Диссертация (1173252), страница 10
Текст из файла (страница 10)
Затем срезыпоследовательно инкубировали с кроличьими моноклональными антителамипротив антигена Ki-67 человека (CONFIRM anti-Ki67, «Roche-Ventana») и послеэтого конъюгировали с антикроличьими мышиными IgG антителом противпероксидазыхрена.Сайтысвязыванияантителвизуализировалисиспользованием тетрагидрохлорида 3,3'-диаминобензидина («Ventana MedicalSystems», США), ядра клеток окрашивали гематоксилином.Далее проводился подсчет активности экспрессии маркера Ki-67 свычислением его индекса мечения (ИМ Ki-67) в 10 полях зрения на увеличенииx400 светового микроскопа тремя опытными патологами. При этом патологи небыли знакомы с исходными данными пациентов. После этого данные,полученные по результатам исследования тремя патологами, усредняли.612.3.СтатистическаяКритерии оценки полученных данныхобработкапроводиласьвпрограммеR-project(https://www.r-project.org), для ROC-анализа использовалась библиотека pROC.Для статистического анализа в этой работе использовались непараметрическиеметоды.ГрупповоесравнениепроводилосьпотестуМанна-Уитни,коэффициенты корреляции вычислялись методом Спирмена.Демографические и клинические характеристики материала и результатыизмерений гемодинамических параметров заносились в базу данных, созданную вMicrosoft Excel (Office 2016).
Полученные данные подвергались статистическойобработкеспомощьюкомплектакомпьютерныхпрограммR-project(https://www.r-project.org). Для анализа данных, полученных при обработкепротоколов исследования, применялись методыописательнойстатистики(среднее, стандартное отклонение, медиана, квантили и т.п.), сравнительногоанализа (U-критерия Манна-Уитни), корреляционного и ROC-анализа. Изучениесвязей между факторами-причинами и признаками-откликами осуществлялосьпосредствомкорреляционногоанализасиспользованиемдлярасчетакачественных признаков рангового коэффициента корреляции Спирмена.Для классификации опухолей по параметрам TBF и nTBF использовалиROС-анализ (Receiver operator characteristic).
В основе ROC-анализа лежитпостроение операционной характеристики классификатора или ROC-кривой,которая и используется для бинарной классификации. Операционная криваяпоказывает зависимость количества правильно классифицированных объектов отколичества неверно классифицированных объектов.Функции распределения измеренных гемодинамических параметров дляпредставителей двух разных классов опухолей пересекаются, определяя областиистинно позитивных (RP), ложнонегативных (WN), истинно негативных (RN) и62ложнопозитивных(WP)результатовклассификации.Навеличинусоответствующих областей влияет порог отсечения (пороговое значение – cutoff).Каждомупороговомузначениюсоответствуютопределенныепоказателичувствительности и специфичности.Чувствительность теста определяется долей истинно положительныхпредсказаний в суммарном количестве больных:Чувствительность = RP/RP + WNЭта величина характеризует способность теста как можно точнееотфильтровывать пациентов второго класса.Под специфичностью теста понимают долю истинно негативных случаевсреди пациентов первого класса:Специфичность = RN/RP + WPЭта величина характеризует способность теста обнаруживать пациентоввторого класса.Для оценки значимости классификации используют показатель площадипод операционной кривой – AUC (area under curve).
Существует экспертная шкаладля значений AUC: классификацию считают «отличной» при AUC= 0,9-1,0;«очень хорошей» при AUC=0,8-0,9; «хорошей» при AUC= 0,7-0,8; «средней» приAUC=0,6-0,7.Призначениях0,5-0,6классификациясчитаетсянеудовлетворительной.Оптимальное отсекающее значение определяют по точке перегибаоперационной кривой и для этого значения находят чувствительность испецифичность классификации. Мы использовали для ROC-анализа программу Rproject.ГЛАВА 3. ОЦЕНКА ОПУХОЛЕВОГО КРОВОТОКА ГЛИОМ ГОЛОВНОГОМОЗГА МЕТОДОМ PCASL В СОПОСТАВЛЕНИИ СО СТЕПЕНЬЮЗЛОКАЧЕСТВЕННОСТИ ОПУХОЛЕЙВ результате нашего исследования были получены максимальные значениякровотока (TBF) и максимальные нормализованные значения кровотока (nTBF) вглиомах различной степени злокачественности. Мы выявили значимые различиякровотока в глиомах низкой степени злокачественности (grade I+II) и глиомахвысокойстепенизлокачественности(gradeIII+IV) (p<0,001),приэтомзлокачественные глиомы продемонстрировали более высокие значения кровотока.Полученные параметры TBF и нормализованного TBF представлены в Таблице10.Таблица 10.
Максимальные (TBF) и нормализованные максимальные(nTBF) значения кровотока в глиомах различной степени злокачественностиСтепеньзлокачественности(grade WHO)СреднееСтандартноеСреднееСтандартноемаксимальное отклонение нормализованное отклонениезначениемаксимальноекровотока взначениеопухолях(TBF)кровотока(nTBF)(мл/100г/мин)I36,5115,462,331,03II30,8014,201,690,71III122,8585,096,774,53IV171,0893,309,495,50I+II31,7714,461,800,80III+IV153,6493,138,515,3264При проведении ROC анализа были получены значения чувствительности испецифичности ASL-перфузии при дифференциальной диагностике глиомвысокой и низкой степени злокачественности. Данные представлены в Таблице 11и на Рисунке 3.Таблица 11.
