Диссертация (Совершенствование профилактики обострений атопического дерматита с учетом молекулярно-генетических и иммунологических биомаркеров), страница 9

В связи с этимисключительный интерес представляют скрининговые методы исследования,позволяющие обнаружить ранние изменения в органах пищеварения спомощью диагностических биомаркеров, а именно - методика определениятитров естественных аутоантител (АТ) к тканевым антигенам, позволяющаяпроводить раннюю диагностику патологии органов пищеварения.Показано, что иммунный ответ, первично индуцированный аллергенамивнешней среды, может поддерживаться эндогенными антигенами: ониобнаружены в иммунных комплексах с Ig-E сыворотки крови пациентов с АД.В 90-х годов XX века впервые было обнаружено, что при АД развиваетсяаутоиммунный ответ [223, 224]. Впоследствии антигены, связанные с IgEантителами и способные вызвать аллергическую реакцию немедленного типа,быливыделены,охарактеризованыиклонированы.Онивошлив47номенклатуру ВОЗ как "ara Hom S1-S5" (atopy related antigens Homo sapiens:человеческие антигены, связанные с атопией).

В настоящее времянасчитывается около 140 антигенов, способных связываться с IgE антителами, либо активировать Т-лимфоциты у больных АД [23, 103, 111].Были также выявлены IgE -антитела к внутриклеточным белкам человека. Всыворотке крови больных АД были обнаружены связанные с атопиейантигены, рекомбинантные аналоги которых вошли в международнуюноменклатуру аллергенов как Home S1-S5 [52, 103].

Было показано, чтоаутоаллергены,высвобождаемыеизповрежденныхтканей,могутиндуцировать иммунные реакции с участием тучных клеток, базофилов, Тклеток и IgE [60, 109]. Также, были обнаружены IgG - антитела к тканевымантигенам, таким как миозин и гистон и к "фактору роста эпителия хрусталикаглаза", локализованному также в коже, преимущественно в ядрах клетокбазального слоя эпидермиса. Этот фактор рассматривается как главныйантиген при АД, к которому были обнаружены также и Ig-E-антитела. Вдальнейшем антигены были обнаружены и в поверхностных структурахкератиноцитов [43]. При исследовании IgE и IgG - антител к тканевымантигенам (кератин, коллаген, эластин, миозин и др.) у детей с АД выяснилось,что их уровни прямо коррелируют со степенью тяжести кожного процесса [60,74, 230].Очевидно, что изучение у пациентов с АД функции иммунной системы,заключающейсявэлиминацииизорганизманетольковнешнихраздражителей, но и токсических метаболитов, внесет существенный вклад впонимание тонких механизмов иммуногенеза АД.

Теория о клининговой(«очищающей») функции естественных аутоантител (реализуемой совместнос макрофагами) была высказана впервые И.И. Мечниковым в конце XIX в.[161,162] и поддержана впоследствии P.Grabar [128], И.Е.Ковалевым [33] исовременными иммунологами I. Cohen [109], Y. Shoenfeld [212], И.П.Ашмариным [5] и А.Б. Полетаевым [63].48Согласноданнойконцепции,иммуннаясистемаосуществляетпостоянный антигенный скрининг состава организма и его сравнение сисходным оптимальным образом-матрицей и при выявлении расхожденийзапускает работу механизмы коррекции [61,78].

Специфические аутоантитела,образовавшиесяврезультатеиммунногоответананеблагополучиесобственных органов или тканей, являются своеобразными молекулярнымимаркерами, присоединяемыми к продуктам жизнедеятельности организма,нуждающихся в утилизации (в основном - макрофагами) по физиологическим(старение) и патологическим (болезнь) причинам [33, 237, 238]. Такимобразом,иммуннаясистемаучаствуетвподдержанииобщегометаболического гомеостаза [64]. Аутоантитела класса IgG, направленные ксамым разным антигенам собственного организма, синтезируется в организмечеловека на протяжении всей индивидуальной жизни [4, 23, 64, 63, 78].

Уздоровых лиц содержание в сыворотке крови аутоантител конкретнойорганной специфичности находится в определенном диапазоне нормальныхзначений [70, 33, 109, 131, 213], которые заметно меняются при развитиимногих хронических заболеваний [168]. Характерно, что при развитиипатологических изменений, сдвиги в содержании многих аутоантителпоявляются существенно раньше, чем патологический процесс, которыйможет быть зарегистрирован с помощью общепринятых инструментальных илабораторных показателей (УЗИ, КТ, биохимическое исследование крови) [94,90, 131].

Это обусловлено тем, что задолго до клинической манифестацииболезниначинаютсяперманентныеизмененияуровнейпродукцииопределённых антигенов в тех или иных клеточных популяциях и происходитактивацияапоптозаизбыточнымопределенныхпоступлениемгруппклеточныхклеток,антигеновсопровождающаясявмежклеточныепространства и кровоток [213]. Основываясь на динамике измененийсывороточного содержания аутоантител можно оценивать выраженность49нарушенийворганах,прогнозироватьтечениезаболевания,дифференцированно подбирать терапию и оценивать ее эффективность [213].Было показано, что при исследовании сывороточных уровнейестественных аутоантител у большинства обследованных пациентов сразными дерматозами имелись проявления иммуноактивации и активноговоспаления, а также иммунные признаки сосудистых изменений [23, 60, 74],однако у пациентов с АД такие исследования до сих пор проводились толькопри очень ограниченном наборе тканевых антигенов.Определение уровней аутоантител к антигенам органов пищеваренияявляется инновационным высокочувствительным методом диагностикиранних изменений (нарушений) (обследование «Иммунная карта» потехнологии «Иммункулус» - метод группы Эли-тест).

