Отзыв на автореферат 2 (Разработка технологий получения рекомбинантного тимозина бета-4 человека и его аналогов)

Отзыв на автореферат диссертации Макарова Дмитрия Ллексапдровича «Разработка технологий получения рскомбинантного тимозина бета-4 человека и его аналогов», представленной на соискание ученой степени кандидата химических наук по специальности ОЗ.ОК06 - Биотехнология ~в т.ч. бнонанотехнологии) Тимозин бета-4 обладает широким спектром биологической активности и является потенциальным препаратом для лечения трофических язв, ран, ожогов и дерматитов, Регенеративные свойства тимозина бета-4 могут быть иглюльзованы для восстановления поврежденной в результате инфаркта миокарда сердечной мышцы человека. Перспективы использования пептида в составе лекарственных препаратов различной направленности предполагают разработку эффективных способов получения данного препарата. Диссертационная работа Макарова Д.А.

посвящена актуальному вопросу разработке технологий получения рекомбинантного тимозина бета-4 человека и его аналогов. В данной работе проводилась оптимизация и масштабирование существующей технологии получения рекомбинантного пептида. были получены его аналоги. обладающие пролонгированным временем жизни в плазме крови. Кроме того, разработан новый биотехнологический метод получения тимозина бета-4 человека, исключающий стадию химического ацетилирования. Работа состоит из четырех частей.

В первой части диссертантом была оптимизирована и масштабирована лабораторная методика получения рекомбинантного тимозииа бета-4 человека. В результате выполненного исследования выход целевого пептида был увеличен в четыре раза по сравнению с лабораторной методикой. Основным достижением стала разработка пилотного производства, с помощью которого было наработана опытная партия 2,5 г целевого пептида для биологических испытаний, что обуславливает реальную практическую значимость работы. Научная новизна диссертационного исследования определяется второй и третьей частями работы.

Во второй части работы подробно описаны методики получения аналогов целевого пептида: конъюгатов полиэтиленгликоля, полисиаловой кислоты и капроновой кислоты с тимозином бета 4. Доказаны структуры и пролонгированное действие в плазме крови полученных аналогов. В третьей части работы диссертантом описан способ получения нативного тимозина бета-4 с ацетилированием ~п пио, исключая стадию химического ацетилирования и связанные с этой стадией сложности очистки и выделения целевого пептида. Диссертантом обоснованно выбраны ацетилтрансферазы для модификации пептида т кпо и полобраны такие условия культивирования, при которых достигается максимальная эффективность ацетилирования. В четвертой части работы диссертант показал биологическую активность полученного тимозина бета-4 на мышиной модели хронического дерматита. Обработка спины мышей тимозином бета-4 привела к достоверному ослаблению симптомов хронического дерматита н к долгосрочному сохранению терапевтического эффекта.

В качестве замечаний к автореферату можно отнести следующее: - Общее описание молекулы тимозином бета-4 человека, в частности, то, что нативный биологически активный пептнл ацетилирован, дается только на 10-й странице автореферата. Это следовало бы указать в начале автореферата, что облегчило бы дальнейшее восприятие материала, - Получение аналогов тимозином бета-4 с пролонгированным временем жизни описано очень подробно, .в то время как метод ацстнлнрования дезацетилтимозина описан весьма условно.

- Чрезвычайно интересным является использование ннтеин-опосредованного метода для производства целевого ацетилированного пептида. В этом разделе хотелось бы видеть больше иллюстративного материала, например, данные электрофоретического анализа. Указанные замечания не являются критическими и не снижаот общего впечатления от автореферата. Изложенные в автореферате результаты исследования дают достаточно четкое и полное представление о выполненной работе.

Выводы полностью соответствуют полученным результатам. Достоверность большого количества полученных экспериментальных данных подтверждается применением современных аналитических методов и передового оборудования, используемого в работе. Стиль изложения материала автореферата последовательный. ясный и лаконичный. Подытоживая все вышеизложенное, можно заключить, что исследование диссертанта посвящено решению актуальной научной проблемы н выполнено на высоком научном уровне. Диссертационная работа соответствует всем требованиям, предъявляемым к кандидатским диссертациям, установленным в и.

9 кПоложения о порядке присуждения ученых степеней», утвержденного Постановлением Правительства РФ от 24.09.2013 г., а ее автор, Макаров Дмитрий Александрович, заслуживает присвоения ученой степени кандидата химических наук по специальности 03.01.06- Биотехнология 1в т.ч. бионанотехнологин). Научный сотрудник лаборатории инженерной энзимологии .