Данные ROC-анализа при сравнении максимальногоопухолевого кровотока (TBF) и максимального нормализованного опухолевогокровотока (nTBF) в группах глиом низкой и высокой степеней злокачественности.TBFnTBFПлощадь под кривой ROC0,9540,95164,0 мл/100г/мин3,6Cпецифичность96,9%98,5%Чувствительность85,1%80,9%Оптимальный порогASL-перфузия обладает высокими показателями чувствительности (85,1%дляTBF(максимальный(нормализованныезначенияопухолевыйкровоток),максимального80,9%опухолевогодляnTBFкровотока))испецифичности (96,9% для TBF, 98,5% для nTBF) в дифференциальнойдиагностике глиом головного мозга. Пороговые значения кровотока составили 64мл/100г/мин при использовании максимальных значений кровотока и 3,6 прииспользовании нормированных значений.
AUC>0,95 при использовании значениймаксимального опухолевого кровотока и нормализованных значений.65Рисунок 3. ROC-кривая. Сравнение максимального кровотока (А) имаксимального нормализованного кровотока (Б) между группами глиом низкой ивысокой степеней злокачественности.В нашем исследовании мы выявили четкие различия кровотока в low- иhigh-grade глиомах (p<0,001) (Рисунок 4).корреляциямеждупоказателямиTBF,Также прослеживается четкаяатакжеnTBF,истепеньюзлокачественности опухоли: коэффициент корреляции по Спирмену дляненормализованных значений составил 0,7 (p<0,001), 95% доверительныйинтервал от 0,59 до 0,79. Для нормализованных значений коэффициенткорреляции составил 0,68 (p<0,001), 95% доверительный интервал от 0,56 до 0,78.66Рисунок 4.
Диаграмма размаха, демонстрирующая кровоток в группахглиом низкой степени злокачественности (grade I-II) и высокой степенизлокачественности (grade III-IV) при использовании значений максимальногоопухолевого кровотока (A) и максимального нормализованного опухолевогокровотока (В).Максимальные значения опухолевого кровотока (TBF) и нормализованныезначения кровотока (nTBF) в группе low-grade глиом оказались болеегомогенными (TBF = 31,77±14,46 мл/100г/мин; nTBF = 1.80±0,80) по сравнению сгруппой high-grade глиом (TBF = 153,64±93,13 мл/100г/мин; nTBF = 8,51±5,53).Клинический пример №1. Женщина, 16 лет.
Последние 4 года беспокоятголовные боли преимущественно в правой височной области. Шесть месяцевназад была автоавария с последующей анте- и ретроградной амнезией. В связи сэтимвыполнилаМР-исследование.НаМР-изображенияхопределяетсявнутримозговое объемное образование, локализованное в правой лобной области,верхней и средней лобных извилинах. Образование имеет повышенный сигнал врежимах Т2 и Т2-FLAIR, пониженный в режиме Т1. После в/в введенияконтрастного вещества данных за его патологическое накопление получено небыло. ASL-перфузия демонстрирует низкие показатели кровотока: TBF = 18,17мл/100 г/мин.
На основании клинико-рентгенологических данных был поставлендиагноз диффузная астроцитома правой лобной доли (Рисунок 5). Проведеноудаление опухоли. Гистологический диагноз: диффузная астроцитома.67Рисунок 5. МР-исследование пациента с объемным образованием правойлобной доли. ASL-перфузия демонстрирует низкие показатели кровотока: TBF =18,17 мл/100 г/мин. Учитывая данные МРТ до и после в/в введения контрастноговещества и низкие показатели опухолевого кровотока был поставлен диагноздиффузная астроцитома.Клинический пример №2.
Мужчина, 20 лет. Четыре года назад впервыеразвился приступ пароксизма утраты сознания с мышечными судорогами вконечностях. Подобная симптоматика повторялась с частотой 2-3 раза в сутки,частота приступов к моменту обследования достигла 5-7 раз в сутки. Припроведении МРТ головного мозга в левой височной области определяетсявнутримозговое объемное образование, распространяющееся в левую лобнуюобласть и в область левого гиппокампа. После в/в введения контрастноговещества участков его патологического накопления в строме образованиявыявлено не было, в центральных отделах опухоли определяется расширенная иизвитая средняя мозговая артерия. При проведении ASL-перфузии отмечаетсявыраженное повышение опухолевого кровотока до 344,6 мл/100г/мин.
Несмотряна отсутствие патологического контрастирования, учитывая данные кровотока,68был поставлен диагноз глиома высокой степени злокачественности (Рисунок 6).Проведено удаление опухоли. Гистологический диагноз: анапластическаяастроцитома.Рисунок 6. МРТ-исследование пациента с объемным образованием левойвисочной области с распространением на левую лобную долю и левыйгиппокамп. После в/в введения контрастного вещества участков патологическогоконтрастирования в строме опухоли выявлено не было, в центральных отделахобразования визуализируется расширенная и извитая средняя мозговая артерия.При проведении ASL-перфузии отмечается выраженное повышение кровотока вобразовании (TBF до 344,6 мл/100г/мин).
![](https://s.studizba.com/z.php?f=/templates/si/i/noavatar.png&w=100&h=100&t=1"){kind=avatar}
