Диссертация (Разработка подходов к стандартизации инновационного лекарственного средства в рамках реализации программы стратегии фарма 2020), страница 15

Biotechnol. Biochem. – 2001. – № 8(65). – P. 1893–1896.107. Weimann A. Quantification of 8-oxo-guanine and guanine as the nucleobase,nucleoside and deoxynucleoside forms in human urine by high-performance liquidchromatography–electrospray tandem mass spectrometry / A. Weimann, D. Belling,H.

E. Poulsen. // Nucleic Acids Res. – 2002. – № 2(30). – P. e7.108. Yang M.K. Protective role of germanium-132 against paraquat-inducedoxidative stress in the livers of senescence-accelerated mice / M.K. Yang, Y.G. Kim// J. Toxicol. Environ. Health. – 1999. – № 12(58). – P. 289–297.109.

Yokochi S. Hepatoprotective Effect of Propagermanium on Corynebacteriumparvum and Lipopolysaccharide-Induced Liver Injury in Mice / S. Yokochi et al. //Scand. J. Immunol. – 1998. – № 2 (48). – P. 183–191.122ПРИЛОЖЕНИЯПриложение 1. Установление норм качества субстанции ациклогермания. Проектнормативной документации.МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИНомер реестровой записи № ______________Дата внесения в государственный реестр лекарственных средств«____»________________ 20___ г.(наименование юридического лица, на имя которого выданорегистрационное удостоверение, адрес)(наименование юридического лица, на имя которого выданорегистрационное удостоверение, адрес)НОРМАТИВНАЯ ДОКУМЕНТАЦИЯ_________________________________________(номер)АЦИКЛОГЕРМАНИЙ фармацевтическая субстанцияПРОИЗВОДИТЕЛЬФАСОВЩИК (ПЕРВИЧНАЯ УПАКОВКА)УПАКОВЩИК (ВТОРИЧНАЯ (ПОТРЕБИТЕЛЬСКАЯ) УПАКОВКА)ВЫПУСКАЮЩИЙ КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА123СПЕЦИФИКАЦИЯАЦИКЛОГЕРМАНИЙ, фармацевтическая субстанцияПоказательОписаниеМетодНормаВизуальныйБелый или почти белыйкристаллический порошок беззапахаСпектрометрия винфракрасной областиИнфракрасный спектрсубстанции, снятый в области от4000 до650 см-1 по положениюполос поглощения долженсоответствовать прилагаемомурисунку спектр астандартногообразца ациклогермания(Приложение 1)Ацикловир: ВЭЖХВремя удерживания основногопика на хроматограммеиспытуемого раствора должносоответствовать времениудерживания основного пика нахроматограмме стандартногораствораАргинин: Качественнаяреакция с α-нафтолом вщелочной среде (реакцияСакагучи)Должно образовыватьсяустойчивое оранжево-красноеокрашиваниеЦитрат-ион: Качественнаяреакция осаждения хлоридомкальцияДолжен образовываться белыйосадок при кипячении раствораПодлинностьРастворимостьГФ XIIIСубстанция должна быть оченьлегко растворима в водеочищенной, мало растворима вхлороформе, мало растворима вметанолеГФ XIIIРаствор субстанции в водеочищенной должен бытьпрозрачным или выдерживатьсравнение с эталоном IЦветность раствораГФ XIIIРаствор субстанции в водеочищенной должен бытьбесцветным или выдерживатьсравнение с эталоном Y7pHpH: ГФXIII;потенциометрическийПосторонниеВЭЖХПрозрачностьраствораpHот 2,0 до 2,5 (1% водныйраствор)Единичнойнеидентифицированной примеси124примесиКоличественноеопределение:Микробиологическая чистотадолжно быть не более 0,5%.Суммы примесей должно быть неболее 1%.

