p1 – по сравнению с группой сравнения3 p2 – в сравнении с отрицательным контролем.На 14-е сутки после имплантации скаффолда на основе ПКЛ и ГА невыявлено статистически значимых различий перфузионного показателя как посравнению контрольным уровнем, так и с группой сравнения.
При этомперфузионный показатель значимо ниже, чем у животных группы отрицательногоконтроля (табл. 10). Также в этот срок наблюдения не выявлено статистическизначимых различий абсолютных и нормированных амплитуд эндотелиальных,миогенных и нейрогенных колебаний как по сравнению контрольным уровнем(табл.
12, 13), так и относительно группы сравнения (табл. 16, 17). При этомабсолютные амплитуды нейрогенных и миогенных колебаний, а такженормированные амплитуды миогенных колебаний значимо ниже, чем у животныхгруппы отрицательного контроля (табл. 16, 17).81Таблица 16Абсолютные амплитуды колебаний микроциркуляции кожи у животныхпри имплантации скаффолда на основе ПКЛ и ГА на 14 сутки экспериментаГруппаГруппа сравненияАбсолютная амплитуда колебаний, перф. ед.эндотелиальныхнейрогенныхмиогенных0,53 (0,47; 0.59)0,18 (0,14; 0,23)0,22 (0,20; 0,27)0,63 (0,18; 0,96)0,25 (0,19; 0,32)0,29 (0,23; 0,43)p1 = 0,929199p1 = 0,109746p1 = 0,0119960,42 (0.21; 0,57)0,18 (0,14; 0,20)0,18 (0,15; 0,20)p1 = 0,220672p1 = 0,369108p1 = 0,030487p2 = 0,413408p2 = 0,034265p2 = 0,018398(n = 10)Отрицательныйконтроль (n = 10)Имплантация скаффолдаПКЛ и ГА (n = 10)Примечания:1 в каждом случае приведены медиана, верхний и нижний квартили (25%; 75)2 p1 – по сравнению с группой сравнения3 p2 – по сравнению с отрицательным контролем.В ходе проведенных исследований установлено, что на 21-е суткиэксперимента показатель перфузии у животных с имплантацией скаффолда наоснове ПКЛ и ГА статистически значимо не отличается от исходного уровня игруппы сравнения (табл.
10). В ходе исследований также выявлено, что на 21-есутки эксперимента все показатели активной модуляции микроциркуляции уживотных с имплантацией скаффолда на основе ПКЛ и ГА статистическизначимо не отличаются от исходного уровня (табл. 11, 12, 13) и группы сравнения(табл. 18, 19). При имплантации скаффолдов на основе ПКЛ и ГА на 21-е суткиэкспериментамиогенныхабсолютныеколебанийинормированныестатистическиамплитудызначимониженейрогенныхуровняизначенийсоответствующих показателей в группе отрицательного контроля (табл. 18, 19).82Таблица 17Нормированные амплитуды колебаний микроциркуляции кожи у животныхпри имплантации скаффолда на основе ПКЛ и ГА на 14-е сутки экспериментаГруппаНормированная амплитуда колебаний, отн.
ед.эндотелиальныхГруппа сравнения(n = 10)нейрогенныхмиогенных5,48 (4,96; 6,08)7,10 (6,43; 7,84)18,31 (9.83; 21,44)7,41 (5,35; 10,89)9,3 (7,57; 12,89)p1 = 1,000000p1 = 0,091375p1 = 0,0329704,74 (3,92; 9,70)7,15 (4,75; 7,55)p1 = 0,513630p1 = 0,934925p1 = 0,683092p2 = 0,500582p2 = 0,083265p2 = 0,02688616,84 (11,80;20,32)Отрицательныйконтроль (n = 10)Имплантация скаффолда 15,24 (6,30; 21,76)ПКЛ и ГА (n = 10)Примечания:1 в каждом случае приведены медиана, верхний и нижний квартили (25%; 75)2 p1 – по сравнению с группой сравнения3 p2 – в сравнении с отрицательным контролем.Таблица 18Абсолютные амплитуды колебаний микроциркуляции кожи у животных приимплантации скаффолда на основе ПКЛ и ГА на 21-е сутки экспериментаГруппаГруппа сравнения(n = 10)Отрицательныйконтроль (n = 10)Имплантация скаффолдаПКЛ и ГА (n = 10)Абсолютная амплитуда колебаний, перф.
