Автореферат (1144748), страница 8
Текст из файла (страница 8)
При этомотмечалось достоверное (p<0,01) повышение содержания общего L-гомоцистеина в периодформирования и терминации преовуляторного пика секреции гонадолиберина (9:30 ч и 11 ч ЦВ,соответственно).В результате проведенных исследований было обнаружено влияние алиментарнойгипергомоцистеинемии на суточную динамику и среднесуточное содержание биогенных аминовв структурах гипоталамуса, ответственных за синтез и секрецию гонадолиберина.Так, при исследовании содержания норадреналина в МПО гипоталамуса в контроле былаобнаружена сходная с описанной выше динамика изменений уровня этого нейромедиаторас характерным достоверным (p<0,05) повышением его содержания в дневное время (9:30 ч ЦВ)и снижением в вечерние часы (11 ч ЦВ).
Обнаруженная динамика исчезала на фонеодномесячного курса перорального введения L-метионина. В этих условиях уровеньнорадреналина сохранялся практически одинаковым во всех трех временных точках (рисунок14).3520#*1625нг/мг белканг/мг белка30*201510128450059:3011циркадианное время, чконтрольL-метионин* – различие с показателем в 11 ч циркадианноговремени в той же группе (контроль) достоверно(p<0,05; U-тест)Рисунок 14 – Влияние хроническоговоздействия L-метионина на суточнуюдинамику содержания норадреналинав медиальной преоптической областигипоталамуса самок крыс на стадиипроэструса (M±m, n=9-12)59:3011циркадианное время, чконтрольL-метионин* – различие с показателем в 9:30 ч циркадианноговремени в той же группе (контроль) достоверно(p<0,05; U-тест); – различие с показателем в то жевремя в контрольной группе достоверно(p<0,05; U-тест)Рисунок 15 – Влияние хроническоговоздействия L-метионина на суточнуюдинамику содержания дофаминав срединном возвышении с аркуатнымиядрами гипоталамуса самок крыс на стадиипроэструса (M±m, нг/мг белка; n=9-13)При исследовании суточной динамики содержания дофамина в СВ-Арк гипоталамусабыло установлено, что в контроле наблюдается суточное изменение уровня нейромедиаторас характерным повышением в вечерней временной точке (p<0,05).
При введении L-метионина30наблюдалось исчезновение нормальной суточной динамики содержания нейромедиатора,при этом имели место достоверное (p<0,05) по сравнению с контролем повышение уровня этогомоноамина в 9:30 ч ЦВ и тенденция к снижению этого показателя к 11 ч ЦВ (рисунок 15).Исследование уровня дофамина в МПО и норадреналина в СВ-Арк гипоталамусане выявило суточной динамики содержания этих нейромедиаторов ни в группе контроля,ни в группе животных, подвергшихся метиониновой нагрузке.Определение же среднесуточного содержания норадреналина в МПО гипоталамусапри объединении данных, полученных во всех трех временных точках (5 ч, 9:30 ч и 11 ч ЦВ),показало, что после принудительного перорального введения L-метионина в течение месяцапроисходит достоверное (p<0,05) повышение содержания нейромедиатора по сравнениюс контролем. В группе животных, получавших L-метионин, оно составило 27,2±1,0 нг/мг белка,а в контрольной группе – 23,7±0,9 нг/мг белка.В результате изучения среднесуточных уровней дофамина и 5-оксииндолилуксуснойкислоты в МПО гипоталамуса статистически значимые различия при сравнении контрольныхи опытных животных выявлены не были.
Так, среднесуточное содержание дофамина в этойгипоталамической структуре в группе животных, потреблявших L-метионин, достоверноне отличалось от содержания нейромедиатора в группе контроля и составило: 27,0±0,9 нг/мгбелка и 24,9±1,1 нг/мг белка, соответственно. Имела место лишь тенденция к повышениюсодержания среднесуточного уровня этого биогенного амина при введении L-метионина.Также при объединении данных, полученных во всех трех временных точках, намине было выявлено статистически значимых различий в среднесуточном содержаниинорадреналина, дофамина и 5-оксииндолилуксусной кислоты в СВ-Арк гипоталамусамежду контрольной и опытной группами животных.
Так, например, среднесуточное содержаниенорадреналина в этой гипоталамической структуре в группе животных, потреблявшихL-метионин, достоверно не отличалось от уровня нейромедиатора в группе контроля(27,0±0,9 нг/мг белка и 24,9±1,1 нг/мг белка, соответственно). Имела место лишь тенденцияк повышению содержания данного биогенного амина при введении L-метионина.Отмеченное в данном исследовании изменение суточной динамики и среднесуточногосодержания катехоламинов при метиониновой нагрузке в структурах гипоталамуса,ответственных за синтез и секрецию гонадолиберина, подтверждает адекватностьиспользования для создания гипергомоцистеинемии модели принудительного кормленияживотных L-метионином.