Содержание гуанина всубстанции ациклогерманиядолжно составлять не более 0,5 %.Германий: АтомноабсорбционнаяспектрометрияСодержание германия всубстанции должно быть впределах от 10,0 % до 12,5%Ацикловир: ВЭЖХСодержание ацикловира всубстанции должно быть впределах от 16,0 % до 19,0 %ГФ XIIIСубстанция должнасоответствовать требованиямкатегории 1.2125Определение. Субстанция АЦИКЛОГЕРМАНИЙ является комплекснойсоединением, состоящим из двух атомов германия, фрагмента ацикловира,соединенных четырьмя цитрат-ионами и фрагментом аргинина.Структурная формула.OHOOOOO+H3NONHNOHNNOOH2OHOHOGeONHHO+H3NOOOONHOHNH2Эмпирическая формула.C38H45Ge2N9O33Молекулярная масса.1301,07 г/мольОписание. Белый кристаллический порошок без запаха.Подлинность.1) Спектрометрия в инфракрасной области. Инфракрасный спектрсубстанции, снятый в области от 4000 до 650 см-1 в диске с калия бромидом,по положению полос поглощения должен соответствовать прилагаемомурисунку спектра АЦИКЛОГЕРМАНИЙ (Приложение 1).2) ВЭЖХ.

Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемогораствора должно соответствовать времени удерживания основного пика нахроматограмме стандартного раствора (*см. раздел «Количественноеопределение»).3)Качественная реакция с α-нафтолом в щелочной среде (реакцияСакагучи).126Испытуемый раствор.см. раздел «pH».α-нафтола спиртовой раствор 0,2%.

0,2 г α-нафтола растворяют в этаноле 96%и доводят объем раствора тем же растворителем до 100 мл.Мочевины раствор 40%. 10 г мочевины растворяют в небольшом количествеводы очищенной и доводят объем раствора водой очищенной до 25 мл.В пробирку вносят 2 мл испытуемого раствора, далее прибавляют 2 мл натриягидроксида раствора 10% и несколько капель α-нафтола спиртового раствора0,2%. Содержимое пробирки тщательно перемешивают, затем добавляют 0,5 млнатрия гипобромита раствора и тщательно перемешивают. После появленияоранжево-красного окрашивания немедленно прибавляют 1 мл мочевины 40%раствора. Должно образовываться устойчивое оранжево-красное окрашивание.Параллельно проводят контрольный опыт.4) Качественная реакция осаждения хлоридом кальция.

К 4 мл испытуемогораствора (см. раздел «pH») прибавляют 4 мл кальция хлорида раствора 0,02М(ГФ XIII), раствор остается прозрачным. При кипячении полученногораствора образуется белый осадок, растворимый в 0,1 растворехлористоводородной кислоты (ГФ XIII).Растворимость. Испытание проводят в соответствии с требованиями ГФ XIII.Субстанция должна быть очень легко растворима в воде очищенной, малорастворима в хлороформе, мало растворима в метаноле.Прозрачность раствора. Испытание проводят в соответствии с требованиямиГФ XIII, ОФС 42-0051-07.

Раствор субстанции в воде очищенной должен бытьпрозрачным или выдерживать сравнение с эталоном I.Цветность раствора. Испытание проводят в соответствии с требованиями ГФXIII. Раствор субстанции в воде очищенной должен быть бесцветным иливыдерживать сравнение с эталоном Y7.127pH.Испытуемый раствор.0,5 г(точная навеска) испытуемой субстанциирастворяют в воде очищенной и доводят объем раствора водой очищенной до50мл.Проводят потенциометрическое определение рН в соответствии стребованиями ГФ XIII. Измеренное значение pH должно быть в диапазоне от2,0 до 2,5.Посторонние примеси.Определение примеси гуанина.Определение проводят методом ВЭЖХ при условиях, описанных вразделе «Количественное определение».Для приготовления исходного стандартного раствора гуанина 20 мгстандартного образца (точная навеска) помещают в мерную колбувместимостью 100 мл, доводят до метки подвижной фазой, тщательноперемешивают до полного растворения образца.