ед.эндотелиальныхнейрогенныхмиогенных0,48 (0,20; 0,69)0,17 (0,14; 0,20)0,18 (0,16; 0,19)0,48 (0,42; 0,71)0,27(0,24; 0.29)0,28 (0,26; 0,32)p1 = 0,593955p1 = 0,002174p1 = 0,0005300,56 (0,47; 0,64)0,16 (0,13; 0,16)0,15 (0,14; 0,17)p1 = 0,477197p1 = 0,505161p1 = 0,075561p2 = 0,427356p2 = 0,000330p2 = 0,000881Примечания:1 в каждом случае приведены медиана, верхний и нижний квартили (25%; 75)2 p1 – по сравнению с группой сравнения3 p2 – в сравнении с отрицательным контролем.83Таблица 19Нормированные амплитуды колебаний микроциркуляции кожи у животныхпри имплантации скаффолда на основе ПКЛ и ГА на 21-е сутки экспериментаГруппаНормированная амплитуда колебаний, отн. ед.эндотелиальныхнейрогенныхмиогенных18,23 (11,93; 21,67)5,56 (5,09;6,87)6,79 (5,39; 8,57)17,70 (16,91; 18,70)9,52 (7,67; 10,20)9,93 (9,20; 10,73)p1 = 0,722283p1 = 0,003367p1 = 0,00336720,80 (20,62; 21,91)5,84 (4,73; 6,63)6,02 (5,46; 6,35)скаффолдаp1 = 0,130919p1 = 0,593955p1 = 0,328384ПКЛ и ГА (n =p2 = 0,000285p2 = 0,001152p2 = 0,000157Группа сравнения(n = 10)Отрицательныйконтроль (n = 10)Имплантация10)Примечания:1 в каждом случае приведены медиана, верхний и нижний квартили (25%; 75)2 p1 – по сравнению с группой сравнения3 p2 – в сравнении с отрицательным контролем.Такимобразом,установлено,чтоприсубкутаннойимплантациикомбинированных скаффолдов на основе ПКЛ и ГА отмечаются транзиторноеповышение перфузии и незначительные изменения нейрогенного и миогенноготонуса на 7-е сутки эксперимента.
При этом выраженность данных изменений непревышает таковую у ложнооперированных животных. Характерных для группыотрицательного контроля признаков нарушения биосовместимости, включаястойкоеповышениеамплитудымиогенныхколебаний,увеличениеперфузионного показателя при имплантации скаффолдов на основе ПКЛ и ГА, невыявлено. В связи с этим транзиторные изменения перфузии, не сопровождаемыевыраженными сдвигами миогенного тонуса, следует расценивать в качествекритериев биосовместимости скаффолдов.845.2. Локальные изменения морфологии тканей при подкожнойимплантации скаффолда на основе поликапролактона и гидроксиапатита(Иванов А.Н.
и др., 2015; Козадаев М.Н. и др., 2015; Козадаев М.Н. и др., 2017)Морфологическая картина тканевых реакций, возникающих через 7 сутокпосле имплантации скаффолда на основе ПКЛ и ГА, характеризуетсяполнокровием сосудов, умеренным отеком тканей (рис. 12 А), а такжеинфильтрацией перифокальной зоны единичными нейтрофилами и лимфоцитами(рис.