Можно предположить, что исчезновение суточных ритмовсодержания норадреналина и дофамина в данной модели гипергомоцистеинемии связанос изменениями в работе СХЯ гипоталамуса и является характерным начальным признакомнарушений нормального функционирования репродуктивной функции.Приведенные результаты указывают на то, что повышенное содержание общегоL-гомоцистеина вызывает нарушение катехоламинергической регуляции эстральных циклову самок крыс, оказывая влияние на норадренергическую систему в МПО гипоталамусаи дофаминергическую систему в СВ-Арк гипоталамуса, что свидетельствует о негативномдействии гипергомоцистеинемии на процессы синтеза и секреции гонадолиберина, находящиесяпод контролем этих нейромедиаторных систем. Полученные данные дают основаниерассматривать повышенное содержание общего L-гомоцистеина в качестве фактора, однимиз проявлений нейротоксичности которого является нарушение гипоталамической регуляции31овариальных циклов, что ставит его в один ряд с другими ранее изученными намиксенобиотиками.Влияние ксенобиотиков 1,2-диметилгидразина, толуола и метиониновой нагрузкина образование активных форм кислорода в медиальной преоптической областии срединном возвышении с аркуатными ядрами гипоталамуса и продуктов перекисногоокисления липидов в сыворотке кровиПомимо суточных изменений содержания биогенных аминов в структурах гипоталамуса,ответственных за синтез и секрецию гонадолиберина, в МПО гипоталамуса также былиобнаружены суточные изменения генерации АФК.
Образование АФК в этой структурев дневное время существенно (p<0,05) превосходило значения данного показателя в утренниеи ранние ночные часы (рисунок 16). С помощью Н-теста Крускала-Уоллиса была подтвержденазависимость уровня люминолзависимой хемилюминесценции в этой гипоталамической областиот временного показателя (p<0,05).
Необходимо отметить, что суточная динамика генерацииАФК в МПО гипоталамуса имела характер, противоположный соответствующим изменениямсодержания биогенных аминов в той же структуре (таблица 3).отн. ед./мг белка18000*16000*1400012000100008000#6000400020000391739173циркадианное время, чфиз. р-рфиз. р-р + ДМГ* – различие с показателями в 3 ч и 17 ч циркадианного времени в той же группе достоверно(р<0,05; U-тест); – различие с показателем в группе животных, получивших инъекциюфизиологического раствора, в то же время достоверно (р<0,05; U-тест)Рисунок 16 – Влияние однократного введения 1,2-диметилгидразинана генерацию активных форм кислорода (уровень люминолзависимойхемилюминесценции) в медиальной преоптической области гипоталамусасамок крыс на фоне введения физиологического раствора (M±m; n=5-6)Введение 1,2-диметилгидразина достоверно (p<0,05) снижало дневной уровеньобразования АФК до значений, характерных для утреннего и раннего ночного времени,что приводило к исчезновению наблюдаемой в контрольной группе суточной динамикигенерации АФК (рисунок 16).Хроническая ингаляция толуола в дозах на уровне ПДК вызывала достоверное (p<0,05)повышение утреннего уровня генерации АФК в МПО гипоталамуса по сравнению с контролем,что приводило к исчезновению наблюдаемых в норме суточных изменений интенсивностисвободнорадикального окисления (рисунок 17).Таким образом, в МПО гипоталамуса при различных воздействиях, также как и3218000отн.
ед./мг белка16000*1400012000#1000080006000400020000Контроль3 ч ЦВТолуол9 ч ЦВ* – различие с показателем в 3 ч циркадианного времени в той же группе достоверно(р<0,05; U-тест); – различие с показателем в то же время в контрольной группе достоверно(р<0,05; U-тест)Рисунок 17 – Влияние хронического воздействия толуола на генерациюактивных форм кислорода (уровень люминолзависимойхемилюминесценции) в медиальной преоптической области гипоталамусасамок крыс (M±m; n=6-10)в нормальных физиологических условиях, наблюдалась взаимосвязь между уровнем биогенныхаминов и свободнорадикальными процессами.Полученные нами данные позволяют предположить, что суточные ритмы генерации АФКв МПО гипоталамуса связаны с суточными изменениями в содержании биогенных аминовв этой богатой моноаминергическими окончаниями гипоталамической структуре.
Вместе с темуровень генерации АФК может рассматриваться как интегральный показатель, не толькосвидетельствующий об изменении активности моноаминергических систем, но и дающийпредставление об интенсивности множества различных биохимических процессов, связанныхс образованием АФК.Таким образом, изучение суточной динамики образования АФК в структурахгипоталамуса, ответственных за регуляцию эстральных циклов, может служить маркеромнормального функционирования механизмов передачи к этим структурам информациио суточном периодизме, а также нарушения таких механизмов при различных неблагоприятныхвоздействиях на организм.Данные об увеличении уровня общего L-гомоцистеина в плазме крови при пероральномвведении L-метионина согласуются с полученными нами результатами о содержании продуктовперекисного окисления липидов (ТБК-реактивных продуктов), а также нитритов в сывороткекрови, при этом влияние потребления L-метионина на уровень Fe2+/H2O2-индуцированнойхемилюминесценции в сыворотке крови в ходе экспериментов нами обнаружено не было.Так, при исследовании в сыворотке крови уровня вторичного продукта перекисного окислениялипидов малонового диальдегида было обнаружено его достоверное (p<0,01) повышениепри метиониновой нагрузке, указывающее на активацию перекисных процессов в крови(рисунок 18).В настоящем исследовании нами также была выявлена суточная динамика содержаниянитритов в сыворотке крови контрольных животных, с достоверным (p<0,05) повышениемуровня этого показателя к 11 ч ЦВ (рисунок 19).
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