Данная технологияпозволяет оценить содержание АТ к тканевым (органным) антигенам(используются отечественные тест-системы ООО «Биомаркер», прошедшиемеждународную сертификацию). Данная технология иммунологическогоисследования основана на представлении о том, что естественныерегуляторные аутоантитела класса IgG разной органной специфичностипостоянно синтезируются в организме здорового человека, при отсутствиипатологии находятся в определенном диапазоне нормальных концентраций ивыполняют, в частности, функцию удаления продуктов апоптоза из органов итканей [64, 78, 109, 131, 213].

Изменения уровня АТ могут являться маркерамиранних изменений в органах и тканях (так как развитие любой болезни, какправило, сопровождается патологической активацией апоптоза клетокопределенных органов и увеличением выброса соответствующих антигенов,что влечет за собой изменения продукции аутоантител определеннойспецифичности) и предшествовать клинической манифестации заболевания,что позволяет использовать данный метод диагностики в программахдиспансеризации, в сложных клинических случаях, в прогностических целях[23, 38, 60, 69]. Оценка АТ по технологии «Иммункулус» применяется более5020 лет при хронических инфекционных, воспалительных процессах, прииммунопатологических состояниях [84].

Выявление стойких аномалийсодержанияаутоантителопределеннойспецифичностипозволяетконтролировать изменения в организме пациента (в том числе на этапахпредболезни), обосновать назначение лечебных препаратов и оценитьэффективность проводимой терапии [63].Было показано, что с помощью анализа содержания в сыворотке кровиаутоантител разной специфичности возможно выявить органные нарушения,в том числе и не диагностированные ранее [61]. Среди обследованных лиц салкогольной зависимостью (70 человек) у 30% имелись признаки измененийсо стороны внутренних органов, в том числе – пищеварительной системы(поджелудочной железы – аутоантиген Ins, желудка - аутоантиген GaM,кишечника - аутоантиген Itm), причем в части случаев отмечены признакииммуноактивации, а в части – иммуносупрессии, т.е.

уровни антителизменялись разнонаправленно. В исследовании А.Б. Полетаева (2013) у 84 %обследованных лиц с метаболическим синдромом и сахарным диабетом 2 типаопределялись сниженные уровни GaM - мембранных антигенов клетокслизистой оболочки желудка, ItM - мембранных антигенов клеток слизистойоболочки тонкой кишки, HeS - цитоплазматических антигенов ткани печени,HMМР - антигенов митохондрий клеток печени [65].1.6. Перспективные направления оптимизации профилактикиобострений АДТаким образом, на сегодняшний день известно, что в патогенезе АДважнейшаярольпринадлежитнаследственнойпредрасположенности,иммунным нарушениям и сочетанному действию факторов риска, которыепри определенных условиях "запускают" патологический процесс и влияют вдальнейшем на его течение.

При этом роли известных патогенетическихфакторов у разных больных АД неравнозначны, и стандартизованный подход51к лечению зачастую приводит к его неэффективности: торпидности кожногопроцесса и усугублению тяжести течения заболевания.Молекулярно-генетическиеисследованияАДпоследнихлетзначительно расширили знания о генетических факторах, обусловливающихнаследственную предрасположенность к данному заболеванию. Определеныгены, полиморфные варианты которых ассоциированы с АД, однакорезультаты исследований характеризуются значительной межпопуляционнойвариабельностью, что и определяет дальнейшее направление научного поискав сторону выявления комбинации прогностических факторов развития АД.Это позволит выстроить план персонализированной системы лечения ипрофилактики обострений АД, предотвратить переход заболевания в тяжелуюстепень протекания и избежать, таким образом, негативных побочныхэффектов от необходимости назначения «therapia magna» - системнойиммуносупрессивной терапии, а также послужат направлением нового поискав смежных областях исследования.

Интенсивный анализ генетических иэпигенетических факторов, влияющих на патогенез АД, а также критическихвзаимодействий между генами и окружающей средой позволит разработатьперсонализированные терапевтические и профилактические подходы кпроблеме АД. Например, показано, что обработка кожи увлажняющимисредствами с целью восстановления функции эпидермального барьераэффективно на ранней стадии снижает риск развития АД [136], хотяпроведение систематических исследований для сравнения индивидуальныхувлажняющих средств по-прежнему представляется оправданным [154].Кроме того, предложены различные стратегии, направленные на увеличениеколичества или восстановление дефектного филагрина в эпидермисе. Так, врезультате скрининга библиотеки биоактивных веществ идентифицированонебольшое соединение (JTC801), которое увеличивает экспрессию филаггринав кератиноцитах человека и подавляет воспалительные поражения АД-типа вмышиной модели дерматоза [181].