Диссертация (Молекулярно-генетические аспекты развития гестоза у женщин северо-западного региона Hоссии), страница 8

Обнаружены различия частот генотипа СС и аллели Смежду беременными с гестозом и женщинами контрольной группы из Северной Европы (5,1%против 0,5%, p<0,01, ОШ=11,3; 95%ДИ: 1,5–85,5 для генотипа CC, 20,1% против 14,0%, p<0,02,ОШ=1,4; 95%ДИ: 1,0–2,1 для аллели C) [O’Shaughnessy et al., 2001].

Вместе с тем, у женщинСеверной Африки не найдено ассоциации rs5918 с гестозом (p>0,05) [Pegoraro et al., 2003].Связи вариантов этого полиморфного сайта с риском гестоза не выявлено и в работеотечественных авторов [Радзинский и Галина, 2007].ГенITGA2локализованвлокусе5q11.2,состоитиз30экзонов[http://www.ncbi.nlm.nh.gov/]. Продукт гена (интегрин α2 тромбоцитов) представляет собоймембранный гликопротеин GPIa (platelet glycoprotein Ia), который вместе с GPIIa натромбоцитах образует рецептор для коллагена [Воронина и др., 2006].В базе NCBI зарегистрировано более 2300 полиморфных участков гена ITGA2 в томчисле rs1126643 (807C>T) [http://www.ncbi.nlm.nih.gov/]. Частота аллели T в разных популяцияхсоставляет: европейцы - 25-43%, азиаты - 29-41%, африканцы - 23-31%, американцы - 43-46%[http://www.ensembl.org/].

Аллель T ассоциирована с повышенной экспрессией ITGA2 иповышенной адгезией тромбоцитов к коллагену [Moshfegh et al., 1999; Воронина и др., 2006;Reiner et al., 2007]. Gerhardt A.et al. (2005b) показали, что аллель Т увеличивает риск потерибеременности на ранних сроках. Данные о связи rs1126643 с развитием гестоза покаотсутствуют.Ген PAI1 картирован в области 7q21-22, включает 9 экзонов, имеет размеры около 12т.п.о. и кодирует ингибитор тканевого активатора плазминогена типа 1 (PAI1), которыйпродуцируется клетками сосудов и в неактивной форме депонируется в тромбоцитах[http://www.ncbi.nlm.nh.gov/].

PAI1 является важным регулятором фибринолиза. Уровень PAI1 вкрови повышен при многих патологических состояниях [Охтырская и др., 2011]. Избыточноеколичество PAI1 приводит к снижению фибринолитической активности крови и, как следствие,28гиперкоагуляции, предрасполагающей к развитию гестоза [Охтырская и др., 2011]. Есть данныео важной роли PAI1 в регуляции инвазии трофобласта и маточно-плацентарной циркуляции[Зайнуллин и др., 2007].ВбазеNCBIзарегистрировано506полиморфныхсайтоввгенеPAI1[http://www.ncbi.nlm.nh.gov/]. Повышение уровня PAI1 в крови может быть связано с делецией5G>4G, расположенной в –675 положении от стартовой точки транскрипции гена PAI1(rs1799768) (рисунок 3). Установлено, что генотип 4G4G характеризуется повышеннымуровнем транскрипции. Так у носителей генотипа 4G4G уровень PAI1 на 25-30% выше, чем внорме [Dawson et al., 1993].

Частота аллели 4G в разных популяциях составляет 50-60%[http://www.ensembl.org/].Рисунок 3 - Влияние делеции -675 5G>4G (rs1799768) на концентрацию PAI1 в плазмекрови [Kohler and Grant, 2000]Ассоциация аллели 4G гена PAI1 с гестозом ранее была показана в наших исследованиях[Mozgovaia et al., 2002].

