Автореферат (Нарушение гипоталамической регуляции репродуктивных циклов при воздействии неблагоприятных экологических факторов), страница 6

Содержание же дофамина в СВ-Арк гипоталамуса, напротив, имеловыраженную суточную динамику, с повышением уровня биогенного амина в вечерние часы(рисунок 7). С помощью Н-теста Крускала-Уоллиса была подтверждена зависимостьсодержания дофамина в данной гипоталамической области от временного показателя (p<0,01).Так, при объединении данных по стадиям цикла (диэструс и проэструс) содержаниенейромедиатора в исследуемой области гипоталамуса составило: 6,90,7 нг/мг белка (5 ч ЦВ),8,11,3 нг/мг белка (9:30 ч ЦВ) и 12,01,0 нг/мг белка (11 ч ЦВ) (рисунок 8).

Можно полагать,1614*121210*1086**42нг/мг белканг/мг белка148***642059:30циркадианное время, чПроэструс11Диэструс* – различия с показателем в 5 ч циркадианноговремени в той же группе достоверны (p<0,05;U-тест); ** – различие с показателем в 11 чциркадианного времени в той же группе достоверно(p<0,05; U-тест)Рисунок 7 – Суточная динамикасодержания дофамина в срединномвозвышении с аркуатными ядрамигипоталамуса самок крыс на различныхстадиях эстрального цикла(M±m, n=6-8)059:3011циркадианное время, ч*, ** – различия с показателем в 11 ч циркадианноговремени достоверны (*p<0,01; **p<0,001; U-тест)Рисунок 8 – Суточная динамикасодержания дофамина в срединномвозвышении с аркуатными ядрамигипоталамуса самок крыс (объединенныеданные по стадиям диэструса и проэструса;M±m, n=12-14)что именно суточная динамика содержания норадреналина в МПО и дофамина в СВ-Аркгипоталамуса играет важную роль в формировании преовуляторного пика секрециигонадолиберина.

Суточное изменение активности норадренергической и дофаминергическойнейромедиаторных систем может быть тем самым механизмом, благодаря которому создается«интервал чувствительности» гонадолиберинергических нейронов к стимулирующемуциркадианному сигналу, поступающему из СХЯ гипоталамуса.Полученные нами данные о суточной динамике содержания дофамина в МПОгипоталамуса не выявили достоверных различий в уровне нейромедиатора, однако21варьирующиеся тенденции его суточных изменений на стадиях диэструса и проэструсаснижение его среднесуточного содержания на стадии проэструса, а также противоречивыеданные литературы о роли этого катехоламина в процессе синтеза гонадолиберина позволиливыдвинуть предположение о том, что дофамин в МПО гипоталамуса, возможно, играет рольне столько активного нейромедиатора, сколько предшественника норадреналинав норадрененергических нейронах.

В результате исследований, проведенных в нашейлаборатории, было установлено, что суточная динамика содержания норадреналина в МПОгипоталамуса не связана с соответствующим изменением моноаминоксидазной активности,поэтому можно предположить, что она опосредована либо активностью катехол-Ометилтрансферазы, либо снижением активности дофамин--гидроксилазы.Для оценки участия дофамин--гидроксилазы в наблюдаемых изменениях суточнойдинамики содержания катехоламинов был использован коэффициент соотношения уровнейнорадреналин/дофамин.

В МПО гипоталамуса было выявлено достоверное (p<0,05) снижениеданного показателя на стадии проэструса в период с 5 ч до 11 ч ЦВ, что вероятно, характеризуетуменьшение активности дофамин--гидроксилазы, которое в свою очередь может обеспечиватьрезкое снижение уровня норадреналина в вечерние часы, при этом изменения коэффициентанорадреналин/дофамин, наблюдаемого на стадии проэструса, на стадии диэструса выявленоне было. Это наблюдение позволяет предположить, что изменение содержания норадреналинав МПО гипоталамуса контролируется как сигналами, поступающими из СХЯ гипоталамуса,так и уровнем половых гормонов в крови.