1 мл полученного растворапереносят в мерную колбу вместимостью 10 мл, доводят до метки подвижнойфазой, тщательно перемешивают.Хроматографируют растворитель (подвижную фазу), стандартный раствор(не менее 6 раз), испытуемый раствор (не менее 2 раз).Содержание гуанина в препарате в процентах (Х) вычисляют по формуле:(Формула 5)X=10  P  S1  a0S 0  a1Где:S1 – площадь пика гуанина на хроматограмме испытуемого раствора(среднее значение);S0 – площадь пика гуанина на хроматограмме стандартного раствора(среднее значение);a1 – навеска субстанции в граммах;a0 – навеска стандартного образца гуанина в граммах;128P – содержание основного вещества в стандартном образце гуанина впроцентах.Содержание гуанина в субстанции ациклогермания должно составлять неболее 0,5 %.Неидентифицированные примеси..Определение проводят методом ВЭЖХ при условиях, описанных вразделе «Количественное определение». Единичной неидентифицированнойпримеси должно быть не более 0,5%.

Суммы примесей должно быть не более1%. Содержание любой единичной неидентифицированной примеси впрепарате (Xi) в процентах вычисляют по формуле (метод процентнойнормализации):(Формула 6)Xi =Sin i = 1  Si 100Где:Si – площадь пика компонента анализируемой смеси.Содержание суммы примесей в препарате (Xобщ) в процентах вычисляют поформуле:(Формула 7)X общ = n Xii =1Пики с площадью менее 0,1 % от площади пика на хроматограмме испытуемогораствора не учитывают.Количественное определение.1) Германий: Атомно-абсорбционная спектрометрия.Исходный стандартный раствора германия (IV) (100 мкг/мл).

Около 0,144 г(точная навеска) германия диоксида (GermaniumOxide, ESPI Metals, США, илидругой аналогичного качества, соответствует около 0,1 г германия) помещают вмерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде и доводят объемраствора водой очищенной до метки. Непосредственно перед использованием 1129мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл,доводят объем раствора водой очищенной до метки и перемешивают.Калибровочные растворы германия (IV). 1 мл, 5 мл и 10 мл исходногостандартного раствора германия помещают в мерные колбы вместимостью 100мл, доводят объемы растворов водой очищенной до метки и перемешивают дляполучения стандартных растворов германия (VI) с концентрацией 1 мкг/мл, 5мкг/мл и 10 мкг/мл соответственно.

Используют свежеприготовленныерастворы.Испытуемый раствор. Около 0,896 г (точная навеска) испытуемой субстанциипомещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют воде очищенной,доводят объем раствора водой очищенной до метки и перемешивают.Непосредственно перед использованием 1 мл полученного раствора помещаютв мерную колбу вместимостью 10 мл, доводят объем раствора водойочищенной до метки и перемешивают. 5 мл полученного раствора помещают вмерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объемы растворов водойочищенной до метки и перемешивают.Измеряют поглощение калибровочных растворов германия (IV)на атомноабсорбционном спектрометре при длине волны 265,2 нм, используя в качествеисточникалампусполымгерманиевымкатодом.Базовуюлиниюустанавливают по воде очищенной.Строяткалибровочныйграфикзависимостивеличиныпоглощенияконцентрации германия(мкг/мл).В тех же условиях измеряют поглощение испытуемого раствора.Содержание германия в препарате в процентах (X) вычисляют по формуле:(Формула 8)Где:Xi =С  100  10  100  100 C  2=a  5  100000aот130С – концентрация германия в испытуемом растворе, определенная покалибровочному графику, в мкг/мл;а – навеска испытуемой субстанции в г;Содержание германия в испытуемой субстанции должно быть в пределах от10,0% до 12,5%.2) Ацикловир.