У женщин Северо-западного региона России частота аллели 4G выше упациенток с гестозом (71,1%) по сравнению с контрольной группой (57,5%) [Mozgovaia et al.,2002]. Однако результаты, полученные для разных этнических групп, сильно варьируют. Такделеция 5G>4G (rs1799768) оказалась фактором риска тяжелого гестоза у жителей Японии(p=0,01; ОШ=1,5, 95%ДИ:1,1- 2,1 для аллели 4G) [Yamada et al., 2000] и Италии (p=0,03) [Fabbroet al., 2000]. Однако для финнов положительной ассоциации не найдено (p=0,377) [Häkli et al.,2003].

В исследованиях немецких авторов у пациенток c тяжелым гестозом, развившемся насроке 25,7 недель, отмечалась повышенная частота генотипа 5G5G (p=0,024) [Gerhardt et al.,2005a]. Результаты нескольких мета-анализов также оказались противоречивыми. В трехработах подтверждена ассоциация rs1799768 гена PAI1 с гестозом [Wiwanitkit, 2006; Buurma etal., 2013; Morgan et al., 2013], в одной - нет [Staines-Urias et al., 2012].1.7.2 Гены регуляции артериального давления29Согласно данным литературы в патогенезе гестоза большую роль играет ренинангиотензиновая система (РАС) которая принимает участие в регуляции АД, сосудистогоремоделирования и внеклеточного объема жидкости [Irani and Xia, 2008; Решетников и др.,2013]. Длительная активация РАС сопровождается спазмом и повышением сопротивленияпериферических сосудов, гипоперфузией органов и тканей, задержкой жидкости, развитиемдисфункции эндотелия, АГ и другими нарушениями, характерными для гестоза [Шулутко,2001].

Имеющиеся данные свидетельствуют о роли полиморфизма генов РАС в развитиигестоза. Ранее в нашей лаборатории была изучена ассоциация вариантов rsl799752 генаангиотензин-превращающего фермента ACE и гестоза [Mozgovaia et al., 2002]. В настоящейработе исследована ассоциация с гестозом вариантов полиморфных сайтов других генов РАС:REN rs2368564, AGT rs699, AGTR1 rs5186 и AGTR2 rs11091046.Ген REN находится в локусе 1q32, имеет 9 экзонов и размер 12 т. п. о.[http://www.ncbi.nlm.nh.gov/]. Продукт гена - белок проренин – предшественник ренина,вырабатывается юкстагломерулярными клетками почек, синтезируется и во многих другихтканях [http://omim.org/]. Ренин контролирует превращение ангиотензиногена в ангиотензин 1,который затем под действием ACE превращается в ангиотензин 2 [Баранов и др., 2009].Согласно данным NCBI в гене REN содержится 1016 полиморфных участков[http://www.ncbi.nlm.nih.gov/].

Один из них - нуклеотидная замена 1051G>A в 9 экзонеассоциирована с эссенциальной гипертензией. Группе японских авторов не удалось выявитьассоциации данной замены с гестозом [Maruyama et al., 2005].Другое изменение в нуклеотидной последовательности - замена 83G>A (rs2368564) в 8интроне.

Частота аллели A варьирует в разных популяциях: европейцы - 22-30%, азиаты - 1828%, американцы - 27-32%, африканцы - 22-34% [http://www.ensembl.org/]. Замена 83G>A(rs2368564) связана с высоким уровнем активности ренина в плазме крови и повышением АД[Procopciuc et al., 2011]. К настоящему времени проведены лишь единичные исследованияrs2368564 у женщин с гестозом, результаты которых противоречивы. В работе испанскихавторов ассоциации гестоза с заменой 83G>A не выявлено [Romero et al.,2010], но она былаустановлена румынскими исследователями [Procopciuc et al., 2011].Ген AGT располагается в локусе 1q42—43, содержит 9 экзонов, и охватывает около 12т.п.о.