Вполне вероятно, что МПО гипоталамуса выполняетрелейную функцию, передавая гонадолиберинергическим нейронам от СХЯ гипоталамусациркадианный сигнал, который может либо ингибироваться, либо активироваться в зависимостиот уровня половых гормонов в крови.В другой структуре гипоталамуса – СВ-Арк – характер суточных изменений коэффициентанорадреналин/дофамин сходен на стадиях диэструса и проэструса, но наиболее выраженна стадии проэструса и также снижается в интервале времени с 5 ч до 11 ч ЦВ (p<0,05),что подтверждает активное участие дофамина в регуляторных процессах на уровне СВ-Аркгипоталамуса, которое реализуется за счет вечернего повышения содержания нейромедиаторав этой структуре. Относительное постоянство уровня норадреналина в этой областигипоталамуса в течение дня, при снижении коэффициента норадреналин/дофамин, вероятнеевсего, связано с изменением активности ферментов метаболизма норадреналина.В дополнение к исследованию суточной динамики содержания биогенных аминовв структурах гипоталамуса, ответственных за синтез и секрецию гонадолиберина, и влиянияна нее уровня половых стероидов в крови, нами также было изучено их воздействиена среднесуточное содержание исследуемых нейромедиаторов в гипоталамусе.

U-тест МаннаУитни не выявил влияния стадии эстрального цикла на среднесуточное содержаниенорадреналина в МПО гипоталамуса. Однако в СВ-Арк гипоталамуса на стадии проэструсасреднесуточный уровень нейромедиатора оказался достоверно (р<0,01) выше таковогона стадии диэструса (таблица 1). Это указывает на зависимость норадренергической системыот изменяющегося фона половых гормонов в крови и возможной вовлеченности ее в механизмыреализации овариального сигнала на уровне секреции гонадолиберина.22Таблица 1 – Среднесуточное содержание норадреналина, дофаминаи 5-оксииндолилуксусной кислоты в супрахиазматических ядрах,медиальной преоптической области, срединном возвышении с аркуатными ядрамии сером бугре гипоталамуса самок крыс на различных стадиях эстрального цикла(M±m, нг/мг белка; n=18-22)НАСтруктурыДА5-ОИУКдиэструспроэструсдиэструспроэструсдиэструспроэструсСХЯ5,4±0,64,7±0,51,1±0,51,2±0,46,1±0,47,7±0,5*МПО9,3±0,98,7±0,65,3±0,83,3±0,5*9,3±0,99,1±1,1СВ-Арк6,0±0,58,2±0,6**8,7±1,09,2±1,07,7±0,87,6±0,6СБ3,8±0,33,4±0,21,4±0,22,0±0,412,0±0,712,7±0,7Примечание: *, ** – различия с показателем на стадии диэструса в той же гипоталамической структуредостоверны (*p<0,05; **p<0,01; U-тест).Подобным же образом была подтверждена независимость от половой цикличностиизменения среднесуточного содержания дофамина в СВ-Арк гипоталамуса.

Однако в МПОгипоталамуса содержание дофамина подчинялось зависимости иного рода и определялосьстадией эстрального цикла. Среднесуточное содержание этого моноамина на стадии проэструсабыло достоверно (р<0,05) ниже его среднесуточного уровня на стадии диэструса (таблица 1).Было также обнаружено, что в МПО и СВ-Арк гипоталамуса среднесуточное содержаниеметаболита серотонина 5-оксииндолилуксусной кислоты не зависит от фона половых стероидовв крови, тогда как в СХЯ гипоталамуса отмечается иная динамика изменений, с достоверным(р<0,05) повышением среднесуточного содержания этого метаболита на стадии,предшествующей овуляции (таблица 1).

На основании данных об изменении среднесуточногосодержания этого метаболита серотонина в гипоталамических структурах в зависимостиот стадии эстрального цикла, можно с известной степенью достоверности судить о повышенииактивности серотонинергической системы в СХЯ гипоталамуса при изменении уровня половыхгормонов в крови.Кроме того, для сравнения полученных данных также было проанализировано влияниеменяющегося фона половых стероидов на среднесуточное содержание вышеупомянутыхнейромедиаторов в структуре гипоталамуса, не связанной с регуляцией репродуктивнойфункции, а именно в сером бугре (СБ).Таким образом, полученные нами данные свидетельствуют об избирательном характереизменений среднесуточного содержания исследуемых биогенных аминов в различныхструктурах мозга, участвующих в регуляции овариальных циклов, в зависимости от стадииэстрального цикла.233230282624222018161425**20нг/мг белканг/мг белкаЦиркадианный характер динамики содержания биогенных аминовв медиальной преоптической области и срединном возвышении с аркуатными ядрамигипоталамусаПри исследовании изменения в течение суток содержания биогенных аминовв структурах гипоталамуса, ответственных за синтез и секрецию гонадолиберина, былиполучены данные о том, что наблюдаемая у самок крыс на стадии диэструса суточная динамикасодержания норадреналина в МПО гипоталамуса сохраняется в условиях световой депривации(рисунок 9).