12 Б). В отдельных сосудах отмечаются утолщение стенок, очагидесквамацииэндотелиоцитов.Выявляютсяединичныемелкоочаговыекровоизлияния. В отличие от группы отрицательного контроля у животныхданнойгруппыобнаруженоактивноезаселениескаффолдаклеткамифибробластического ряда (рис. 12 В). Количество фибробластов и фиброцитов вполе зрения у животных данной группы статистически значимо выше посравнению с отрицательным контролем в тот же срок наблюдения. При этомотмечается неравномерность заселения скаффолда элементами соединительнойткани – скопление фибробластов и фиброцитов наиболее ярко выражено награнице матрицы с тканями (рис. 12 Б). На фоне заселения скаффолда элементамисоединительной ткани его инфильтрация лейкоцитами в отличие от группыотрицательного контроля выражена незначительно.
Количество нейтрофилов илимфоцитов в поле зрения у животных данной группы статистически значимониже по сравнению с отрицательным контролем в тот же срок наблюдения(табл. 20).Таким образом, данные морфологического исследования препаратов мягкихтканей зоны имплантации скаффолда на основе ПКЛ и ГА на 7-е суткиэкспериментасвидетельствуютобумереннойвоспалительной реакции у данной группы животных.степенивыраженности85АБВРис. 12. Мягкие ткани животного в области имплантации скаффолда на основеПКЛ в сочетании с ГА на 7-е сутки эксперимента Г-Э: А – морфология зоныимплантации Об. 20 х; Б – граница скаффолда и тканей Об.
40х; В – скаффолд Г-Э. Об. 63х86Таблица 20Динамика клеточных популяций скаффолдов на основе ПКЛ и ГА(число клеток на одно поле при увеличении 400)КлеткиФибробластыВремя после имплантации7-е сутки14-е сутки21-е сутки48 (39; 54)64 (53; 66)61 (50; 72)pok = 0,000183pok = 0,000183pok = 0,000183p1 = 0,007285p1 = 0,002827p2 = 0,325752Фиброциты11 (9; 14)32 (27; 42)41 (38; 48)pok = 0,000183pok = 0,000183pok = 0,000183p1 = 0,000183p1 = 0,000183p2 = 0,025749Нейтрофилы6 (4; 8)6 (4; 7)5 (3; 7)pok = 0,000183pok = 0,000183pok = 0,000183p1 = 0,909722p1 = 0,472676p2 = 0,545350Моноциты имакрофаги7 (5; 12)11 (7; 13)10 (6; 12)pok = 0,075663pok = 0,000183pok = 0,000183p1 = 0,173618p1 = 0,472676p2 = 0,570751Лимфоциты12 (7; 13)11 (7; 15)6 (3; 8)pok = 0,000183pok = 0,000507pok = 0,037636p1 = 0,909722p1 = 0,011330p2 = 0,017258Примечания:1 в каждом случае приведены медиана, верхний и нижний квартили (25%; 75)2 p1 – по сравнению с 7-ми суткам;3 p2 – по сравнению с 14 сутками4 pok – по сравнению с отрицательным контролем в тот же срокэксперимента.87На 14-е сутки после имплантации скаффолда на основе ПКЛ и ГА уживотных определяются незначительно выраженные реактивные измененияподкожной жировой клетчатки.
Морфологические признаки изменения кровотокав мягких тканях зоны имплантации в отличие от группы отрицательного контроляна 14-е сутки эксперимента характеризуются преимущественно умереннымкровенаполнением (рис. 13 А).На 14-е сутки эксперимента продолжается активное заселение скаффолда наоснове ПКЛ и ГА клетками фибробластического ряда различной степенидифференцировки, но, в отличие от 7-х суток, распределение клеток по структуреимплантатастановитсяболееравномерным.Количествоклетокфибробластического ряда в поле зрения статистически значимо увеличивается посравнению с 7-ми сутками эксперимента и значительно превышает числофибробластов и фиброцитов в скаффолдах, не обладающих биосовместимостью,группы отрицательного контроля на 14-е сутки опыта (табл.