[http://www.ncbi.nlm.nh.gov/], кодирует белок ангиотензиноген — предшественниквазопрессоров ангиотензина 1 и ангиотензина 2, экспрессируется в печени под контролемэстрогенов, глюкокортикоидов и тиреоидных гормонов [Торшин и др., 2009].Ген AGT имеет более 1100 полиморфных сайтов [http://www.ncbi.nlm.nih.gov/]. Наиболееизучена однонуклеотидная замена 704T>C (rs699), вследствие которой треонин замещается наметионин в положении 235 (М235Т) белка. Частота аллели C сильно варьирует в разных30популяциях: европейцы - 35-50%, азиаты - 80-87%, африканцы - 79-91%, американцы - 58-71%[http://www.ensembl.org/]. Установлена ассоцииация rs699 с уровнем AGT в крови, при этомгенотипу CC соответствует высокая концентрация ангиотензиногена, а генотипу TT, напротив,низкая [Zafarmand et al., 2008a]. Ассоциация rs699 с развитием гипертонической болезнихорошо установлена [Jurkovicova et al., 2007; van Rijn et al., 2007]. Показана связь аллели C сгипертензией, индуцированной беременностью [Arngrimsson et al., 1993; Kobashi, 2006;Zafarmand et al., 2008a].Как и в случае многих других ранее рассмотренных генов-кандидатов гестоза данныелитературы для гена AGT весьма противоречивы [Bouba et al., 2003; Medica et al., 2007; Jenkinset al., 2008; Knyrim et al., 2008; Zafarmand et al., 2008b; Aggarwal et al., 2011; Staines-Urias et al.,2012; Lin et al., 2012; Buurma et al., 2013].Ген AGTR1 локализован в локусе 3q21–q25, содержит 5 экзонов, его размер 55 т.п.о.[http://www.ncbi.nlm.nh.gov/].

Продукты гена – рецепторы к ангиотензину 2 типа 1 (AGTR1)экспрессируются в различных органах (сосуды, сердце, печень, кора надпочечников, почки,легкие,мозг).Основныефункцииэтихрецепторов:связываниеангиотензина2,вазоконстрикция, передача сигналов пролиферации, антагонист оксида азота (NO) [Баранов идр., 2009, Решетников и др., 2013].ВгенеAGTR1известнооколо1000полиморфныхучастков[http://www.ncbi.nlm.nih.gov/]. Наиболее изученной является замена аденина на цитозин впозиции 1166 гена AGTR1 (1166A>C, rs5186). Аллель C ассоциирована с повышениемэкспрессии белка, что является следствием нарушения связывания мРНК AGTR1 ссоответствующей микроРНК miR155 [Sethupathy et al., 2007].

Установлено, что наличие аллелиC или генотипа CC повышает риск АГ [Сильвестрова и др., 2008] и диабетической нефропатии[Shah et al., 2013]. Распространенность аллели C варьирует от 1-9% среди африканцев и 5-10% упредставителейазиатскойпопуляциидо23-32%вевропейскойпопуляции[http://www.ensembl.org/].Показана положительная ассоциация замены 1166A>C (rs5186) с риском развитиягипертонии беременных и гестоза в польской [Nalogowska-Glosnicka et al. 2000; SeremakMrozikiewicz et al. 2000; Seremak-Mrozikiewicz et al., 2005] и японской популяциях [Kobashi,2006].

Однако в других исследованиях связь гипертонии беременных или гестоза с этойзаменой не подтвердилась [Morgan et al., 1997; Morgan, 1998; Plummer, 2004; Roberts 2004;GOPEC Consortium, 2005].В мета-анализе 18 публикаций (1635 пациентов и 1934 контрольных образцов)установлено, что аллель С, генотипы AC и СC являются факторами риска развития гипертонии31беременных [Zhang et al., 2014]. Однако это исследование и другие мета-анализы [Zhao et al.,2012b; Buurma et al., 2013] не подтвердили ассоциации замены 1166A>C (rs5186) с гестозом.Ген AGTR2 находится в локусе Xq22-q23, содержит 3 экзона размером в 3,8 т.п.о.[http://www.ncbi.nlm.nh.gov/].