Отмечено, что содержание этого нейромедиатора достоверно (p<0,05) снижаетсяв период с 5 ч до 11 ч ЦВ, сохраняясь на низком уровне до 18 ч ЦВ и, возможно, даже до болеепозднего времени, а уже к 23 ч ЦВ наблюдается резкий подъем содержания нейромедиаторадо уровня, приблизительно равного тому, который регистрировался в утренней временнойточке. Подобный характер изменений свидетельствует о том, что суточный ритм содержаниянорадреналина в МПО гипоталамуса носит циркадианный характер. Н-тест Крускала-Уоллисаподтвердил зависимость содержания норадреналина в данной гипоталамической областиот временного показателя (p<0,05). Между тем, суточный ритм содержания дофамина в СВ-Аркгипоталамуса в условиях световой депривации нами обнаружен не был (рисунок 10),что позволяет предположить отличие механизмов гипоталамической регуляции при участииэтих нейромедиаторов в зависимости от уровня освещенности.1510505111823циркадианное время, ч* – различие с показателем в 11 ч и 18 чциркадианного времени достоверно(p<0,05; U-тест)Рисунок 9 – Суточная динамикасодержания норадреналинав медиальной преоптической областигипоталамуса самок крыс на стадиидиэструса в условиях световой депривации(M±m, n=9-10)5111823циркадианное время, чРисунок 10 – Суточная динамикасодержания дофамина в срединномвозвышении с аркуатными ядрамигипоталамуса самок крыс на стадиидиэструса в условиях световой депривации(M±m, n=9-11)Таким образом, на основании результатов собственных исследований, а также данныхлитературы можно заключить, что суточные изменения содержания НА в МПО гипоталамусаобладают циркадианной природой и регулируются СХЯ гипоталамуса.24Влияние ксенобиотика 1,2-диметилгидразина на среднесуточное содержаниегонадолиберина в медиальной преоптической области и срединном возвышениис аркуатными ядрами гипоталамусаИсследование влияния острого воздействия 1,2-диметилгидразина, известного своимиканцерогенными свойствами [Анисимов В.Н., Забежинский М.А., Попович И.Г., 2000],на среднесуточное содержание гонадолиберина в исследуемых гипоталамических областяхпоказало, что однократное введение ксенобиотика накануне дня проэструса оказывалозначительный ингибирующий эффект на среднесуточное содержание нейрогормона в СВ-Аркгипоталамуса (p<0,01).

Так, среднесуточный уровень гонадолиберина в контрольной и опытнойгруппе составил: 47,164,48 нг/мг белка и 27,862,48 нг/мг белка, соответственно (рисунок 11).6050нг/мг белка40*3020100физ. р-рфиз. р-р +ДМГ* – различие достоверно (p<0,01; U-тест)Рисунок 11 – Влияние однократного введения1,2-диметилгидразина на среднесуточное содержаниегонадолиберина в срединном возвышении с аркуатными ядрамигипоталамуса самок крыс на стадии проэструса на фоне введенияфизиологического раствора (M±m, n=15)Вместе с тем однократное введение 1,2-диметилгидразина оказывало сходное влияниеи на среднесуточный уровень гонадолиберина в МПО гипоталамуса, однако различиемежду опытной (0,410,04 нг/мг белка) и контрольной (0,540,05 нг/мг белка) группамиотмечалось лишь на уровне тенденции.Полученные данные свидетельствуют о токсическом действии 1,2-диметилгидразина,которое выражается в снижении под влиянием ксенобиотика среднесуточного содержаниягонадолиберина в обеих гипоталамических структурах, ответственных за синтез и секрециюнейрогормона, при этом наиболее выраженный эффект нейротоксиканта наблюдался именнов структуре, отвечающей за секрецию гонадолиберина.