Диссертация (Сравнительно-морфологическое исследование желточного синцитиального слоя в развитии костистых рыб), страница 5

Так, в конце резорбции желткау Pterophyllum scalare и Coregonus alpinus ядра ориентированы перпендикулярно поверхностижелточной сферы и имеют форму «комет». Наряду со сферическими и каплевидными ядрами, вЖСС обыкновенного вьюна присутствуют ядра неправильной формы, часто имеющие одну илиболее перетяжек, в результате чего появляются сложные, ветвящиеся фигуры (Nishida, 1958;Yamada, 1959b; Kunz, 1964; 2004; Yamamoto, 1982; Корж и др., 1989; Кауфман, 1990).В периоды бластулы, гаструлы и раннего сомитогенеза ядра ЖСС Teleostei совершаютнаправленные движения (Long, 1980b; D'Amico, Cooper, 2001). В ходе эпиболии у данио-рериоядра движутся вдоль анимально-вегетативной оси, отставая от края обрастания, где остаютсянемногочисленные ядра.

Ядра осевого домена сходятся к средней линии. Глубинные клетки,совершающие движения конвергенции, направляют движение ядер ЖСС, модулируя ток егокортикальной цитоплазмы, скорее всего, устанавливая физический контакт с мембраной ЖССчерез Е-кадгерин (Carvalho et al., 2009). Как было показано в экспериментах с ингибированиемокислительного фосфорилирования, для движения ядер ЖСС, вероятно, достаточно энергии изанаэробных источников (Mendelsohn, Gitlin, 2008).Форма, размер и число ядер в разных участках ЖСС на каждой стадии может быть неодинаковым и, вероятно, изменяется во времени.

Так, в ЖСС Clupea pallasii marisalbi и Zoarcesviviparus в одних областях ядра образуют скопления, в других - находятся далеко друг от друга(Кауфман, 1990). Ядра ЖСС H. olidus крупные, в передней части многочисленные, круглые, вдругих областях продолговатые, количество их меньше. У Sebastes schlegeli крупные ядрарасположены вокруг вакуолизированной области ЖСС. Ядра ЖСС Notothenia coriiceps оченьбольшие, эллипсоидные. Самые крупные и в наибольшем количестве, собранные в кластеры,располагаются вдоль желточных вен (Twelves, Bachop, 1979).

У O. latipes в нормальных условияхкластеры ядер не возникали (Kageyama, 1996). У E. lucius по направлению к осевым структурамразмер ядер увеличивается, а концентрация уменьшается. Небольшие ядра круглые, средние –круглые, продолговатые или неправильной формы, крупные (до 125 мкм) – неправильной формы,очень вытянутые или лопастные (Bachop, 1965). При уменьшении объема массы желтка ядрарасполагаются более тесно, и у Stizostedion lucioperca, Dicentrarchus labrax, Sparus aurata и20Anguilla japonica к концу резорбции желтка могут образовывать кластеры (Mani-Ponset et al.,1996; Yamamoto, 1982). Ядра ЖСС H. olidus из сферических становятся овальными илинеправильной формы и располагаются по внешнему краю (Yamada, 1959a).

Значениеопределенной локализации ядер у представителей того или иного вида не очевидно.Ядра ЖСС O. latipes содержат не менее 3 ядрышек, и их число со временем уменьшается,у личинок C. pallasii marisalbi и Z. viviparus – 1-2, S. trutta morpha fario – 1-7 (Walzer,Schönenberger, 1979a; Кауфман, 1990; Kageyama, 1996).Время начала синтеза рРНК и появления ядрышка в ядрах ЖСС и клеток бластодермызародышей Teleostei представляет собой самостоятельную интригующую проблему.

Вбластомерах O. latipes ядрышки появляются на стадии поздней бластулы, а в ЖСС в началегаструляции (Kageyama, 1996). У обыкновенного вьюна рибосомы располагаются плотнымископлениями между гранулами желтка. Количество рибосом увеличивается от вегетативногополюса икринки к анимальному, ЖСС заполнен рибосомами. В базальных клетках бластодермысодержание рРНК выше, чем в поверхностных (Айтхожин и др., 1964; Костомарова, Нечаева,1971). У данио-рерио многие белки, характерные для ядрышка, имеют материнскоепроисхождение.

Работы, в которых был бы указан момент начала синтеза рРНК и появленияядрышек в ЖСС и диплоидных клетках зародыша данио-рерио нам не известны.2.2.4. Структура ЖССУ большинства изученных видов Teleostei морфологические характеристики ЖСС вразных участках неодинаковы на каждой стадии развития, что отражает его функциональнуюрегионализацию. Эти особенности могут быть связаны как с анатомическими особенностямизародышей и личинок, взаимодействием ЖСС с прилежащими структурами, так и сособенностями организации массы желтка, например, наличием жировой капли.

Возможновлияние и других факторов.Имеются фрагментарные данные об ультраструктуре ЖСС ранних зародышей S. truttamorpha fario, данио-рерио, O. latipes, P. fluviatilis. Подробно описана ультраструктура ЖСС в ходераннего эмбриогенеза F. heteroclitus (Lentz, Trinkaus, 1967; Trinkaus, Lentz, 1967; Thomas, 1968;Walzer, Schönenberger, 1979a; Krieger, Fleig, 1999; Ninhaus-Silveira et al., 2007). В бластуле F.heteroclitus базальная часть ЖСС и ее длинные ветвящиеся выросты заполнены гранулами ичастицами гликогена. В цитоплазме равномерно распределены митохондрии, неопушенныепузырьки, мембранные цистерны, крупные вакуоли.

Многочисленны сложные аппаратыГольджи. Имеются крупные мультивезикулярные тельца. Количество и размер белковых илипидных включений уменьшается от базальной к апикальной части цитоплазмы. Во время21гаструляции выросты укорачиваются и остаются только по краю, уменьшается количествогранул. Центральная область относительно тонкая и гладкая. В ЖСС становится меньшелипидных включений, белковых глобул и мультивезикулярных телец. Рибосом мало.На стадиях бластулы и гаструлы апикальная поверхность ЖСС несет складки имикроворсинки (Lentz, Trinkaus, 1967; Kageyama, 1985; Rawson et al., 2000; Cheng et al., 2004).Большинство электронно-микроскопических исследований ЖСС было выполнено наличинках.

Существуют различные варианты ультраструктурной организации ЖСС. Мы будемрассматривать ее в направлении от базальной поверхности ЖСС к апикальной.У S. trutta morpha fario фибриллярные структуры проникают в жидкую массу желтка, отнее отсекаются сферические гранулы, которые затем окружаются мембраной. Междусферическими гранулами остаются вытянутые фрагменты желтка. Большие пластинкиподразделяются на более мелкие, формирующие кластеры.

Механизм поглощения пластинок неясен, но, очевидно, что это не фагоцитоз и не пиноцитоз. У многих видов ЖСС образует выростыв толщу желтка. У личинок G. morhua и Pleuronectes platessa они имеют вид пузырьков настебельках (Lentz, Trinkaus, 1967; Walzer, Schönenberger, 1979a; Morrison, 1993; Skjarven et al.,2003).ЖССличинокTeleosteiподразделяютнабазальнуюзону лизисажелткаицитоплазматическую зону.

Зона лизиса желтка наполнена гомогенными желточнымивключениями круглой и овальной формы, уменьшающимися в размере в направлениицитоплазматической зоны. Более того, по распределению органелл отмечают разную степеньстратификации (поляризации) цитоплазматической зоны, причем в ходе развития организацияЖСС может меняться.Цитоплазматическая зона ЖСС S. trutta morpha fario, S. gairdneri, и O. bicirrhosum имеетвыраженную поляризацию. Сильно развитый шЭПР локализуется в базальной области иорганизован в трабекулы, расположенные параллельно желтку.

В ходе развития трабекулышЭПР ориентируются перпендикулярно желтку. Ядра, всегда окруженные многочисленнымимитохондриями, находятся между наиболее апикальными пластинками зоны лизиса желтка итрабекулами шЭПР или в областях, свободных от них. АГ представлен сразу после зоны лизисажелтка в областях, лишенных трабекул шЭПР, и в начале апикальной «области солюбилизации»,содержащейтакжегладкийЭПР(Walzer,Schönenberger,1979b;термин«областьсолюбилизации» применительно к ЖСС предложен этими авторами). Только в ней имеютсямикротрубочки. Митохондрии наиболее многочисленны в области солюбилизации (Walzer,Schönenberger, 1979a, b; Jaroszewska, Dabrowski, 2009).22В ЖСС S. aurata базальная и срединная области содержат развитый шЭПР и ядра,большинство митохондрий локализуется в апикальной области (Kjørsvik, Reiersen, 1992;Morrison, 1993; Mani-Ponset et al., 1996).В ЖСС S.

lucioperca и D. labrax наблюдается равномерное распределение шЭПР имитохондрий и преимущественное расположение АГ в средней части ЖСС, но у последнего вначале фрагментации желтка ЖСС подразделяется на две зоны (Mani-Ponset et al., 1996).Не поляризованный ЖСС описан у P. platessa. Распределение и особенности органелл вразных участках ЖСС этого объекта меняются в ходе развития. В эндотрофный период, когдаЖСС уже полностью покрывает желток, дорсолатеральная часть его электроноплотная, сразвитым ЭПР, свободными рибосомами и маленькими митохондриями с несколькимикристами; ядра редки.

В дорсальной части находятся крупные и узкие ядра и сеть шЭПР. Послеоткрытия рта крупные ядра, окруженные шЭПР и митохондриями, располагаются в центре ЖСС,а периферические зоны, в основном, лишены органелл (Skjarven, et al 2003). ЖСС S. schlegeli настадии, соответствующей периоду вылупления, имеет две области, одна из которых содержитразвитый гладкий ЭПР, митохондрии и большое количество гликогена, а другая – шЭПР и АГ(Shimizu, Yamada, 1980).Митохондрии ЖСС разнообразны по форме.

У S. trutta morpha fario они сферические,эллипсоидные, в форме гантели, кольцеобразные, с хорошо выраженными кристами (Walzer,Schönenberger, 1979b).Митохондрии ЖСС S. schlegeli овальные, палочковидные и оченьвытянутые, имеют многочисленные трубчатые кристы, матрикс низкой электронной плотностибез включений и волнистые наружную и внутреннюю мембраны (Shimizu, Yamada, 1980).В цитоплазматической зоне имеются «псевдовезикулярные структуры», «кристаллиновыетельца» и немногочисленные желточные пластинки двух типов, отличающиеся по своимхарактеристикам:болеемелкие,гомогенныеилигетерогенные,агрегирующиеподмикроворсинками, и более крупные, гетерогенные, в базальной части цитоплазматической зоны.Гетерогенные пластинки могут быть обрамлены трех или четырехслойной концентрическоймембранной системой.